Estudo dos efeitos tóxicos da formulação comercial do herbicida glifosato sobre células-tronco derivadas de tecido adiposo humano

• Autor(a) principal: Mariane Izabella Abreu de Melo
• Data de Publicação: 2015
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUBD-9YGN3T
• topic: Tecido adiposo; Toxicidade; Células-tronco; Roundup®; Glifosato; Bioquímica e imunologia

O glifosato é o herbicida mais comercializado no mundo e o Roundup® uma de suas fórmulas comerciais mais conhecidas. Muitos estudos têm sido realizados demonstrando o seu potencial em causar danos à saúde humana. Para realizar este trabalho, optamos por utilizar, como modelo experimental, as células-tronco derivadas de tecido adiposo (hASCs), isoladas de voluntários submetidos a cirurgia de lipoaspiração devidamente aprovados por comitê de ética. As hASCs são capazes de se diferenciar em células das linhagens adipogênica e osteogênica. Assim, o principal objetivo deste estudo foi investigar os efeitos tóxicos do Roundup® sobre hASCs nos estados indiferenciado e diferenciado destas células. Para isso, as mesmas foram mantidas no meio DMEM (suplementado com plasma humano) e Roundup® e meio de diferenciação adipogênico ou osteogênico com Roundup® na concentração de 36 ìg mL -1 (IC50 42,98 ±0,91 ìg mL-1). Os tempos de exposição foram de curto (24, 48 e 72 horas) e longo prazos (até 21 dias). Utilizou-se o ensaio de MTT (brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium) para avaliar a toxicidade do glifosato ao longo do tempo do cultivo celular. A marcação por Anexina V- Alexa Fluor 488 e Iodeto de Propídio sugere que a exposição de hASCs ao Roundup® induziu as células à apoptose após 24 horas de exposição. Alterações morfológicas importantes também foram observadas por microscopia de luz durante o período de diferenciação das hASCs tratadas com Roundup®. Por outro lado, a expressão de genes relacionados à diferenciação, como leptina, fosfatase alcalina, e osteopontina, avaliada por RT-PCR foi semelhante ao controle indiferenciado durante o desafio tóxico. Entretanto, apesar de o gene para fosfatase alcalina (FA) ter sido expresso no grupo tratado com agrotóxico, o ensaio de BCIP (5-bromo 4-cloro 3-indolilfosfato p-toluidina) NBT (nitroblue tetrazólio clorídrico) mostrou que a atividade dessa enzima foi menor quando comparada às células em diferenciação sem tratamento com Roundup®. Em conclusão, as evidências têm mostrado que o herbicida Roundup® é capaz de provocar efeitos tóxicos sobre as células-tronco adultas derivadas de tecido adiposo humano.