Diagnóstico molecular de BVDV (Bovine viral diarrhea virus) baseado na região 5'UTR

• Autor(a) principal: Fernanda Silveira Vieria
• Data de Publicação: 2011
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-99RGBY
• topic: BVDV-2; BVDV-1; RT-PCR; Sêmen de bovino; 5'UTR; Microbiologia; Vírus da diarreia em bovino; Bovino Sêmen

O vírus da Diarreia Viral Bovina (Bovine viral diarrhea virus - BVDV) apresenta distribuição cosmopolita. A prevalência da doença esta diretamente associada com a presença de animais persistentemente infectados, que são o ponto chave na epidemiologia da doença, além da transmissão via sêmen, fômites e transferência de embriões. O código sanitário para os animais terrestres instituído pela Organização Mundial de Saúde Animal (OIE) preconiza a testagem de agentes virais com circulação no gado bovino, incluindo o BVDV. Embora seja feita a exigência da testagem dos touros utilizados em inseminação artificial ou monta natural, o teste no sêmen ainda não é preconizado e necessita ser desenvolvido para triagem de amostras clínicas. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi desenvolver um sistema de diagnóstico por PCR, utilizando a região 5UTR, para a detecção dos vírus BVDV-1 e BVDV-2 em sêmen bovino. Foi realizada a inoculação de isoladosvirais citopatogênicos (amostras NADL e SV253) e não citopatogênicos(amostra NY-1) em cultura de células MDBK para amplificação e titulação viral. Uma amostra sêmen foi infectada experimentalmente com o vírus para posterior extração do RNA e amplificação por RT-PCR a partir de iniciadores e protocolos específicos. Obteve-se a amplificação do fragmento de tamanho molecular esperado (157pb-BVDV1; 160pb-BVDV-2) para os três vírus testados, assim como, na infecção experimental do sêmen. Estes resultados demonstram que o teste desenvolvido pode ser utilizado para a triagem de sêmen bovino.