Produção de anticorpos contra metaloproteases e crotoxina usando antígenos sintéticos e caracterização proteômica e toxicológica do veneno de Bothrops brazili

• Autor(a) principal: Denis Alexis Molina Molina
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/34836
• topic: Crotoxina; Bothropasina; Epitópo; Veneno de serpentes; Bothrops brazii; Analise proteomico; sínteses de peptídeos; metaloproteases; Serpentes; Hemorragia; Crotoxina; Metaloproteases; Formação de anticorpos

As serpentes pertencentes aos gêneros Bothrops, Crotalus, Lachesis e Micrurus são responsáveis pela maioria dos casos de ofídismos no Brasil. Serpentes do gênero Crotalus spp e Micrurus spp possuem veneno neurotóxico com alta letalidade se não neutalizado a tempo. As serpentes do gênero Bothrops e Lachesis apresentam veneno com ação proteolítica, ocasionando danos permanentes mesmo após o tratamento com soros antiofídicos. O uso tradicional de venenos na imunização de animais para a produção de soros antiofídicos apresenta alguns problemas, uma vez que os animais imunizados podem sofrer com toxicidade dos componentes do veneno, o que diminui sua expectativa de vida. Além disso, a extensa variabilidade inter e intraespecífica na composição bioquímica dos venenos de serpentes podem afetar a eficácia neutralizante dos soros antiofídicos. Dessa forma, é de suma relevância a utilização de novas tecnologias para buscar e produzir imunógenos atóxicos alternativos para serem utilizados na produção de soros antiofídicos. O uso de peptídeos sintéticos e proteínas multiepitópicas que mimetizam epítopos das principais toxinas de cada veneno constituiria uma alternativa para produção de anticorpos neutralizantes com menor impacto sobre os animais experimentais. Esta tese apresenta-se na forma de três artigos, cada um está contido em um capítulo da parte dos resultados. Cada capítulo apresenta seu resumo individualizado. Segue a descrição do conteúdo de cada capítulo: Capítulo 1, (Artigo 1 - Identification of a linear B-cell epitope in the catalytic domain of bothropasin, a metalloproteinase from Bothrops jararaca snake venom), neste artigo descreve-se o mapeamento e síntese de um epítopo linear para células B da bothropasina capaz de induzir anticorpos neutralizantes. Capítulo 2, (Artigo 2 - Engineered protein containing Crotoxin epitopes induces neutralizing antibodies in immunized rabbits), neste artigo descreve-se a produção de uma proteína recombinante multiepitopo da crotoxina capaz de induzir anticorpos neutralizantes do efeito letal da crotoxina. Capítulo 3, (Artigo 3 - Proteomic and toxinological characterization of Peruvian pitviper Bothrops brazili ("jergón shushupe"), venom.), neste artigo, os componentes do veneno de Bothrops brazili (BbV) foram analisados por RP-HPLC, SDS-PAGE e MALDI-TOF/TOF, mostrando que as metaloproteases do veneno de serpentes (SVMPs) foram as proteínas mais abundantes no veneno de B. brazili. Cada artigo apresenta sua discussão em separado. Ao final do terceiro artigo uma discussão geral dos três artigos é apresentada.