Expressão local e sistêmica da ativina A e folistatina e seus efeitos biológicos in vitro na endometriose

• Autor(a) principal: Ana Luiza Lunardi Rocha Baroni
• Data de Publicação: 2011
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-8PAG7W
• topic: Saude da Mulher; Endométrio; Ativinas/análise; Fase folicular; Estudos prospectivos; Reação em cadeia da polimerase; Folistatina/genética

Objetivos: (1) Avaliar a expressão de folistatina, da subunidade beta-A da ativina/inibina (ativina A) e das proteínas relacionadas à ativina A, durante as fases do ciclo menstrual, no endométrio eutópico de pacientes com e sem endometriose e em lesões endometrióticas; (2) Verificar se as concentrações séricas de ativina A e folistatina diferem entre as várias formas de endometriose e se essas proteínas podem ser utilizadas como marcadores de endometriose; (3) Investigar os efeitos da ativina A e da folistatina sobre a expressão de citocinas pró-inflamatórias e mediadores de angiogênese em cultura in vitro de células derivadas de endométrio de mulheres com e sem endometriose. Material e métodos: Estudo prospectivo desenvolvido nos Hospital das Clínicas da UFMG e na Università di Siena. Pacientes: Mulheres com e sem endometriose. Culturas de células estromais de endométrio eutópico de mulheres com e sem endometriose. Métodos: (1) Quantificação da expressão da ativina A, ativina B, receptor da ativina, nodal, cripto, inibina , e folistatina através da reação em cadeia da polimerase (Real Time-PCR) (96 pacientes); (2) Dosagens de ativina A e folistatina no sangue periférico de mulheres com e sem endometriose através de Kits ELISA (214 pacientes); (3) quantificação da expressão de IL-6, IL-8, VEGF por Real Time-PCR nas células das culturas e dosagens de IL-6, IL-8 e VEGF no meio de cultura de pacientes com e sem endometriose (12 culturas). Resultados: O endométrio eutópico de pacientes com endometriose mostrou (1) expressão maior de ativina A RNAm na fase proliferativa e o não aumento de sua expressão na fase secretora , (2) falha na variação da expressão endometrial do cripto e da inibina relacionadas com o ciclo menstrual, (3) padrão de expressão de folistatina RNAm inverso ao do grupo controle, (4) Endometriomas apresentaram variações semelhantes ao endométrio eutópico na expressão de ativina A e proteínas relacionadas à ativina A durante o ciclo menstrual. Com relção às dosagens séricas, o grupo do endometrioma apresentou níveis séricos de ativina A significativamente mais elevados do que os controles (0,22 ± 0,01 ng / ml vs 0,17 ± 0,01 ng / ml, p<0,01). Nenhum subgrupo de endometriose apresentou níveis séricos de folistatina com diferenças significativas em comparação aos controles, enquanto os níveis encontrados no grupo com endometrioma (2,34 ± 0,32 ng / ml) foram maiores do que no grupo com endometriose profunda (e 1,50 ± 0,17 ng / ml, p <0,05). A área sob a curva ROC de ativina A foi 0,700 (intervalo de confiança 95% 0,605-0,794), enquanto que da folistatina foi 0,620 (0,510-0,730) para o diagnóstico de endometrioma de ovário. A combinação de ambos os marcadores em um índice de marcador duplo não melhorou significativamente a precisão diagnóstica. No estudo com culturas celulares, a secreção basal de IL-6 e IL-8 foram maiores no grupo com endometriose. Ativina A aumentou a secreção de IL-8 e VEGF em culturas de mulheres sem endometriose, mas diminuiu a secreção de IL-6 e IL-8 em células de mulheres com endometriose. Estes resultados foram cancelados pela folistatina. Conclusões: o padrão alterado de expressão endometrial da ativina A, cripto (antagonista do receptor da ativina), e folistatina (proteína ligadora da ativina) sugere uma disfunção ativina e proteínas relacionadas na endometriose. Endometriomas mostraram alterações semelhantes da ativina e proteínas relacionadas durante o ciclo menstrual, o que suporta biologia comum para endométrio eutópico e ectópico na endometriose. O presente estudo demonstrou que os níveis séricos de ativina A e folistatina não mudam significativamente na endometriose peritoneal ou profunda infiltrativa e têm acurácia diagnóstica limitada no diagnóstico de endometrioma. Este estudo mostrou, pela primeira vez, que a ativina A regula a expressão e secreção de citocinas e VEGF de maneira diferente em culturas de células de mulheres sem e com endometriose, sugerindo vários possíveis sítios de ação da ativina na patogênese da endometriose