Estudo da metilação de DNA em genes relacionados às vias de sinalização da produção de citocinas na periodontite

• Autor(a) principal: Luiz Paulo Carvalho Rocha
• Data de Publicação: 2021
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/44462
• topic: Biologia Celular; Periodontite; Epigenética; Citocinas; Biologia Celular; Periodontite; Epigenética; Citocinas

A periodontite é uma doença de caráter imunoinflamatório caracterizada pela destruição dos tecidos periodontais em resposta a um desafio periodontopatogênico. O início e progressão da doença são marcados por mudanças celulares e moleculares que levam a um padrão de resposta inflamatória destrutiva não resolutiva. Esse padrão resulta nos achados clínicos como maiores profundidades de sondagem e perda de inserção clínica. Os mecanismos inflamatórios destrutivos da periodontite apresentam períodos de atividade e quiescência, e o perfil de produção de citocinas pode definir a duração dos períodos e determinar o grau de dano periodontal. Uma mudança no perfil de produção de citocinas pode ser regulada pela expressão gênica de diversas moléculas de sinalização. A expressão gênica, por sua vez, pode ser alterada por modificações epigenéticas. A metilação de DNA é uma alteração epigenética que pode diminuir a expressão, quando presente. O objetivo geral desse trabalho foi avaliar a presença da metilação de DNA em genes relacionados com via de sinalização da produção de citocinas em fragmentos de tecido gengival de indivíduos com periodontite. Foram incluídos nesse estudo 60 pacientes, 30 saudáveis e 30 com periodontite, pareados por idade e sexo. Foram coletados tecidos gengivais dos locais afetados nos pacientes com periodontite e em áreas semelhantes, sem indícios de inflamação e sem alterações no periodonto, nos pacientes controle. As amostras foram submetidas a extração de DNA e RNA, e posteriormente um protocolo de identificação do padrão de perfil de metilação de DNA por meio de qPCR. Uma avaliação inicial do padrão de metilação de DNA de 22 genes foi realizada em um pool de amostras e foram observados quatro genes com diferença de metilação maior que 20% entre os grupos controle e doente. Tais genes, MALT1, LTB, STAT5A e FOXP3, foram selecionados para análises posteriores. Na etapa de validação dos dados foi visto que os genes MALT1 e LTB apresentaram diferenças entre os grupos (p = 0,05 e p = 0,04, respectivamente). O gene STAT5A mostrou menor metilação no grupo doente comparado ao grupo controle (p = 0,025). O gene FOXP3 mostrou maior porcentagem de metilação no grupo doente comparado ao grupo controle considerando os homens (p = 0,037), assim como menores níveis de transcritos (p = 0,037). Conclui-se que mudanças no perfil de metilação nos genes MALT1, LTB, STAT5A e FOXP3 estão presentes nos tecidos gengivais de pacientes com periodontite. A hipermetilação e baixa transcrição do FOXP3 pode estar relacionada patogênese da doença em homens. Além disso, a transcrição de STAT5A parece estar relacionada à parâmetros clínicos da doença em mulheres. Estudos adicionais sobre tais genes podem contribuir para um melhor entendimento da patogênese da doença.