Desenvolvimento de um método seguro pela técnica de PCR em tempo real para detecção de dez espécies animais em produtos cárneos

• Autor(a) principal: Lissandra Sousa Dalsecco
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-BBYQTX
• topic: Substituição de espécies; Rotulagem inadequada; Produtos cárneos; PCR em Tempo Real; Alimentos de origem animal Análise; Alimentos de origem animal Adulteração e inspeção; Rotulagem Inspeção; Carne Inspeção; Reação em cadeia de polimerase

A identificação de espécies em alimentos é assunto de grande interesse para toda a cadeia de produção, para a fiscalização e nos meios acadêmicos. As fraudes pela adição ou substituição de espécies infringem as legislações vigentes no Brasil e podem trazer graves consequências, incluindo perdas econômicas e riscos à saúde pública. Diversas técnicas estão disponíveis para a identificação da origem dos alimentos. Dentre essas, os métodos baseados na análise de DNA provaram ser práticos, confiáveis, específicos e extremamente sensíveis para a detecção de fraude. O presente trabalho teve como objetivo o desenvolvimento de teste de detecção de DNA das espécies Bos taurus, Sus scrofa, Ovis aries, Capra hircus, Gallus gallus, Meleagris gallopavo, Bubalus bubalis, Equus caballus, Felis catus e Canis familiaris em produtos cárneos. O método baseia-se na técnica de PCR em Tempo Real e combina o uso de iniciadores universais (utilizados como controle interno) e iniciadores específicos para a detecção do DNA alvo. Após cada reação de PCR, os produtos são submetidos à curva de dissociação, para confirmar se o DNA amplificado corresponde ao fragmento esperado de cada espécie. A precisão do método foi avaliada em 45 misturas experimentais de carnes nas proporções de 50-50% ou 99-1% e em uma mistura com 10% de cada espécie do teste. O método detectou corretamente as espécies em cada mistura, inclusive aquelas presentes em 1% do total. Em seguida, o método foi aplicado na análise de 14 produtos comerciais e os resultados revelaram que seis desses continham material bovino e/ou de frango, não declarado no rótulo. Os testes das misturas experimentais e dos produtos comerciais foram realizados nos dois laboratórios participantes (LGEV e Myleus), obtendo-se 100% de reprodutibilidade. O teste desenvolvido provou ser eficaz e confiável para uma rotina de detecção de espécies em produtos cárneos