Efeitos dos hormônios tireoidianos na cinética de migração das células trofoblásticas e no perfil endócrino, angiogênico e imune da placenta de ratas e na expressão gênica das células trofoblásticas de camundongo

• Autor(a) principal: Juneo Freitas Silva
• Data de Publicação: 2014
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/SMOC-9TZJZN
• topic: Trofoblasto; Imunologia; Angiogênese; Disfunção tireoidiana; Camundongo; Rata; Migração; Ciência Animal

O objetivo deste estudo foi avaliar in vivo a migração trofoblastática intrauterina e a expressão gênica e proteica de fatores envolvidos no perfil imunológico, angiogênico e endócrino da placenta de ratas com hipotireoidismo e tratadas com L-tiroxina, como também a diferenciação e expressão gênica in vitro de fatores hormonais, angiogênicos e imunes em células trofoblásticas de camundongo com diferentes doses de T3. O hipotireoidismo foi induzido pela administração diária de propiltiouracil. No experimento in vivo os animais foram eutanasiados com 10, 14, 15, 16, 17, 18 e 19 dias de gestação. Avaliou-se a cinética de migração trofoblástica endovascular e intersticial e a expressão imunoistoquímica de INFy, MIF, iNOS, VEGF e Flk-1 nos discos placentários. A expressão gênica de TLR2, TLR4, INF, MIF, TNF, IL-10, iNOS, PL-1, VEGF, Flk-1, PGF, rPlf, sFlt1, MMP2, MMP9 e leptina placentária na placenta foi avaliada pela RT-PCR tempo real. No experimento in vitro os animais foram eutanasiados com 7,5 dias de gestação para a extração e o cultivo do cone ectoplacentário durante 24 e 48 horas em meio padrão sem T3 (controle) e com diferentes doses de T3 (10-4 M, 10-7 M, 10-9 M). A expressão gênica de Tpbp, Prl3b1, VEGF, PGF, PL-1 e INF pelas células trofoblásticas foi avaliada pela RT-PCR tempo real. Os dados dos experimentos in vivo e in vitro foram analisados pelo teste SNK. O hipotiroidismo reduziu a migração trofoblástica endovascular e intersticial e a expressão gênica e/ou proteica de TLR4, de fatores pró (INF) e anti-inflamatórias (IL-10, iNOS), de fatores pró-angiogênicos (VEGF, PGF) e hormonais (PL-1) e das MMPs 2 e 9 e de leptina placentária (P<0,05). O hipotireoidismo também aumentou a expressão gênica e/ou proteica de TLR2 e Flk-1 aos 14 dias de gestação, mas diminuiu a expressão gênica de Flk-1 no dia 10 (P<0,05). Em relação à expressão gênica de rPlf, o hipotireoidismo aumentou aos 10 e 19 dias de gestação, mas reduziu no dia 14, enquanto nas ratas tratadas com T4 aumentou aos 19 dias de gestação (P<0,05). O excesso de T4 não só aumentou a expressão gênica e/ou proteica dos fatores anti-inflamatórios IL-10 e iNOS e de fatores pró-angiogênicos (VEGF, PGF) e hormonais (PL-1), como reduziu, aos 10 dias, a expressão de fatores pró-inflamatórias (TNF e MIF) (P<0,05). No entanto, aos 19 dias de gestação, os fatores pró-inflamatórios INF e MIF aumentaram nas ratas tratadas com T4, ao contrário dos fatores angiogênicos VEGF, Flk-1 e sFlt-1, que diminuíram (P<0,05). O excesso de T4 aumentou a expressão gênica de MMP-2 aos 10 dias de gestação (P<0,05), mas reduziu a migração trofoblástica endovascular aos 18 dias de gestação (P<0,05). In vitro, as doses de 10-7 e 10-9 M de T3 aumentaram a expressão do mRNA nas células trofoblásticas para Tpbp, PGF, INF e PL-1, com 24 e/ou 48 horas de cultivo (P<0,05). A dose de 10-7 M de T3 também aumentou a expressão gênica de VEGF e Pl3b1 (P<0,05). A dose de 10-4 M de T3, pelo contrário, reduziu a expressão gênica de PL-1 e VEGF (P<0,05). Conclui-se que as disfunções tireoidianas maternas reduzem a migração trofoblástica intrauterina e afetam diferentemente o perfil imunológico, angiogênico e endócrino da placenta de ratas, sendo estes efeitos dependentes do período gestacional. Além disso, a triiodotironina afeta a expressão gênica in vitro de fatores envolvidos com a diferenciação e a atividade hormonal, angiogênica e imune de células trofoblásticas de camundongos, sendo estes efeitos dose-dependentes.