Desenvolvimento de vacinas recombinantes contra malária humana e teste in vivo em modelo murino

• Autor(a) principal: Leoneide Erica Maduro Boillet
• Data de Publicação: 2009
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-8MYGD7
• topic: malária; MSP-119; Adenovírus humano sorotipo 5; vacinas recombinantes; AMA-1; Microbiologia; Adenovirus; Antígeno de membrana apical (AMA-1); Malária

Vacinas que promovem a proteção contra a malária são urgentementenecessárias para o controle da doença. O antígeno 1 de membrana apical (AMA-1) e o fragmento de 19kDa da proteína 1 de superfície de merozoíto (MSP-119) são os principais candidatos a vacina contra o estágio sanguíneo da malária devido a estudos de proteção encorajadores em animais e humanos. Neste estudo, nós investigamos o efeito de candidatos a vacinas contra P.vivax geneticamente modificados, PvAMA-1 e PvMSP-119, em diferentes combinações de protocolos de imunizações do tipo dose-reforço. Com este objetivo foram construídos adenovírus recombinantes expressando PvAMA-1 ePvMSP-119 para modular e ativar uma resposta celular efetiva. Além disso, os polipeptídeos equivalentes foram expressos em E.coli, purificados e utilizados para induzir resposta humoral. Após a caracterização dos antígenos vacinais, os vírus recombinantes e as proteínas formuladas com o adjuvante Montanide ISA 720 foram empregados na imunização de camundongos BALB/c. A vacinação com os protocolos de imunização Ad/Ad, Ad/prot, prot/prot e prot/Ad levou à produção de IgG anti- PvAMA-1 e anti-PvMSP-119 específica em todosos grupos vacinais. No entanto, os protocolos prot/prot e prot/Ad foram mais eficientes, produzindo elevados títulos de anticorpos, tanto para PvAMA-1 como para PvMSP-119. PvAMA-1 foi capaz de induzir a proliferação celularantígeno específica, sendo que os protocolos Ad/Ad e prot/prot foram capazes de induzir maiores níveis de proliferação celular que os protocolos prot/Ad e Ad/prot. PvMSP-119 foi capaz de ativar resposta imune celular do tipo Th1, com elevados níveis de produção de IFN-g, IL-2 e TNF-a. Além disso, foi capaz de induzir a produção de IL-10, mas não desencadeou a produção de IL-4. Desta forma, pode-se concluir que a vacinação com os protocolos de imunização do tipo dose-reforço prot/prot, prot/Ad foram melhores em induzir resposta humoral e celular, já o protocolo Ad/Ad induziu uma melhor resposta celular. Estes resultados são encorajadores para estudos pré-clínicos em macacos Aotus spp e sugere-se a utilização dos protocolos prot/prot, prot/Ad e Ad/Ad