Avaliação da atividade de telomerase em células-tronco embrionáriasindiferenciadas e em células neoplásicas de camundongo

• Autor(a) principal: Francisco de Assis Nunes Pereira
• Data de Publicação: 2008
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/ECJS-84NHFH
• topic: Células tumorais; Células-tronco embrionárias; Telomerase; Proliferação celular; TRAP-ELISA; Ginecologia; Proliferação de células; Células-tronco embrionárias; Telomerase; Camundongos; Células tumorais cultivadas

A telomerase é uma enzima envolvida na manutenção da capacidade de replicação das células e na proteção e estabilização dos cromossomos. Sua função principal é reconstruir os telômeros, seqüências repetitivas situadas nas pontas de cada cromossomo, que protegem contra danos no ácido desoxirribonucléico (DNA) e que também funcionam como relógio biológico, limitando o número de vezes pelas quais a célula pode se dividir. A telomerase encontra-se ativa em células com alta capacidade de replicação, como célulastronco e células neoplásicas, e não é detectada na maioria das célulasdiferenciadas de um organismo adulto. O estudo da telomerase pode resultar em maneiras de se controlar, aumentando-se ou inibindo-se, a capacidade de replicação celular, situação bastante útil tanto no campo da oncologia quanto no processo de terapia celular com células-tronco. Os objetivos deste trabalho foram: avaliar a atividade da telomerase (AT) em diferentes passagens de células-tronco embrionárias indiferenciadas de camundongo (CTEc) e comparar a AT das CTEccom linhagens de células de tumor de camundongo. Foi utilizado o método TRAPELISA para avaliação semiquantitativa da AT. Foram estudadas três linhagens de CTEc, denominadas CT2, CT3 e CT4. As passagens celulares avaliadas foram as de número 13, 15 e 19, denominadas P13, P15 e P19, respectivamente. Todas as passagens celulares foram avaliadas em relação ao estado de indiferenciação, apartir da presença dos genes OCT4 e NANOG. As linhagens de tumor avaliadas foram B16F1 (melanoma), B16F10 (melanoma metastático) e CT26WT (tumor de cólon). Os resultados são expressos em porcentagem diante de um padrão com alta AT conhecida. A CT2 apresentou 1,09% em P13, 13,24% em P15 e 36,90% em P19. A CT3 apresentou 1,46% em P13, 21,82% em P15 e 22,37% em P19. ACT4 apresentou 3,82% em P13, 39,05% em P15 e 34,22% em P19. A média das três linhagens foi P13 1,59%, P15 18,53% e P19 23,37%. As linhagens de tumor B16F1, B16F10 e CT26WT apresentaram, respectivamente, 128,60, 1,45 e 30,94%. Nas três passagens de CTEc avaliadas, observou-se tendência a aumento inicial, com posterior estabilização da AT. As linhagens celulares de tumor de camundongo apresentam AT com valores mais variáveis. Os resultados permitem concluir que tanto as CTEc quanto as linhagens de tumor apresentamalta capacidade de multiplicação, expressa pelas medidas elevadas de AT encontradas.