Marcadores de apoptose em células da granulosa humanas e sua correlação com parametros clínicos de pacientes submetidas a hiperestimulação ovariana controlada

• Autor(a) principal: Camila Pereira Almeida
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/50918
• topic: Apoptose; Caspase-3; Caspase-8; Células da granulosa humana; Hiperestimulação ovariana controlada; Apoptose; Caspase 3; Caspase 8; Células da granulosa; Indução da ovulação

A qualidade oocitária depende das interações dos oócitos com as células da granulosa que os cercam. As células da granulosa são essenciais para um processo bem regulado de maturação oocitária, devido a sua produção de hormônios esteroides e não-esteroides, e fatores de crescimento, além de terem um papel crucial na atresia folicular. Aliado a isso, o aumento nas taxas de apoptose nas células da granulosa humana parecem ter efeito negativo na concepção e taxas de gravidez em programas de fertilização in vitro. Assim, o presente trabalho investigou a correlação clínica da expressão proteica de pró caspase-3 e caspase-3 clivada, assim como da expressão gênica de genes envolvidos na cascata de apoptose, em células da granulosa de pacientes submetidas a hiperestimulação ovariana controlada. Foram coletadas células da granulosa de 35 pacientes em tratamento de infertilidade ou com fins de preservação de fertilidade, e as células foram separadas do líquido folicular para expressão de pró caspase-3 e caspase-3 clivada por imunocitoquímica (ICQ), e expressão de genes indutores (BAX, CASPASE 8 e CASPASE 3) e inibidores (BCL2) da apoptose por RT-RTPCRq. Os resultados demonstraram correlações positivas entre a marcação de caspase-3 clivada com a duração do protocolo de indução de ovulação (r = 0.445, p < 0.05), assim como também da expressão gênica de CASPASE 3 e CASPASE 8 (r = 0.462, p < 0.05; r = 0.420, p < 0.05; respectivamente). Adicionalmente, foi observado diferença entre a expressão ICQ de pró caspase-3 e caspase-3 clivada nas células da granulosa (p < 0.0001) e uma correlação positiva entre a marcação de pró-caspase-3 com a proporção de oócitos maduros coletados (r = 0.427, p < 0.05). Portanto, o presente estudo demonstrou que, pacientes submetidas a um tempo maior no protocolo para indução de ovulação apresentam maior proporção de apoptose em células da granulosa humana, e esse evento pode estar relacionado a dois fatores distintos: i) um tempo mais longo de indução de ovulação leva a ativação da apoptose em células da granulosa; ii) um índice apoptótico maior em células da granulosa proporciona um tempo maior para indução da ovulação. Entretanto, a expressão de pró-caspase-3 em células da granulosa humana relaciona- se a uma maior porcentagem de oócitos maduros, indicando que a expressão de pró-caspase-3 pode estar envolvida a uma melhor atividade fisiológica das células da granulosa humana, sendo expressa de forma constitutiva nessas células durante a foliculogênese.