Plasticidade sináptica homeostática na junção neuromuscular de camundongos ChAT-ChR2-EYFP jovens e idosos.

• Autor(a) principal: Wallace Lucio de Camargo
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/31930
• topic: Acetilcolina; ChAT-ChR2-EYFP; depressão pré-sináptica homeostática; junção neuromuscular; , VAChT; Fisiologia; Acetilcolina; Junção neuromuscular; Plasticidade neuronal; Sinapses; Homeostáse; Depressão

O aumento da quantidade de glutamato por vesícula em Drosofila é compensado pela diminuição do número de vesículas liberadas por estimulação nervosa. Este mecanismo compensatório capaz de reestabelecer a homeostasia sináptica é chamado de depressão homeostática pré-sináptica (DHP). Nós hipotetizamos que o aumento crônico da liberação de acetilcolina (ACh) por vesícula na junção neuromuscular de camundongos (JNM) pode resultar em uma diminuição compensatória na liberação vesicular evocada. Para testar isto, nos utilizamos a linhagem de camundongos ChAT-ChR2-EYFP (Hyper VAChT) com 3 e 24 meses de idade que possuem um aumento dos níveis de expressão de VAChT, e seus controles selvagens (WT). Foram avaliados potenciais de placa espontâneos (MEPPs) e evocados (EPPs), em baixa (0.2 e 0.3Hz) e alta (20 e 30Hz) frequência de estimulação na junção neuromuscular do músculo diafragma. Nós também registramos, em Voltage Clamp, as correntes de placa em miniatura (MEPCs). Aos 3 meses de idade, os camundongos Hyper VAChT apresentaram aumento no tamanho e frequência dos quanta. O conteúdo quântico dos camundongos Hyper VAChT (29±2,5, média±EPM, n= 4 animais) não apresentou diferença significativa (p=0,44) em relação aos WT (32±2.2, média±EPM, n= 4 animais). A depressão sináptica foi 19% maior nos camundongos Hyper VAChT, e a PTP não foi estatisticamente diferente. Durante a estimulação tetânica, a área dos MEPPs dos camundongos Hyper VAChT foi menor que antes do trem de estimulação, enquanto que este parâmetro não foi alterado nos animais WT. Isto sugere que o aumento da depressão nos animais Hyper VAChT é devido ao menor efeito da liberação vesicular. Aos 24 meses de idade, os camundongos Hyper VAChT apresentaram uma diminuição significativa no CQ (WT= 41±3.5, média±EPM, n= 5 animais; HyperVAChT= 29±4.1, média±EPM, n= 3 animais; p=0.07). A depressão sináptica e a potenciação pós tetânica (PTP) não foram estatisticamente diferentes. Estes resultados mostram que os camundongos Hyper VAChT compensaram o aumento no tamanho dos quanta de duas maneiras diferentes: aos 3 meses, os EPPs em altas frequências de estimulação reduziram por aumento de dessensibilização ou diminuição da quantidade de ACh por vesícula. Enquanto que aos 24 meses observamos diminuição do CQ. Nossos dados mostram que o aumento crônico da liberação de ACh por vesícula sináptica aciona o mecanismo pré-sináptico de DHP, que se instala durante o envelhecimento dos animais, diminuindo o número de vesículas liberadas. Este mecanismo não é visto em camundongos jovens, que mantem as taxas de disparo pós-sináptico através de outros mecanismos.