Avaliação da citotoxicidade da quimioterapia fotodinâmica antimicrobiana sobre culturas de células pulpares in vitro

• Autor(a) principal: Ivana Marcia Alves Diniz
• Data de Publicação: 2011
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/ZMRO-8JXRSM
• topic: fotoquimioterapia; citotoxicidade imunológica; Células cultivadas; Fotoquimioterapia; Cultura de células; Agentes fotossensibilizantes; Células Cultura e meios de cultura; Cáries dentárias; Cavidade da polpa dentária; Cavidade pulpar/radiografia; Citotoxicidade imunológica/efeitos da radiação

A quimioterapia fotodinâmica antimicrobiana (do inglês, Photodynamic Antimicrobial ChemoTherapy, PACT) vem sendo utilizada com sucesso na redução dos principais patógenos cariogênicos, mas pouco se sabe sobre seus efeitos sobre as células do tecido dental. Para avaliar a citotoxicidade da PACT utilizando azul de metileno (AM) associado a luz branca ou laser diodo em cultura primária de células pulpares, 1,5 x 105 células/poço foram semeadas em placas de 96-poços e, após 48 h, incubadas com AM (12,5, 25,0 e 50,0 µg/ml) e irradiadas por uma fonte de luz branca (500-800 nm; 400 mW/cm2) ou laser vermelho (660 nm; 1000 mW/cm2), durante um minuto. O metabolismo celular foi avaliado após 0 e 24 h por meio dos testes de MTT (metiltetrazólio), VN (vermelho neutro) e ALP (atividade de fosfatase alcalina). O tipo de morte celular foi analisado por citometria de fluxo pelo método anexina-V/iodeto de propídeo. Análise de variância (ANOVA) seguida do teste de Tukey foram realizados para comparar os grupos. Apenas quando o laser vermelho foi associado ao AM a 12,5 µg/ml o protocolo testado se mostrou ligeiramente citotóxico. Houve uma diminuição estatisticamente significativa do metabolismo celular em todas as concentrações de AM testadas com luz branca e nas concentrações de 25,0 e 50,0 µg/ml irradiadas por laser. Após 24 h, os efeitos citotóxicos foram ainda mais severos demonstrando dano sem recuperação celular. Desaderência e alterações morfológicas foram visíveis à microscopia de luz. Observou-se maior predominância de morte celular por necrose quando a exposição foi feita por luz branca e de apoptose quando feita por laser. A PACT associando o AM a 12,5 ou 25 µg/ml e laser vermelho parece ter o potencial de aplicação clínica da terapia. Entretanto, novos estudos devem ser realizados para otimizar os parâmetros de dosimetria de luz da PACT diretamente aplicada às células pulpares.