Diagnóstico do vírus da Reticuloendoteliose Aviária por Imunohistoquímica e Hibridização In Situ

• Autor(a) principal: Vitor Laercio de Sa Leal Santos
• Data de Publicação: 2007
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/SSLA-83GNM9
• topic: imunohistoquímica; Reticuloendoteliose; Imunohistoquímica; Ave doméstica Doenças; Viroses em ave doméstica

O vírus da reticuloendoteliose (VRE) é um retrovírus que infecta várias aves domésticas e silvestres. A infecção pelo VRE pode resultar em imunossupressão, síndrome do definhamento, alta mortalidade ou neoplasia aguda de células reticulares e/ou linfomas de células B ou T. Casos de linfomas causados pelo VRE são semelhantes aos observados na Leucose Aviária (LA) e doença de Marek (DM), o que impossibilita a diferenciação histopatológica entre estas doenças. A metodologia diagnóstica adotada atualmente para o VRE não permite detecção de infecções ativas causadas por este vírus. O presente estudo objetivou o desenvolvimento de métodos de diagnóstico para a detecção de infecções ativas pelo VRE. Foram utilizados amostras, fixadas em formalina a 10% e embebidas em parafina, de fibroblastos de embriões de galinhas - DF-1 CEF e de tecidos de embriões de codorna experimentalmente infectados com o VRE, além de tecidos provenientes de arquivo referentes a infecções naturais e experimentais pelo VRE em galinhas e perus. Os métodos de hibridização in situ e imunohistoquímica foram desenvolvidos utilizando, sonda de RNA construída a partir da variante APC 566 e, anticorpo policlonal anti-VRE disponível comercialmente, respectivamente. Os protocolos de HIS e IHQ desenvolvidos neste estudo foram adequados para a detecção do genoma e antígenos virais das variantes do VRE testadas em células e tecidos embrionários inoculados experimentalmente. Reações cruzadas ou de vírus representativos do grupo Leucose/sarcoma aviário não foram evidenciadas, confirmando a especificidade dos métodos. Em casos de arquivo com transformação neoplásica e diagnóstico prévio de VRE, observou-se marcação positiva em apenas uma amostra (de um total de 10), sugerindo ausência de infecção ativa nestes casos, o que pode comprometer a sensibilidade da HIS e IHQ. Portanto, os métodos de HIS e IHQ desenvolvidos neste estudo, são eficazes para a identificação de infecções ativas pelo VRE