Estudo histológico, imunológico e parasitológico do tubo gastrointestinal de cães infectados com Leishmania (Leishmania) infantum chagasi

• Autor(a) principal: Maria Marta Figueredo
• Data de Publicação: 2013
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-98CJFT
• topic: Trato gastrointestinal; Leishmaniose visceral canina; Receptores do tipo Toll; Leishmania infantum chagasi; Célula T Reguladora; Doenças do cão/imunologia; Leishmaniose visceral; Cães Doenças Tratamento; Leishmania; Cães; Leishmania infantum; Trato gastrointestinal

O envolvimento do trato gastrointestinal (TGI) na leishmaniose visceral canina (LVC) se destaca fato pelo considerável número de parasitos nas porções finais: ceco e cólon, porém sem lesões acentuadas, isso é, a arquitetura intestinal não se altera. Assim, com o intuito de caracterizar a patologia intestinal na LVC foram realizados estudos morfológicos, parasitológicos e imunológicos e associação ao quadro clínico da doença. Quarenta e quatro cães positivos e seis com exames negativos para Leishmania foram usados nesse trabalho. O exame macroscópico do TGI revelou não haver alterações evidentes com exceção da reatividade das placas de Peyer nos animais infectados, principalmente no íleo, que se apresentava com nódulos de coloração brancacenta fazendo saliência na superfície do órgão. De modo geral, apresentaram aumento da celularidade na lâmina própria (LP) com exceção do esôfago, em comparação com animais não infectados. Havia predominância de plasmócitos, macrófagos e linfócitos, com alguns neutrófilos e eosinófilos. Não raro, os macrófagos apresentavam-se com morfologia peculiar de células epiteliódes, com núcleos de aspecto vesiculoso, cromatina frouxa e citoplasma amplo. Formas amastigotas de Leishmania imunomarcadas por imuno-histoquímia foram observadas dentro de macrófagos na LP independente da forma clínica dos cães infectados. No intestino grosso, a maioria dos parasitos foi visualizada subjacente à muscular da mucosa, na base da LP. Ao passo que no intestino delgado as amastigotas foram encontradas, em maior proporção, próximas ao lúmen, logo abaixo do epitélio, mas de forma difusa. Os segmentos mais parasitados foram ceco e cólon. De acordo com o padrão de infecção observado ao longo do TGI, seja por nosso grupo de pesquisa ou por outros pesquisadores, investigou-se alguns marcadores leucocitários: integrinas CD11b, CD11c/CD18; receptor de monócitos circulantes e macrófagos: CD14; receptores de macrófagos e linfócitos: Toll do tipo 2 (TRL2), do tipo 9 (TLR9) e manose; antígenos linfocitários: CD4, CD8 e Foxp3. Observamos que a expressão de CD11c+ e TLR2+ como também CD14+ e Manose+ foi mais frequente no cólon em relação ao jejuno. Ao contrário, TLR9+ foi mais frequente no jejuno em relação ao cólon como também observado para CD11b+ e CD11b+ expressando CD14+, TLR9+ e Manose+. Esses receptores se apresentaram aumentados nos animais infectados. Linfócitos T CD4+ e T CD4+/Foxp3+ apresentaram-se mais frequentes no jejuno em relação ao cólon. A frequência de CD8+ não se diferenciou entre jejuno e cólon. Foi observado também que o animal infectado apresenta aumento de CD4+ e Foxp3+ e redução de CD8+. Na LP foi feita também a avaliação da intensidade média de fluorescência (IMF) e a consequente comparação entre jejuno e cólon 25 dos receptores aqui avaliados. Houve diferença quanto à expressão de TLR9+, CD4+; CD8+; CD4+/FOXP3+ e CD11b+ com IMF mais intensa no jejuno. Ao contrário, a expressão de CD14+ e TLR2+ foi mais intensa no cólon. O animal infectado tem IMF superior aos animais não infectados. Foram avaliadas também a frequência e a IMF das populações de linfócitos T CD4+, CD8+ e Foxp3+ nos linfonodos cervicais e mesentéricos. A porcentagem de positividade desses receptores se diferenciou somente em relação aos controles, o que levou observar que cães infectados expressam mais CD4+ e Foxp3+ e menos CD8+ que cães não infectados. Apesar da não detecção das citocinas interleucina 4 (IL-4), interleucina 10 (IL-10) e fator de necrose tumoral alfa (TNF-) no soro de todos os cães, no jejuno observou-se presença de IL-10 e TNF- sendo essas mais expressadas quando comparadas ao cólon. Já a citocina IL-4 foi mais encontrada no cólon. O segmento do TGI que apresentou menor carga parasitária, apresentou simultaneamente maior frequência e expressão de receptores como CD4, Foxp3, CD11b, TLR9, além de IL-10 e TNF-, ao passo que o segmento que apresentou maior carga parasitária apresentou concomitantemente maior expressão de CD14, TLR2, CD11c e IL-4. Portanto, a infecção por Leishmania influenciou, no jejuno, aumento da expressão de CD14, Manose, TLR9, CD11b, CD4, Foxp3 e redução da expressão de CD8; influenciou, no cólon, aumento da expressão de CD11c, CD14, Manose, TLR9, CD11b, CD4, Foxp3 e TLR2 e redução da expressão de CD8. E nos linfonodos, estimulou o aumento da expressão de CD4 e Foxp3 e redução da expressão de CD8. A mucosa intestinal do jejuno e do cólon estava intacta apesar da presença de parasitos sugerindo que esses processos constitutivos de regulação ocorrem na mucosa intestinal para controlar os danos que poderiam resultar das respostas celulares contra os patógenos. É indispensável identificar os fatores que contribuem para a ativação e/ou regulação de TLR contra o parasito em cada um dos segmentos do TGI e avaliar o quanto a ativação de TLR, em cada uma dessas células, contribui para a patologia na leishmaniose visceral.