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Silvia Carolina Guatimosim Fonsecahttp://lattes.cnpq.br/7958786029463633Anderson Kenedy SantosMarilene Hohmuth LopesThiago Verano Bragahttp://lattes.cnpq.br/9766955619066171Victor Moura Vidal Costa2023-05-29T16:40:51Z2023-05-29T16:40:51Z2021-12-09http://hdl.handle.net/1843/54094Já se é descrito que as moléculas chaperonas desempenham um papel importante durante o desenvolvimento das doenças cardíacas. A proteína induzível por estresse 1 (STI1) é uma co-chaperona importante da maquinaria Hsp70 / Hsp90, amplamente estudada em neurônios, onde desempenha um papel na maturação de proteínas e na citoproteção a eventos de estresse celular. Apesar da STI1 ter sua expressão no coração descrita desde 2009, sua função nesse órgão ainda é desconhecida. Neste contexto nosso grupo foi pioneiro em mostrar a presença da STI1 no coração de pacientes humanos e sua redução em corações com insuficiência cardíaca. Também mostramos o papel cardioprotetor da STI1 em modelo de hiperativação adrenérgica induzida pelo isoproterenol (ISO). Apesar de já constatarmos a relevância de STI1 para a resposta ao estresse adrenérgico no coração, os mecanismos envolvidos neste processo ainda são desconhecidos. Dessa forma, o objetivo desse trabalho foi avaliar as vias de sinalização alteradas nos corações de camundongos com redução na expressão da STI1 (STI1+/- ) em resposta ao tratamento ISO. Para isso, realizamos uma análise proteômica do tipo “Bottom up” afim de avaliar e predizer as alterações de vias nesses contextos. Identificamos que os camundongos STI1+/- /ISO apresentaram alterações em diversas vias celulares, com destaque para a inibição da via do fator nuclear 2 relacionado ao eritroide 2 (NRF2), a qual foi posteriormente validada por meio de imunofluorescência no tecido cardíaco de camundongos STI1+/- /ISO quando comparados ao WT/ISO. Também identificamos a predição dos eventos de necrose e fibrose cardíaca nos camundongos STI1+/- /ISO, sendo o último validado por histologia por meio da técnica de picrosírius e qRT-PCR para colágeno 3. Interessantemente, encontramos diversas proteínas relacionadas a síntese e degradação proteica reguladas negativamente no grupo STI1+/- /ISO, indicando que a redução dos níveis de STI1 compromete a síntese proteica no coração em condições de estresse. Este resultado, de certa forma, está alinhado com a ausência de hipertrofia de cardiomiócitos no grupo STI1+/- /ISO quando comparado ao WT/ISO, uma vez que o crescimento hipertrófico demanda da maquinaria de síntese proteica. Em conclusão, estes dados apontam para mediadores celulares dependentes da STI1 no coração, que incluem principalmente vias relacionadas a síntese proteica, que por sua vez inviabiliza o acometimento da hipertrofia de cardiomiócitos. Com isso, nosso trabalho abre perspectivas importantes para estudos mais robustos acerca do papel da STI1 no estresse cardíaco, que podem gerar novas estratégias terapêuticas para doenças cardíacas.Chaperone molecules have been described to play an important role during the development of heart disease. Stress-inducible protein 1 (STI1) is an important cochaperone of the Hsp70 / Hsp90 machinery, widely studied in neurons, where it plays a role in protein maturation and cytoprotection against cellular stress events. Despite STI1 having its expression in the heart described since 2009, its role in this organ is still unknown. In this context, our group was a pioneer in showing the presence of STI1 in the hearts of human patients and its reduction in hearts with heart failure. We also show the cardioprotective role of STI1 in a model of adrenergic hyperactivation induced by isoproterenol (ISO). Although we have already established the relevance of STI1 to the adrenergic stress response in the heart, the mechanisms involved in this process are still unknown. Thus, the aim of this work was to evaluate the altered signaling pathways in mouse hearts with reduced expression of STI1 (STI1+/- ) in response to ISO treatment. For this, we performed a "Bottom up" proteomic assay in order to evaluate and predict the alterations of pathways in these contexts. We identified that the STI1+/- /ISO mice showed alterations in several cellular pathways, with emphasis on the inhibition of the nuclear factor 2 pathway related to erythroid 2 (NRF2), which was later validated by means of immunofluorescence in the cardiac tissue of STI1+/- /ISO mice when compared to WT/ISO. We also identified the prediction of cardiac necrosis and fibrosis events in STI1+/- /ISO mice, the latter being validated by histology using the picrosirius technique and qRT-PCR for collagen 3. Interestingly, we found several proteins related to protein synthesis and degradation down-regulated in the STI1+/-/ISO group, indicating that the reduction in STI1 levels compromises protein synthesis in the heart under stress conditions. This result, in a way, is in line with the absence of cardiomyocyte hypertrophy in the STI1+/- /ISO group when compared to the WT/ISO group, since hypertrophic growth demands the protein synthesis machinery. In conclusion, these data point to STI1- dependent cellular mediators in the heart, which mainly include pathways related to protein synthesis, which, in turn, prevents the onset of cardiomyocyte hypertrophy. Thus, our work opens important perspectives for more robust studies about the role of STI1 in cardiac stress, which may generate new therapeutic strategies for heart disease.CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível SuperiorporUniversidade Federal de Minas GeraisPrograma de Pós-Graduação em Ciências Biológicas - Fisiologia e FarmacologiaUFMGBrasilICB - DEPARTAMENTO DE FISIOLOGIA E BIOFÍSICAFisiologiaCoração IsoproterenolCardiomegaliaProteínas de choque térmicoCoraçãoSTI1IsoproterenolHipertrofia cardíacaVias de sinalização alteradas no coração de camundongos com redução na expressão da proteína induzida por estresse (STI1) tratados com isoproterenolChanged signaling paths in the heart of mice with reduced expression of stress-induced protein (STI1) treated with isoproterenolinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFMGinstname:Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)instacron:UFMGORIGINALDissertação Victor_19nov21.pdfDissertação Victor_19nov21.pdfapplication/pdf2066170https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/54094/3/Disserta%c3%a7%c3%a3o%20Victor_19nov21.pdf96a1c55cb7578c168fb685a4c441b91bMD53LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82118https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/54094/4/license.txtcda590c95a0b51b4d15f60c9642ca272MD541843/540942023-05-29 13:40:51.856oai:repositorio.ufmg.br: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ório InstitucionalPUBhttps://repositorio.ufmg.br/oaiopendoar:2023-05-29T16:40:51Repositório Institucional da UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)false
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