Estabelecimento de medidores moleculares envolvidos no processo de infecção de paracoccidioides brasiliensis em celulas de mamifero in vitro.

• Autor(a) principal: Francisco Laurindo da Silva
• Data de Publicação: 2004
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/GAES-64ZH2P
• topic: Paracoccidioides brasiliensis; Microbiologia; Mamífero; Paracoccidioides brasiliensis

Apesar dos inúmeros estudos empreendidos nas últimas décadas na tentativa de elucidar os mecanismos de interação entre Paracoccidioides brasiliensis versus hospedeiros, durante o curso da paracoccidioidomicose (PCM), poucas são as informações disponíveis na literatura que mostram de maneira precisa como ocorre o processo infectivo. Para auxiliar na melhor compreensão dos possíveis mecanismos moleculares envolvidos na interação de P. brasiliensis com seus hospedeiros, estabeleceu-se um modelo de estudo in vitro, que pudesse evidenciar a participação de mediadores de adesão de superfície celular na interação do fungo (Pb18) com células epiteliais CCL-6 em cultura. Os carboidratos, D-manose, D-fucose, N-acetil-D-glicosamina, sorbitol, D-galactosamina e D-glicosamina, os peptídeos GRGDTP, GRDGS e GRGDSPK, e sobrenadante de cultura líquida de P. brasiliensis, foram utilizados como competidores de inibição de adesão do P. brasiliensis em células CCL-6. Também foram utilizadas, em ensaios citoquímicos, as lectinas ConA, WGA, PNA e SBA conjugadas com o fluorocromo FITC, bem como anticorpos específicos para a subunidade 2 e para as integrinas 111 e CD18. Observou-se que nos tratamentos realizados com os carboidratos D-manose, D-fu cose e N-acetil-glicosamina, o peptídeo GRGDSPK e o sobrenadante de cultura líquida do P. brasiliensis os percentuais de inibição de adesão do fungo a célula CCL-6 foram bastante significativos. Células leveduriformes do P. brasiliensis foram prontamente marcadas nos tratamentos realizados com as lectinas ConA e WGA e com anticorpos anti-integrina 111 e 2. Ensaios cromatográficos, de espectro de ressonância magnética nuclear e de espectro de infravermelho da fração livre de proteínas do sobrenadante da cultura de P. basiliensis, demonstraram a presença de uma substância composta de hidrogênio, carbono e de um grupamento amina, que possivelmente seja a molécula que compete pelo sítio de ligação do fungo a células CCL-6.