Papel do IFN- e da iNOS na patogênese do dengue experimental

• Autor(a) principal: Vivian Vasconcelos Costa
• Data de Publicação: 2009
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-8S8JVB
• topic: Dengue Vírus; IL-18; IFN-y; iNOS; Óxido Nítrico; IL-12; Síndrome da Resposta Inflamatória Sistêmica; Inflamação; Microbiologia; Oxído nítrico; Interleucina- 12; Interferon gama; Interleucina- 18; Inflamação; Vírus da dengue

A dengue a mais importante arbovirose que acomete o homem na atualidade e constitui um sério problema de saúde pública no mundo, especialmente nos países tropicais e subtropicais, onde as condições do meio ambiente favorecem o desenvolvimento e a proliferação do Aedes aegypti, o principal mosquito vetor. A ausência de tratamento específico ou mesmo de uma vacina disponível, somado ao escasso conhecimento acerca dos mecanismos envolvidos na patogênese da doença, contribuem a cada dia para o aumento do número de casos. Uma variedade de modelos experimentais tem sido proposta na literatura, contudo, grande parte não é ideal para investigar os mecanismos envolvidos na patogênese da doença. Neste trabalho,inicialmente, objetivamos desenvolver um modelo de infecção para o sorotipo-3 do vírus da dengue (DENV-3). Para isso, realizamos a adaptação de um isolado clínico ao hospedeiro murino. Os animais adultos selvagens (WT), infectados sistemicamente com o DENV-3 adaptado, desenvolveram os sinais clássicos característicos da doençahumana: trombocitopenia, hemoconcentração, aumento da permeabilidade vascular, hipernocicepção articular inflamatória, aumento dos níveis das transaminases hepáticas no soro, produção sistêmiica de mediadores inflamatórios, dano tecidual acentuadoassociado com elevada carga viral nos órgãos-alvo e morte. É importante ressaltar que o aparecimento desses sinais ocorreram de maneira inóculo e linhagem dependente. Embora o conhecimento sobre a patogênese da doença seja incipiente, atribui-se um papel importante às citocinas na resposta do hospedeiro infecção. Dentre estaspodemos destacar o IFN-, uma citocina com importante função na imunidade contra agentes infecciosos. No presente trabalho, avaliamos o papel desempenhado pelo IFN- e pela enzima iNOS, na resposta do hospedeiro infecção pelo DENV-3. Al disso, também avaliamos o papel das citocinas IL-12 e IL-18 durante infecção, visto que conjuntamente essas citocinas atuam estimulando a produção do IFN-. Vimos que os camundongos selvagens (WT) liberam uma grande quantidade de IFN- após a infecção com o DENV-3. Além disso, os animais deficientes na expressão dessa citocina (IFN-- /-) presentaram taxas elevadas de letalidade ap a infeco com o DENV-3. Estamaior susceptibilidade infecção e consequentemente, baixa sobrevida, foi associada maior lesão tecidual nos órgão-alvo para a infecção e com o prejuízo no controle da replicação viral por parte do hospedeiro. Interessantemente, a produção de IFN- parece ser modulada pelas citocinas IL-12 e IL-18. Para avaliar o mecanismo de proteção deIFN-, avaliamos também o papel da enzima iNOS no nosso modelo. Os animais WT infectados com o DENV-3 apresentaram aumento da express da isoforma induzida da enzima ácido nítrico sintase (iNOS). Além disso, após a infecção pelo DENV-3 e concomitante estimulação com IFN- in vitro, células dendríticas (DCs) produziram elevados níveis de NO no sobrenadante. Somado a esses achados, animais deficientesna expressão da iNOS (iNOS-/-) também apresentaram susceptibilidade aumentada infecção pelo DENV-3. Estes animais de maneira semelhante aos animais IFN--/-, apresentaram letalidade acentuada frente infecção, bem como aumentado dano tecidual em fígado e pulmões. Por fim, mesmo sendo capazes de produzir IFN- , osanimais iNOS-/- se mostraram inaptos em controlar a replicação do vírus da dengue, como verificado pelo alto título viral nos ógãos-alvo da infecção. Desta forma, concluímoos que a produção de ácido nítrico (NO) via iNOS induzida pelo IFN- uma via importante na resposta do hospedeiro à infecção pelo DENV-3. Na ausência dessas moléculas, hmarcante incapacidade de controle da replicação viral por parte dohospedeiro, levando a uma manifestação mais grave da infecção e conseqnte morte dos animais. Além disso, as citocinas IL-12 e IL-18 parecem ser importantes na indução da produção do IFN- neste modelo. Estratégias que elevem a produção dessas moléculas podem resultar em benefícios por parte do hospedeiro no controle da infecçãoprimária pelo DENV-3.