Efeito da toxina PhTx3-4 do veneno de Phoneutria nigriventer nos níveis de Ca2+ intracelular na exocirose em sinaptosomas

• Autor(a) principal: Celio Jose de Castro Junior
• Data de Publicação: 2007
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/SMOC-7DQNEM
• topic: -CgTX MVIIC; Toxinas da Phoneutria; -CgTX GVIA; -AGA IVA; Sinaptosomas; Canais de cálcio; Exocitose; Toxinas; Transmissão nervosa

O influxo de cálcio e a exocitose de vesículas sinápticas no terminal nervoso são eventos chave na neurotransmissão. A entrada de cálcio, em resposta a um estímulo despolarizante, através de canais de cálcio regulados por voltagem é o principal sinal que dispara a ativação da maquinaria exocitótica e consequente liberação de neurotransmissores. A existência de diferentes subtipos de canais de cálcio regulados por voltagem com funções fisiológicas distintas motiva a busca de novos agentes farmacológicos atuantes sobre estes canais. O veneno da aranha brasileira Phoneutria nigriventer contém uma variedade de substâncias com ação predominantemente neurotóxica, dentre elas a fração PhTx3-4 foi recentemente descrita como uma potente bloquadora da neurotransmissão em diversos modelos experimentais. Para testar o efeito dessa toxina nas alterações intracelulares da concentração 2+]) induzidas por KCl, terminais nervosos centrais isolados de cálcio ([Ca(sinaptosomas) foram marcados com a sonda fluorescente Fura 2-AM. A 2+PhTx3-4 reduziu a [Ca] induzida por KCl de uma forma dependente da dose encontrado inibindo 53% desse efeito em concentrações saturantes. O IC502+para o efeito inibitório da Tx3-4 na [Ca ] foi de 1,4 nM. As toxinas bloqueadoras de canais de cálcio -conotoxina MVIIC, -conotoxina GVIA e -agatoxina IVA reduziram por 47, 22 e 24%, respectivamente, o aumento na 2+] induzida por KCl. Em associação à PhTx3-4, somente a -agatoxina IVA [Ca2+mostrou efeito inibitório aditivo no aumento da [Ca] induzida por KCl. Para investigar o efeito da PhTx3-4 na exocitose de vesículas utilizamos a sonda fluorescente FM2-10. A PhTx3-4 também reduziu com elevada potência (IC = 501,1 nM) a exocitose induzida por KCl, efeito comparativamente maior que o das toxinas -conotoxina MVIIC, -conotoxina GVIA e -agatoxina IVA. Tal como ocorreu nas medidas de cálcio intracelular, somente a -agatoxina IVA apresentou efeito aditivo inibitório com a PhTx3-4 na exocitose induzida por KCl. Juntos esses dados mostram que PhTx3-4 é um potente inibidor de canais de cálcio Tipo-P/Q envolvidos no controle da entrada de cálcio e exocitose de vesículas sinápticas em sinaptosomas cérebro-corticais.