Efeito da adição do fulerol ao meio de maturação in vitro de oócitos bovinos

• Autor(a) principal: Victor Mutti Drummond Ribeiro Prata
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/33073
• topic: Reprodução animal; Oocito; Bovino embriões

O estresse oxidativo é a principal causa de baixa eficiência na maturação de oócitos e no desenvolvimento embrionário in vitro de embriões bovinos. Isso ocorre devido a um desbalanço entre a quantidade de espécies reativas de oxigênio (EROs) e antioxidantes. O ambiente in vitro possui alta tensão de oxigênio que, associada a outros fatores como a interferência da luz, presença de espermatozoide e ausência de antioxidantes maternos, leva à maior produção de EROs, se comparado ao ambiente in vivo. No presente experimento, foi avaliado o efeito da adição de fulerol em diferentes concentrações ao meio de maturação in vitro de oócitos bovinos (MIV) sobre as taxas de produção e qualidade dos embriões produzidos. O fulerol é reconhecido como um potente antioxidante, uma molécula muito eletronegativa, estável, e capaz de alcançar locais específicos. Foram utilizados quatro meios MIV: Grupo 1 – controle (CO) (n=461 oócitos): meio TCM 199 bicarbonato; Grupo 2 (F1) (n=461): meio TCM 199 bicarbonato acrescido de fulerol a 1nM; Grupo 3 (F10) (n=439): meio TCM 199 bicarbonato acrescido de fulerol a 10nM; Grupo 4 (F50) (n=451): meio TCM 199 bicarbonato acrescido de fulerol a 50nM. Os oócitos foram maturados em incubadora por 24 horas a 38,5oC, 5% de CO2 e 95% de umidade. Posteriormente, foram fertilizados e cultivados em mesmo meio de fertilização e cultivo, respectivamente. No segundo dia de cultivo (D2), foi avaliada a taxa de clivagem e no sétimo dia de cultivo (D7) foram avaliadas a taxa de produção de blastocistos sobre os embriões clivados e a taxa de produção de blastocistos sobre o total de oócitos maturados. Além disso, após observação e definição dessas taxas, os embriões produzidos foram fixados para avaliação de apoptose celular pelo método de TUNEL. Os oócitos foram avaliados quanto à maturação nuclear pelo método de Hoechst. Não houve diferença estatística (P>0,05) nas taxas de clivagem (73,96%; 73,53%; 73,12%; 76,94%) para T1; F1; F10 e F50, respectivamente. A produção de blastocistos diferiu (P<0,05) entre os tratamentos. CO, F1 e F50 demonstraram resultados estatisticamente semelhantes (P>0,05) (CO=30,15%; F1=27,11%; F50=31,04%). CO e F50 obtiveram resultados superiores (P<0,05) a F10 (23,91%), que não diferiu (P>0,05) do F1. O número total de células por embrião (CO=130,84; F1=129,78; F10=110,72; F50=134,05) e o número total de células apoptóticas (CO=8,52; F1=7,68; F10=7,54; F50=5,85) não diferiram (P>0,05) entre os tratamentos. A taxa de apoptose foi superior (P<0,05) no CO (7,43%) em relação a F50 (4,23%). CO, F1 (5,94%) e F10 (6,98%) não diferiram (P>0,05), assim como F1, F10 e F50 foram estatisticamente iguais (P>0,05). Não houve diferença (P>0,05) entre a taxa de oócitos maturados (Metáfase II) entre os tratamentos (CO=53,3%; F1=48,2%;F10=48,0%; F50=33,3%). Conclui-se que a presença de fulerol no meio MIV não interferiu nas taxas maturação dos oócitos e de clivagem, porém reduziu a produção de blastocistos em meio na concentração de 10nM de fulerol. Na concentração de 50nM de fulerol os resultados de clivagem e produção de blastocistos foram iguais às do grupo controle, porém reduziu a taxa de apoptose, quando comparado com o esse mesmo grupo.