Participação das selectinas nas interações entre células angiogênicas da medula óssea e endotélio de músculos isquêmicos de membros inferiores em modelo murino.

• Autor(a) principal: Brigida Gomes de Almeida
• Data de Publicação: 2011
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/ICBD-8M3HPY
• topic: Isquemia de membro inferior; angiogênese; terapia celular; Isquemina; Selectinas; Neovascularização; Membros inferiores; Fisiologia

A estimulação do crescimento vascular através do tranplante de células-tronco angiogênicas é uma alternativa promissora para o tratamento da DAP. No entanto, os mecanismos que regem o tráfego destas células para os músculos isquêmicos são amplamente desconhecidos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a participação das selectinas nas interações entre células angiogênicas isoladas da medula óssea e o endotélio de músculos isquêmicos de membros inferiores em camundongos. A isquemia de membro posterior foi induzida pela oclusão unilateral permanente da artéria femoral de camundongos C57BL/6 e foi confirmada pelo método da difusão da fluoresceína sódica e por imagem de perfusão por laser Doppler. As células mononucleares (BM-MNC) ou negativas para marcadores de linhagem hematopoiética (BM-Lin-) foram obtidas da medula óssea de camundongos GFP e transplantadas i.v. 24h após a OAF e imediatamente antes da análise por microscopia intravital (MIV). Utilizando MIV, observamos que o número de leucócitos rolando e aderidos ao endotélio dos músculos isquêmicos foi maior nos dias 1 e 3 pós-OAF quando comparados com animais sham-operados. Após o transplante de células-tronco angiogênicas, observamos aumento significativo no rolamento e na adesão de BM-MNC e BM-Lin- ao endotélio de músculos isquêmicos quando comparadas àquele de animais sham. Esses eventos diminuiram significativamente após a injeção i.v. de fucoidina, um inibidor não seletivo de sectinas, de anticorpos específicos anti-E- ou anti-P-selectina (10 min antes do transplante) ou após a depleção de plaquetas. Interessantemente, após o bloqueio de P-selectina, houve redução significativamente menor no rolamento das células transplantadas quando comparado ao bloqueio de E-selectina. Por outro lado, não observamos nenhum evento de adesão de BM-MNC após o bloqueio de P-selectina. Além disso, o bloqueio das selectinas, bem como a depleção de plaquetas, reduziu a revascularização induzida pelo transplante de BM-MNC ou BM-Lin-, analisado por histomorfometria, pelo método da fluoresceína ou por laser Doppler. Nossos resultados sugerem que o bloqueio das selectinas ou a depleção de plaquetas reduz as interações entre as células angiogênicas da medula óssea e o endotélio, bem como o recrutamento destas para músculos isquêmicos. Esses eventos parecem depender, principalmente, de P-selectinas