Priorização de proteínas quinases de Trypanosoma cruzi como potenciais alvos terapêuticos para o desenvolvimento de inibidores covalentes

• Autor(a) principal: Heveline Oliveira Morais Arruda
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/50431
• topic: Trypanosoma cruzi; Quinases; Inibidores covalentes; Kinases; Covalent inhibitors; Bioquímica e imunologia; Trypanosoma cruzi; Fosfotransferases; Inibidores de Proteínas Quinases

A doença de Chagas, uma doença tropical negligenciada causada pelo organismo Trypanosoma cruzi (T. cruzi), continua gerando grande impacto na saúde pública e prejuízos financeiros, mesmo depois de 100 anos de sua descoberta. O tratamento disponível hoje apresenta baixa eficácia e severos efeitos colaterais. Nos esforços de combater esta doença alguns alvos terapêuticos têm sido explorados. O T. cruzi possui 190 proteínas quinases (PKs) no seu genoma que atuam em diversos processos fisiológicos, constituindo uma fonte potencial de alvos terapêuticos. O conhecimento acerca das estruturas das quinases, em conjunto com os estudos de mapeamento de resíduos reativos de cisteínas, permitem o planejamento racional de inibidores covalentes para estas proteínas como uma estratégia que equilibra seletividade, eficácia e segurança. Neste trabalho empregaram-se técnicas de bioinformática para priorizar quinases de T. cruzi potencialmente vitais para o organismo e que sejam promissores alvos para uma inibição covalente. Para tanto, partiu-se do levantamento das quinases das cepas Dm28c 2014 (171 PKs) e CL Brener Esmeraldo-like (175 PKs) em bancos de dados, seguida da classificação das quinases nos grupos e famílias típicos dessa classe de proteínas. Na sequência, foi feito o mapeamento das cisteínas presentes no sítio ativo das quinases das duas. Foram mapeadas 25 posições estratégicas com características estereoquímicas e eletrostáticas favoráveis para uma inibição covalente. Além deste mapeamento, estudos que validaram a importância biológica de quinases de Trypanosoma brucei (T. brucei) in vivo, na proliferação, no ciclo celular e na sobrevivência do parasito, embasaram a etapa de priorização das PKs. Nesta etapa, focada na cepa CL Brener, foram priorizadas 3 quinases de T. cruzi: AUK1, CLK1 e CRK9. A AUK1 é reportada como tendo um papel na divisão celular e possivelmente na diferenciação do parasito. A CLK1 e a CRK9, por extrapolação dos estudos em T. brucei, supostamente estão envolvidas na divisão celular. Além disso, a CRK9 também estaria envolvida na expressão gênica. Por fim, para possibilitar o início dos estudos de inibição destas quinases, foram construídos os modelos tridimensionais a partir do método de modelagem comparativa, com posterior validação estereoquímica e energética dos modelos gerados. As informações e discussões construídas ao longo deste estudo sobre as proteínas quinases de T. cruzi poderão ser utilizadas para embasar novas propostas de alvos terapêuticos e trazer novas perspectivas para a gestão da doença de Chagas.