Microscopia de desfocalização e seus limites de validade: um estudo experimental

• Autor(a) principal: Ulisses Moreira Silveira Andrade
• Data de Publicação: 2010
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/IACO-86GSQG
• topic: Física; Microscopia de desfocalização; Física

Objetos de fase tornam-se visíveis quando desfocalizados num microscópio óptico operando em campo claro. Esse fenômeno tem grande aplicação no estudo de células e outras amostras biológicas, que se comportam como objetos de fase em um microscópio. A técnica de Microscopia de Desfocalização é conveniente para estes estudos e foi desenvolvida no Laboratório de Física de Sistemas Biológicos da UFMG. A desfocalização do objeto introduz uma diferença de fase entre a luz difratada e a não difratada que, ao se interferirem no plano imagem, produzem um contraste não nulo. Neste trabalho, aprofundamos o estudo da Microscopia de Desfocalização para grandes desfocalizações e verificamos o limite de validade da aproximação paraxial, considerada no desenvolvimento do modelo teórico. Utilizamos funções de Bessel para escrever o contraste para um objeto de fase desfocalizado. Os objetos de fase utilizados são redes de difração que possuem perfil senoidal, com período e amplitudes conhecidos. Como previsto pela teoria, para um objeto com vetor de onda conhecido, sua imagem oscila com frequência bem definida quando mudamos a posição do foco. Esse efeito é observado para desfocalizações da ordem de até 300_m. Experimentalmente também determinamos a amplitude das redes de difração e obtemos bons resultados quando comparados com as medidas de Microscopia de Força Atômica das mesmas.