Efeitos imunomoduladores de uma linhagem de Lactococcus lactis invasiva e produtora do antígeno Hsp65 de Mycobacterium leprae em modelos murinos de colite aguda e crônica induzidas pelo ácido trinitrobenzeno sulfônico (TNBS)

• Autor(a) principal: Vanessa Pecini da Cunha
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/35137
• topic: Doença de Crohn; TNBS; Lactococcus lactis; Hsp65; Doenças inflamatórias intestinais; Doença de Crohn; Ácido trinitrobenzenossulfônico; Lactococcus lactis; Mycobacterium leprae; Proteínas de choque térmico

As doenças inflamatórias intestinais (IBDs) compreendem um conjunto de distúrbios que afetam o trato gastrointestinal. As IBDs abrangem, essencialmente, duas enfermidades: a doença de Crohn (CD) e a colite ulcerativa (UC), que são caracterizadas por uma inflamação crônica e recorrente da mucosa. Além disso, uma das principais complicações associadas à CD é o desenvolvimento de fibrose, resultante do acúmulo excessivo de colágeno nos tecidos intestinais. O tratamento, geralmente, é realizado com aminossalicilatos, corticosteroides, imunomoduladores, terapias biológicas, antibióticos e cirurgia, contudo, está atrelado à vários efeitos adversos. Em vista desse problema, há necessidade de se desenvolver tratamentos mais eficientes aos pacientes com CD. Assim, as proteínas do choque térmico (HSPs) podem ser uma alternativa, haja vista que são consideradas antígenos importantes na regulação das células T efetoras. Logo, este trabalho teve como objetivo avaliar o potencial imunomodulatório da linhagem invasiva e produtora de Hsp65 [L. lactis NCDO2118 FnBPA+ (pXYCYT:Hsp65)] em modelos murinos de colite aguda e crônica, como uma estratégia terapêutica alternativa contra a CD experimental. Para tal, o plasmídeo pXYCYT:Hsp65 foi transformado na linhagem L. lactis NCDO2118 FnBPA+, resultando na linhagem L. lactis NCDO2118 FnBPA+ (pXYCYT:Hsp65). Em seguida, a funcionalidade dessa linhagem foi avaliada, in vitro, para a produção de Hsp65 por Western blotting e para invasão em células Caco-2. Os resultados demonstraram que a linhagem foi capaz de produzir Hsp65 e invadir eficientemente células eucarióticas. Posteriormente, in vivo, a colite experimental foi induzida em camundongos BALB/c pelo ácido trinitrobenzeno sulfônico (TNBS) e o tratamento realizado oralmente com L. lactis NCDO2118 FnBPA+ (pXYCYT:Hsp65) por gavagem intragástrica. A administração oral dessa linhagem recombinante foi capaz de atenuar a severidade da colite aguda, por meio, principalmente, da redução dos níveis de IL-12 e IL-17 e aumento dos níveis de IL-10 e de sIgA. Em seguida, essa linhagem também foi capaz de melhorar a colite crônica (inflamação e fibrose), através da regulação das citocinas pró-fibróticas IL-13 e TGF-β e da citocina regulatória IL-10. Finalmente, este trabalho constitui uma abordagem inovadora e promissora para o tratamento alternativo da CD experimental, utilizando a imunidade de mucosas e a imunomodulação para restaurar a homeostase intestinal dessa IBD.