Expressão de IL-15 durante a infecção por Trypanosoma cruzi

• Autor(a) principal: Rafael André Ferreira
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/34536
• topic: Bioquímica; Imunologia; Trypanosoma cruzi; Interleucina-15; Leishmania

Ensaios de duplo híbrido de levedura forneceram evidências de que a interleucina 15 (IL-15), seria uma das proteínas da célula hospedeira com que as amastinas, proteínas presentes na superfície de Trypanosoma cruzi e Leishmania spp, poderiam interagir durante o seu desenvolvimento intracelular. Com o objetivo de validar os resultados do duplo híbrido e investigar o papel da IL-15 durante a infecção por T. cruzi, nós analisamos macrófagos peritoneais murinos infectados com T. cruzi e L. amazonensis, bem como células L6, LLCMK2 e H9C2 infectadas com T. cruzi, por meio de Elisa e ensaios de imunofluorescência. Utilizando a técnica de ELISA de captura, mostramos a indução da produção da proteína na sua isoforma citoplasmática nas células infectadas comparadas às células não infectadas. Por outro lado, os níveis da forma secretada foram indetectáveis em todos os ensaios de infecção, com exceção da infecção das células H9C2. Em macrófagos murinos infectados por L. amazonensis, IL-15 teve sua expressão diminuída nas horas iniciais da infecção, porém após 72 horas foi observado que os níveis de IL-15 intracelular chegavam a níveis próximos daqueles encontrados em macrófagos não infectados. Análises de imunofluorescência mostraram uma distribuição uniforme de IL-15 no citoplasma e no núcleo das células não-infectadas, ao contrário das células infectadas, nas quais foi observado um aumento da concentração de IL-15 no citoplasma. Não somente em macrófagos infectados por T. cruzi ou L. amazonensis, mas também em células L6 infectados com T. cruzi, foi observada uma polarização de IL-15 em regiões próximas aos amastigotas. Macrófagos murinos previamente estimulados com IL-15 recombinante tiveram sua ação tripanocida potencializada, sugerindo que IL-15 secretada e intracelular possuem diferentes papéis durante a infecção por T. cruzi. Macrófagos de camundongos nocautes para IL-15 infectados com T. cruzi apresentaram redução do número de amastigotas por célula infectada e redução na porcentagem de células infectadas quando comparados com os macrófagos de camundongos selvagens, corroborando ainda mais a hipótese do papel da IL-15 citoplasmática na viabilidade do estágio intracelular do parasito.