Lipidoma regional da estrutura encefálica e modulações da expressão lipídica radioinduzidas no encéfalo em modelo animal wistar

• Autor(a) principal: Matheus Figueiredo Soares Mingote
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/48416
• topic: Dessorção por ionização (DESI); Espectrometria de massas; Efeitos das radiações; Lipídios; Radiação-γ; Radiação ionizante; Metabolomica; Lipidômica; Engenharia nuclear; Espectrometria de massa; Efeito da radiação; Lipídios; Radiação ionizante; Metabolômica

O presente trabalho aborda a análise de achados científicos no estudo de lipidoma encefálico, e modulações radioinduzidas dos lipídios encefálicos, através de técnica DESI-MSI (Desorption Electrospray Ionization Mass Spectrometry Imaging). A espectrometria de massas (MS), através da ionização branda a pressão atmosférica ambiente, promove a dessorção de lipídios permitindo a realização qualitativa e quantitativa das inúmeras classes de lipídios. O Objetivo principal foi a análise lipidômica de dados produzidos em DESI-MSI em tecido cerebral em condições normais e expostos a radiação, em modelo animal. A metodologia envolveu um modelo animal constituído de 40 ratos Wistar isogênicos hígidos masculinos que foram divididos em dois grupos: um controle (n = 7), denominado GC e outro submetido à irradiação corporal total (TBI), chamado GIR (n = 33) subdividido em 04 subgrupos correspondentes a cinética de tempo 24, 48, 96 h e 01 semanas. Os animais (grupo GIR) sofreram irradiação de corpo inteiro através da exposição a uma fonte Co-60, submetidos ás mesmas condições de tempo e dose (5 Gy). Após a eutanásia, considerando as diversas cinéticas de tempo à serem analisadas, os órgãos foram coletados e armazenados em freezer -80ºC para que posteriormente fossem realizados os procedimentos para obtenção dos cortes em criostato. As lâminas foram submetidas a uma metodologia conhecida como DESI-MSI que permite o imageamento ponto a ponto em 2D. Foi realizado uma varredura completa na faixa de 200 a 1000 Da obtendo-se espectros de massas em modo negativo. Os arquivos de dados de lipídeos produzidos por DESI-MSI foram analisados empregando os softwares BioMap, XCalibur no espectro de baixo e alto peso molecular, explorando a regionalização cerebral da expressão de lipídeos e a modulação lipidômica radioinduzida. Foi realizado uma identificação dos principais lipídios expressos em condições fisiológicas e em expostos a radiação. Os principais achados procederam da análise lipidômica. As análises permitiram a identificação principalmente de glicerofosfolipídios, devido a diversidade de funções celulares que exercem e a possibilidade de serem biomarcadores de possíveis alterações radioinduzidas. A maioria dos íons observados nos espectros de massa correspondem à ácidos graxos livres desprotonados, fosfatidilserinas (PS), fosfatidilinositóis (PI) e sulfatidas (ST). Vários íons sofrem alterações na intensidade e na região de origem demonstrando o efeito da radiação no metaboloma do tecido cerebral. O íon m/z 868,529, por exemplo, apresentava distribuição espacial presente principalmente em nos lóbulos cerebelares (culmina, lóbulo central, declive, pirâmide e úvula) e após a irradiação verificou-se uma diminuição progressiva da intensidade desse lipídio em todas as regiões em todas as cinéticas de tempo. Os achados dos dados analíticos e de imageamento por DESI-MSI permitem afirmar que a radiação induz alterações metabolômicas no perfil lipídico cerebral, em regiões especificas do encéfalo. Inúmeras possibilidades de investigação no campo da metabolômica foram abertas como por exemplo a radiolipidômica do encéfalo. Os biomarcadores de toxicidade poderão serem utilizados no tratamento radioterápico para melhor controle terapêutico das toxicidades.