Desenvolvimento de proteína quimérica e análise de seu potencial vacinal contra infecção experimental por Trypanosoma cruzi

• Autor(a) principal: Julia Teixeira de Castro
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/55603
• topic: Trypanosoma cruzi; Doença de Chagas; Vacinas; Proteínas recombinantes.; Bioquímica e imunologia; Trypanosoma cruzi; Doença de Chagas; Vacinas; Proteínas Recombinantes

A doença de Chagas (DC), causada pelo parasito protozoário Trypanosoma cruzi (T. cruzi), ainda é responsável por cerca de 10 mil mortes por ano, principalmente de pacientes crônicos. Os tratamentos disponíveis acarretam diversos efeitos adversos e apresentam baixa eficácia durante a fase crônica da doença. Diante disso, o desenvolvimento de uma vacina profilática e terapêutica para DC é extremamente importante. Estudos demonstraram o efeito protetor das proteínas Trans-Sialidase (TS) e Amastigote Surface Protein – 2 (ASP-2) como antígenos vacinais. Neste trabalho, foi desenvolvida uma proteína quimérica, denominada DTT-1, contendo epítopos de ambas as proteínas, preditos como ligantes ao HLA (Human Leucocyte Antigen)-ABC. Com o objetivo de avaliar o potencial vacinal de DTT-1, camundongos C57BL/6 foram imunizados com três doses contendo 10 µg de DTT-1 associada de dois adjuvantes diferentes: CpG + Alumen ou Poly (I:C). Para fins comparativos, grupos de camundongos também foram vacinados com as regiões de TS ou ASP-2 presentes em DTT-1 (rTS e r-ASP-2). Trinta dias após a última imunização, os animais foram desafiados com a cepa Y de T. cruzi. Os resultados demonstraram que a imunização com DTT-1 induziu a secreção de IFN-γ e IL-10 por esplenócitos após estimulação in vitro com rTS e rASP-2. Também foi observado que DTT-1 foi capaz de induzir a produção de IgG total, IgG1 e IgG2c antígeno-específicos. Além disso, a proteína quimérica recombinante gerou uma resposta anti-T. cruzi significativa, demonstrada pela diminuição da parasitemia em comparação aos grupos controle. Com o objetivo de investigar se a imunização com DTT-1 geraria uma imunidade duradoura, camundongos foram desafiados com T. cruzi aos 30, 90 ou 180 dias após a última dose vacinal. Observou-se que animais imunizados com DTT-1 desenvolveram baixa parasitemia até 90 dias comparativamente aos controles, mas apresentaram um aumento da carga parasitária aos 180 dias após a imunização. Os resultados obtidos sugerem que DTT-1 é uma candidata potencial a vacina contra a doença de Chagas.