Avaliação comportamental e morfofuncional de junções neuromusculares e músculos estriados esqueléticos de camundongos com disfunção colinérgica a longo prazo

• Autor(a) principal: Luana Pereira Leite
• Data de Publicação: 2015
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUBD-9WMV6E
• topic: Biologia Celular; Junção neuromuscular; Morfologia; Contração muscular

A junção neuromuscular (JNM) é essencial para a comunicação entre a terminação nervosa e as fibras musculares esqueléticas levando à contração do músculo esquelético. Um dos pontos mais críticos do processo de neurotransmissão colinérgica envolve o evento de armazenamento da acetilcolina (ACh) nas vesículas sinápticas (VSs) via transportador vesicular de acetilcolina (VAChT). Para avaliar a participação e a importância funcional do VAChT na neurotransmissão colinérgica, Prado et al. (2006) geraram uma linhagem de camundongos que apresenta expressão reduzida (knockdown) do gene do VAChT. Esses animais apresentam uma diminuição (~70 %) na expressão da proteína VAChT, porém possuem déficits cognitivos e são miastênicos. Além disso, os camundongos VAChT KDHOM apresentam outras alterações nas JNM como redução do tamanho e conteúdo quântico, redução da frequência potenciais de placa motora em miniatura e déficit na força muscular. No entanto, pouco se sabe sobre o que acontece com a morfologia e função do músculo esquelético e da JNM de camundongos que já possuem déficit colinérgico desde o nascimento até atingirem meia idade e a senescência, ou seja, um déficit colinérgico a longo prazo. Com isso, o objetivo deste estudo foi avaliar as possíveis alterações morfofuncionais dos elementos sinápticos de JNM do diafragma, bem como o de avaliar morfofuncionalmente os músculos soleus (SOL) e extensor longo dos dedos (EDL) de camundongos com disfunção colinérgica (knockdown para o gene do VAChT) a longo prazo. Através da realização de pletismografia e ventilação mecânica para avaliação pulmonar, percebemos que os camundongos VAChT KDHOM não se diferiram dos selvagens (WT) nos parâmetros avaliados. Observamos também que os camundongos VAChT KDHOM não apresentaram diferença quanto a avaliação dos elementos pré e pós-sinápticos da JNM do músculo diafragma, seja de maneira dependente ou não da atividade da terminação nervosa, assim como também não apresentaram alterações ultraestruturais adicionais. No entanto, percebemos que a redução a longo prazo de VAChT acarretou numa maior liberação espontânea de vesículas e provocou alteração na amplitude dos potenciais de placa motora em miniatura (MEPPs) comparado aos VAChT WT. Além disso, os camundongos VAChT KDHOM apresentaram pior desempenho em testes que avaliam a força muscular, o deslocamento e coordenação associado com alterações na área de secção transversal (CSA) e perímetro do músculo SOL e EDL, sendo o SOL apresentando hipertrofia e o EDL atrofia das suas fibras musculares. Além do mais, foram percebidas trocas na composição do tipo de fibra no músculo SOL dos VAChT KDHOM associado a acúmulos de glicogênio intra e intermiofibrilar. Essas alterações nas CSA encontradas nos músculos SOL e EDL foram parcialmente revertidas com 28 dias de tratamento com o fármaco anticolinesterásico, piridostigmina. Todos esses dados sugerem que a liberação de ACh possui um distinto papel na manutenção da estrutura das fibras musculares sendo fundamental para a função muscular global ao longo da vida do animal e que a redução de VAChT pode provocar alterações na liberação espontânea, mas não na liberação evocada de VSs em camundongos com déficit colinérgico a longo prazo.