Atividade antagonista de Acinetobacter baumannii contra amostras de Acinetobacter resistentes a drogas antimicrobianas
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Data de Publicação: | 2016 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UFMG |
Texto Completo: | http://hdl.handle.net/1843/42406 https://orcid.org/0000-0002-9859-5895 |
Resumo: | A busca por novas substâncias antimicrobianas, principalmente de ocorrência natural, vêm ganhando grande destaque, sendo alvo de diversos estudos, em especial, devido à emergência de microrganismos resistentes, bem como à sua associação com a ocorrência de surtos. Acinetobacter baumannii é uma bactéria de grande relevância clínica, marcadamente multirresistente a antimicrobianos. Este estudo foi realizado com o objetivo de avaliar e caracterizar a atividade antagonista de A. baumannii. Dentre as 19 amostras testadas, somente uma, A. baumannii 397, expressou antagonismo. Detectou-se atividade apenas contra amostras da mesma espécie. Avaliou-se a possibilidade de interferência de bacteriófagos, ácidos graxos, clorofórmio residual e peróxido de hidrogênio na interpretação dos dados. Visando otimizar a expressão do antagonismo, a amostra produtora foi cultivada sob diferentes condições. Quando cultivada à temperatura de 25 ºC, os halos de inibição eram maiores e mais límpidos. A extração proteica da amostra A. baumannii 397 foi realizada por meio de precipitação ácida com HCl 5 N. A atividade antagonista foi confirmada por técnica de spread plate contra amostra clínica de A. baumannii. O extrato bruto apresentou atividade antagonista de 1280 UA/mL. O extrato foi inativado por proteases e manteve-se ativo após exposição a solventes orgânicos e uma ampla faixa de pH e temperaturas. Os valores de CIM e CBM mostraram atividade bactericida contra a amostra reveladora. O extrato bruto foi submetido a três etapas de cromatografia de fase reversa, sendo, a primeira etapa em coluna C-8 e, as demais, em coluna C-18. A última etapa cromatográfica gerou duas frações ativas, C5 e C6, eluídas com, aproximadamente, 80% de acetonitrila. Essas frações foram submetidas à MS. Cinco massas moleculares foram detectadas em C5 e, em C6, duas massas moleculares, de 6,2 kDa e 8,3 kDa. Os dados mostram a síntese de substância(s) antagonista(s) hidrofóbica(s), de natureza proteica, ativa(s) contra bactérias multirresistentes, pela amostra A. baumannii 397, propriedade ainda não descrita para a espécie, com potencial para aplicação biotecnológica. |
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Paula Prazeres Magalhãeshttp://lattes.cnpq.br/2184773662680617Luiz de Macêdo FariasEdmar Chartone de SouzaAna Carolina Morais ApolônioSílvia Beleza de Mourahttp://lattes.cnpq.br/5570789391265920Natália Rocha Guimarães2022-06-09T19:03:03Z2022-06-09T19:03:03Z2016-01-18http://hdl.handle.net/1843/42406https://orcid.org/0000-0002-9859-5895A busca por novas substâncias antimicrobianas, principalmente de ocorrência natural, vêm ganhando grande destaque, sendo alvo de diversos estudos, em especial, devido à emergência de microrganismos resistentes, bem como à sua associação com a ocorrência de surtos. Acinetobacter baumannii é uma bactéria de grande relevância clínica, marcadamente multirresistente a antimicrobianos. Este estudo foi realizado com o objetivo de avaliar e caracterizar a atividade antagonista de A. baumannii. Dentre as 19 amostras testadas, somente uma, A. baumannii 397, expressou antagonismo. Detectou-se atividade apenas contra amostras da mesma espécie. Avaliou-se a possibilidade de interferência de bacteriófagos, ácidos graxos, clorofórmio residual e peróxido de hidrogênio na interpretação dos dados. Visando otimizar a expressão do antagonismo, a amostra produtora foi cultivada sob diferentes condições. Quando cultivada à temperatura de 25 ºC, os halos de inibição eram maiores e mais límpidos. A extração proteica da amostra A. baumannii 397 foi realizada por meio de precipitação ácida com HCl 5 N. A atividade antagonista foi confirmada por técnica de spread plate contra amostra clínica de A. baumannii. O extrato bruto apresentou atividade antagonista de 1280 UA/mL. O extrato foi inativado por proteases e manteve-se ativo após exposição a solventes orgânicos e uma ampla faixa de pH e temperaturas. Os valores de CIM e CBM mostraram atividade bactericida contra a amostra reveladora. O extrato bruto foi submetido a três etapas de cromatografia de fase reversa, sendo, a