Análise do comportamento de cementoblastos de ratos em contato com o produto iônico da dissolução de vidros bioativos

• Autor(a) principal: Sandhra Maria de Carvalho
• Data de Publicação: 2010
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-8DHL6G
• topic: Vidro bioativo; Cementoblastos; Nanoparticulas; Engenharia metalúrgica; Engenharia de minas; Ciencia dos materiais

O cemento é um tecido mineralizado que recobre toda a superfície da raiz do elemento dentário e possui muitas similaridades com o tecido ósseo. O cemento é essencial para regeneração das estruturas que compõem o tecido periodontal, entretanto detalhes sobre a proliferação e diferenciação do seu tipo celular, os cementoblastos, ainda continuam obscuros. O objetivo desse estudo foi primeiro isolar e caracterizar biomolecularmente cementoblastos derivados de dentes de ratos para em uma segunda etapa realizar testes com o produto iônico da dissolução de vidro bioativo com 60% de sílica nano e microparticulado visando à criação de um modelo de regeneração do cemento. Recentes estudos têm demonstrado novos possíveis marcadores de cemento, a proteína de ligação do cemento (CAP), a proteína derivada do cemento (CP-23) e o gene F-Spondin. Nesse estudo foi hipotetizado que um gene embrionário chamado F-Spondin é um possível marcador de cementoblastos e através da análise por RT-PCR qualitativo foi demonstrada a sua expressão nas três populações de células denominadas de células da terceira digestão (3CD), células da quarta digestão (4CD) e células da quinta digestão (5CD) isoladas de raiz de molares de ratos adultos machos. A expressão de F-Spondin foi confirmada por ensaios de Western Blot e imunofluorescência utilizando anticorpos específicos para F-Spondin nas três populações. Foi verificada também a expressão de colágeno tipo I (COL I), sialoproteína óssea (BSP), osteocalcina (OC) e fosfatase alcalina (ALP) através de RT-PCR qualitativo nas populações 3CD, 4CD e 5CD. Fibroblastos gengivais quando comparados com as três populações não expressaram F-Spondin. Após a caracterização celular, foram avaliados os efeitos do produto iônico de vidro bioativo microparticulado ou nanoparticulado quando em contato com as populações celulares. Na análise da viabilidade celular por ensaio de Azul de Trypan, as populações celulares apresentaram um aumento de aproximadamente 24% quando em contato com o vidro bioativo nanoparticulado e de 10% quando em contato com o vidro bioativo microparticulado quando comparadas com o grupo controle. Houve também um aumento significativo da viabilidade celular avaliada pelo ensaio de MTT, de aproximadamente 94% das populações celulares tratadas com Nanovidro bioativo e 24% nas tratadas com Microvidro bioativo em relação ao grupo controle. A proliferação e viabilidade celulares foram confirmadas pelo ensaio de BrdU que demonstrou um aumento de aproximadamente 51% nas células tratadas com Nano e de 14% nas tratadas com Microvidro bioativo em comparação com o grupo controle. Esses resultados sugerem que é possível estabelecer uma cultura celular primária a partir de células de raízes dentárias de molares de ratos adultos e que F-Spondin pode ser um possível marcador de cementoblastos. Além disso, o efeito observado das nanopartículas de vidro bioativo sobre os cementoblastos demonstra ser uma interessante alternativa para ser usada em projetos futuros de membranas compósitas visando à regeneração tecidual do cemento dentário.