O anestésico intravenoso etomidato estimula a exocitosse de vesículas sinápticas em junção neuromuscular de camundongos

• Autor(a) principal: Priscila Aparecida Costa Valadão
• Data de Publicação: 2013
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-9LEML3
• topic: Biologia Molecular; Etomidato; Sinapse; Anestesicos

Os anestésicos gerais são utilizados na prática clínica com o intuito de promover ao paciente analgesia, inconsciência, amnésia e relaxamento muscular. Ao longo de décadas esforços tem sido feitos para elucidar os possíveis mecanismos moleculares de ação destes agentes. O anestésico etomidato é utilizado na prática clínica como um dos principais agentes de indução anestésica. Ele pode causar alguns movimentos espontâneos, especialmente mioclonias que são observadas em cerca de 50-80% dos pacientes após sua administração, sugerindo assim, um possível efeito destes agentes no sistema nervoso periférico. Além disso, alguns estudos sugerem que anestésicos podem atuar em canais iônicos localizados no terminal pré-sinápticos alterando a liberação de neurotransmissores, assim como na célula muscular, desorganizando receptores nicotínicos, interferindo com o potencial de membrana desta célula. Desta forma, o objetivo deste estudo foi investigar os efeitos pré-sinápticos e pós-sinápticos do etomidato utilizando como modelo experimental a junção neuromuscular de camundongo.Preparações nervo-músculo foram isoladas e marcadas com a sonda fluorescente FM1-43(4 M), uma potente ferramenta para acompanhar exocitose e endocitose de vesículas sinápticas. Após a marcação, as preparações foram expostas a diferentes concentrações de etomidato (0.1,1,2,8,10 e 40 M) e visualizadas em microscópio óptico de fluorescência. Observamos que concentrações clinicamente relevantes de etomidato estimulam a exocitose de vesículas sinápticas. Este efeito não foi inibido por tetrodotoxina (1M), um bloqueador de canais para Na+ sensíveis à voltagem, demonstrando que o etomidato pode agir estimulando a exocitose de vesículas por um mecanismo independente de Na+. Entretanto, a exocitose foi inibida por -conotoxina MVIIC (50 M) um bloqueador inespecífico de canais para Ca2+ sensíveis à voltagem e pelo bloqueador de canais para Ca2+ sensíveis a voltagem do tipo P/Q -AGA IVA (200nM). Utilizando o mesmo modelo experimental investigamos através da técnica de eletrofisiologia possíveis alterações no padrão de frequência e amplitude dos MEEPs na presença do etomidato. A análise dos resultados relativos à frequência e amplitude dos MEEPs demonstrou que na presença do etomidato não houve alteração destes parâmetros. Investigamos também se este anestésico poderia atuar de alguma forma nos receptores nicotínicos para acetilcolina marcados com -bungarotoxina-Alexa 594 (12 M) , que foram visualizados ao microscópio óptico de fluorescência. Nossos dados sugerem que o etomidato pode atuar de algum modo sobre os receptores nicotínicos pós-sinápticos.Em conclusao, nossos dados indicam que o etomidato exerce um efeito pré-sináptico na junção neuromuscular, provavelmente, através da ativação canais para Ca2+ voltagem dependentes do tipo P/Q e que este anestésico pode também interferir com a organização dos receptores nicotínicos para acetilcolina.