Avaliação da atividade inibidora do sistema complemento humano pelo extrato de glândula salivar e conteúdo intestinal de Aedes aegypti (Diptera: Culicidae)

• Autor(a) principal: Adalberto Alves Pereira Filho
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/35568
• topic: Aedes aegypti; Sistema complemento humano; Inibidores do complemento; Fator H; Entomologia; Aedes; Fator H do complemento

Dengue, Chikungunya e Zika são arbovírus transmitidos aos seres humanos por mosquitos do gênero Aedes, principalmente o Aedes (Stegomyia) aegypti (Linnaeus, 1762), causando surtos simultâneos com manifestações clínicas semelhantes, representando hoje um desafio no diagnóstico e tratamento dos doentes. Machos e fêmeas de A. aegypti alimentam-se de substâncias açucaradas, mas as fêmeas necessitam de um repasto sanguíneos para maturação dos ovos. Para que artrópodes hematófagos realizem um repasto sanguíneo satisfatório em hospedeiros vertebrados, os mecanismos responsáveis pela hemostasia (vasoconstricção, agregação plaquetária, coagulação e reações imunes) precisam ser sobrepostos, de modo que o inseto permaneça vivo e seja capaz de transmitir a infecção a diferentes hospedeiros. Além disso, a saliva de artrópodes hematófagos deve conter moléculas que causam imunomodulação nos hospedeiros vertebrados. Neste contexto, as moléculas presentes na saliva ou no conteúdo intestinal destes artrópodes podem ser inibidoras do sistema do complemento (SC), que constitui parte da resposta imune inata a patógenos ou parte complementar da imunidade adquirida devido aos anticorpos ligados aos microorganismos. Os inibidores salivares e intestinais do SC visam proteger as células do tubo digestivo de artrópodes hematófagos contra o ataque do complemento presente no sangue ingerido. Uma outra forma de evadir o SC de hospedeiros vertebrados seria a captação de fator H, também presente no soro. O fator H, uma vez depositado sob a superfície de células, as protegem da ativação do próprio SC ao promover sua inativação pela ação da proteína regulatória chamada Fator I. O presente trabalho teve como objetivo verificar a atividade anti-complemento do extrato de glândula salivar (EGS) e conteúdo intestinal de A. aegypti sobre as vias alternativa, clássica e das lectinas do sistema complemento humano. Além disso, investigamos se o intestino do mosquito é capaz de captar o fator H do soro humano para se proteger contra o ataque do SC. A inibição das vias clássica e alternativa foram avaliadas através de ensaios hemolíticos assim como a captação do fator H pelo intestino foi realizado com uso de anticorpo anti-fator H humano. Os resultados mostraram que o EGS não é capaz de inibir nenhuma das vias do SC, porém o conteúdo intestinal de fêmeas de A. aegypti inibiu a via clássica e das lectinas, embora não tenha apresentado inibidores solúveis intestinais contra a via alternativa. O conteúdo intestinal não inibiu a deposição dos componentes C1q e MBL, porém houve uma expressiva inibição da deposição dos componentes C4b, C3b, C5b e C9. O conteúdo intestinal possui uma serino protease que foi capaz de clivar C4 em bandas menores que 80 kDa. O intestino de fêmeas de A. aegypti foi capaz de captar o fator H do soro humano, diferentemente de machos. Machos de A. aegypti apresentaram tempo de sobrevivência menor em relação às fêmeas quando submetidos aos componentes do sangue humano (soro humano normal e hemoglobina). As moléculas de C3 em fêmeas de A. aegypti recém alimentadas permanecem em seu estado original, mas a partir de 30 minutos se tornaram inativadas com formação de iC3b, sugerindo que essa estratégia de proteção contra o dano causado pelo complemento esteja presente em A. aegypti, sendo a captação de fator H primordial para inibição da via alternativa do complemento humano pelo A. aegypti. Diante do fato de que inibidores de complemento sejam vitais para a sobrevivência de fêmeas de insetos hematófagos, candidatos vacinais baseados em proteínas de A. aegypti que inibem o complemento humano tem grande potencial em interferir em aspectos relacionados à sobrevivência e à reprodução deste mosquito.