primeira etapa em coluna C-8 e, as demais, em coluna C-18. A última etapa cromatográfica gerou duas frações ativas, C5 e C6, eluídas com, aproximadamente, 80% de acetonitrila. Essas frações foram submetidas à MS. Cinco massas moleculares foram detectadas em C5 e, em C6, duas massas moleculares, de 6,2 kDa e 8,3 kDa. Os dados mostram a síntese de substância(s) antagonista(s) hidrofóbica(s), de natureza proteica, ativa(s) contra bactérias multirresistentes, pela amostra A. baumannii 397, propriedade ainda não descrita para a espécie, com potencial para aplicação biotecnológica.The search for new antimicrobial substances, especially naturally occurring ones, are gaining great prominence, being the target of several studies, in particular due to the emergence of multiresistant microorganisms, as well as their association with the occurrence of outbreaks. Acinetobacter baumannii is a bacterium of great clinical relevance, that markedly shows multidrug resistance. The aim of this study was to evaluate and to characterize the antagonistic activity of A. baumanni. Among the 19 tested strains, only one, A. baumannii 397, expressed antagonism. Activity was observed exclusively against isolates of the same species. The interference of bacteriophages, fatty acids, residual chloroform and hydrogen peroxide in the interpretation of data was evaluated. In order to optimize antagonism expression, the producer strain was cultivated under different conditions. When grown at 25 °C, larger and clear inhibition zones were generated. Protein extraction of A. baumannii 397 was performed by acid precipitation with HCl 5N. The antagonistic activity was confirmed by the spread plate technique against a clinical isolate of A. baumannii. The crude extract showed antagonist activity of 1280 AU/mL. The extract was inactivated by proteases and remained active after exposure to organic solvents and a broad pH range and temperatures. CIM and CBM values showed bactericidal activity against the indicator strain. The crude extract was submitted to three steps of reverse-phase chromatography, the first step in a C-8 column and the others in a C-18 column. The last chromatographic step generated two active fractions, C5 and C6, eluted with approximately 80% acetonitrile. These fractions were submitted to MS. Five molecular masses were detected in C5, and in C6, two molecular masses of 6.2 kDa and 8.3 kDa. The results showed the synthesis of hydrophobic antimicrobial proteinaceous substance(s), active(s) against multidrug-resistant bacteria, by A. baumannii 397, property not yet described for this species, that displays biotechnological potential.CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e TecnológicoFAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas GeraisCAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível SuperiorOutra AgênciaporUniversidade Federal de Minas GeraisPrograma de Pós-Graduação em MicrobiologiaUFMGBrasilICB - DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIAhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/pt/info:eu-repo/semantics/openAccessMicrobiologiaAcinetobacter baumanniiBacteriocinasAcinetobacter baumanniiSubstância antagonistaBacteriocinaAtividade antagonista de Acinetobacter baumannii contra amostras de Acinetobacter resistentes a drogas antimicrobianasinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisreponame:Repositório Institucional da UFMGinstname:Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)instacron:UFMGORIGINALDissertação Natália Rocha Guimarães.pdfDissertação Natália Rocha Guimarães.pdfapplication/pdf2655671https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/42406/1/Disserta%c3%a7%c3%a3o%20Nat%c3%a1lia%20Rocha%20Guimar%c3%a3es.pdf614651a16c7d19030200a23e566cc7d0MD51CC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-8811https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/42406/2/license_rdfcfd6801dba008cb6adbd9838b81582abMD52LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82118https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/42406/3/license.txtcda590c95a0b51b4d15f60c9642ca272MD531843/424062022-06-09 16:03:04.321oai:repositorio.ufmg.br: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ório de PublicaçõesPUBhttps://repositorio.ufmg.br/oaiopendoar:2022-06-09T19:03:04Repositório Institucional da UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)false |
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