Análise do transcriptoma de córtex cerebral da prole de camundongos infectados por Zika virus

• Autor(a) principal: Letícia Maria Soares Azevedo
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/45756; https://orcid.org/0000-0003-2909-7937
• topic: Zika virus; Transcriptoma; Aumento da infecção dependente de anticorpos; Síndrome Congênita do Zika; Microbiologia; Zika virus; Transcriptoma; Coinfecção

O Zika vírus (ZIKV) é um arbovírus pertencente à família Flaviviridae e sua sintomatologia está associada a sinais clínicos como febre aguda, dor de cabeça, mialgia, exantema maculopapular, dor de garganta e edema nos membros inferiores. Também são observadas complicações neurológicas associadas à infecção por esse vírus, como a Síndrome de Guillain-Barré (SGB) e a microcefalia em recém-nascidos, além de anomalias fetais, no qual é definido como Síndrome Congênita do Zika (SCZ). Mas as consequências da infecção na fase adulta ainda são investigadas, principalmente no contexto de co-circulação de outros flavivírus, que podem acarretar no fenômeno de ADE (aumento da infecção dependente de anticorpos). Por isso, o objetivo desse trabalho foi, através da análise de transcriptoma, avaliar a expressão de genes diferenciais na prole nascida de mães infectadas por ZIKV, na presença ou ausência de anticorpos anti-flavivírus. Para tal, camundongo fêmeas grávidas foram inoculadas com 1x106 UFP/animal de ZIKV por via intraperitoneal no dia embrionário 5,5, na presença ou ausência de 4G2. Após 12 semanas do nascimento da prole, os filhotes foram eutanasiados e o córtex cerebral coletado para análise do transcriptoma. Foram sequenciados 6 amostras de cada grupo por meio do equipamento HiSeq 2500 (Illumina, San Diego, CA, USA). A análise de transcriptoma seguiu os seguintes passos: controle de qualidade, alinhamento, sumarização, quantificação, normalização, análise de expressão diferencial e análise de enriquecimento de genes sets. Os grupos animais foram comparados entre si, sendo eles PBS, ZIKV e 4G2+ZIKV. Foram observados poucos genes diferencialmente expressos quando comparado PBS e ZIKV, sendo a maioria suprimida e estão relacionados principalmente ao ciclo celular e a morfogênese. Em contrapartida, quando comparado ZIKV e 4G2+ZIKV, foi observados uma quantidade grande de genes sendo ativados, referentes à resposta imunológica e produção de citocinas e mediadores inflamatórios, os quais alteraram vias importantes na tentativa do organismo hospedeiro em conter a infecção. Também foi observada a repressão de processos celulares e morfológicos, que corroboram com a patogenia da ZIKV, principalmente no desenvolvimento do sistema nervoso. As alterações neurológicas foram mais bem observadas na análise de splicing alternativo que revelou transcritos provindos de genes distintos àqueles diferencialmente expressos e que alteram principalmente o desenvolvimento neurológico no grupo com a presença de 4G2. Dessa forma, a análise do transcriptoma elucida a gravidade de co-infecções no contexto de ZIKV, ao observar alterações genéticas e metabólicas mais acentuadas na presença de 4G2, que contribuem para um fenótipo mais grave e complicações na fase adulta do indivíduo.