Avaliação da segurança in vitro de nanotubos de carbono de paredes múltiplas funcionalizados com polietilenoglicol em linhagem de fibroblasto de pulmão de hamster (V79-4)

• Autor(a) principal: Graziela de Paula Ferreira Dantas
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/FARB-BCCJZX
• topic: Viabilidade celular; Polietilenoglicol; Genotoxicidade; Nanotoxicologia; Nanotubos de carbono de paredes múltiplas; MutagenicidadeV79-4; Citotoxicidade; Nanotoxicologia; Nanotubos de carbono; Fibroblasto; Nanotecnologia; Toxicologia; Hamster

Os nanotubos de carbono (NTC) compreendem uma importante classe de materiais com excelentes propriedades físico-químicas, a qual tem recebido grande atenção em aplicações biológicas. Dados conflitantes em relação a seus efeitos citotóxicos têm sido relatados. Essa discrepância deve se à falta de padronização de metodologias, as quais deveriam levar em consideração não somente a dose e o tempo de exposição ao agente, parâmetro bem estabelecido na toxicologia clássica, mas também as características intrínsecas dos NTC e seu comportamento na interface com o sistema biológico. Assim, apesar da grande quantidade de dados gerados nestes últimos 10 anos, sobre a toxicidade desses nanomateriais, a nanotoxicologia é ainda um grande desafio. O presente estudo teve como objetivo avaliar o potencial citotóxico, genotóxico e mutagênico dos nanotubos de carbono de paredes múltiplas, funcionalizados com polietilenoglicol (2 kDa) modificado com pireno (MWNT- PyPEG), após a exposição da linhagem celular fibroblasto de pulmão de hamster (V79-4). A pesquisa foi conduzida por meio dos métodos MTT e Cell Titer Blue®, para estimar a viabilidade celular e por meio dos testes cometa e ensaio de micronúcleos com bloqueio de citocinese citoma (CBMN-Cyt) com (+S9) e sem (S9) ativação metabólica, para avaliar a genotoxicidade e mutagenicidade. Os resultados utilizando o método MTT, na faixa de concentrações testadas (1,2 a 18,5 µg mL1), mostraram diminuição significativa na viabilidade celular das células tratadas com MWNT- PyPEG somente da concentração de 18,5 µg mL1 em relação ao grupo controle (P <0,05) em diferentes tempos (24, 48 e 72 h). O pireno-PEG e outras concentrações não demonstraram alteração na viabilidade celular em comparação ao grupo controle. A concentração de 18,5 µg mL1 foi citotóxica, uma vez que a viabilidade celular estava abaixo da concentração inibitória de 50% (IC50). Um efeito dose-resposta foi observado quando foram utilizadas concentrações de MWNT- PyPEG entre 9,25 µg mL1 e 18,5 µg mL1. O ensaio Cell Titer Blue® realizado nas mesmas condições acima, entretanto por 24 h confirmou os resultados do MTT. Os resultados obtidos com o ensaio cometa e CBMN-Cyt (-S9) não demonstraram genotoxicidade e mutagenicidade em todas as concentrações testadas. No entanto, quando os MWNT- PyPEG foram submetidos ao ensaio CBMN-Cyt (+S9), o número de micronúcleos aumentou significativamente em relação ao controle negativo, mostrando-se similar ao controle positivo. Portanto, o processo de biotransformação dessas NP deve ser minuciosamente investigado, uma vez que esse sistema pode potencializar a interação das mesmas com o material genético, promovendo mutações e consequentemente levando ao processo de carcinogênese. Esses resultados mostram a necessidade e a importância de se fazer mais de um teste de genotoxicidade para avaliar a segurança de cada composto.