Comparison of indirect ELISA based on recombinant protein NcSRS2 and IFAT for detection of Neospora caninum antibodies in sheep

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Andreotti, Renato
Data de Publicação: 2009
Outros Autores: Matos, Maria de Fátima Cepa, Gonçalves, Kelly Noda, Oshiro, Leandra Marla, Lima Junior, Manoel Sebastião da Costa, Paiva, Fernando, Leite, Fábio Leivas
Tipo de documento: Artigo
Idioma: eng
Título da fonte: Repositório Institucional da UFMS
Texto Completo: https://repositorio.ufms.br/handle/123456789/1249
http://dx.doi.org/10.4322/rbpv.01802004.
Resumo: Neospora caninum é um parasito Apicomplexa que pode causar abortos e é reconhecido como agente importante responsável por perdas econômicas e reprodutivas. Este estudo avaliou a proteína recombinante NcSRS2 como antígeno para ELISA indireto na determinação de resposta imune para N. caninum em ovinos. 441 amostras de soro foram analisadas por IFAT e ELISA indireto com rNcSRS2 e ambos os testes revelaram comportamento similar. A sensibilidade e especificidade de ELISA indireto foram 98,6 e 98,3%, respectivamente. O índice kappa mostrou uma concordância entre os dois testes com valor de 0,98, que é considerado excelente. Prevalências de 30,8 e 32,0% detectadas por IFAT e ELISA indireto, respectivamente, mostraram que os testes não diferiram significativamente nesse aspecto (P > 0.05). A análise sorológica revelou que os anticorpos específicos da cauda de histidina reconheceu por Western Blotting a proteína recombinante NcSRS2. O valor potencial do ELISA indireto baseado no antígeno rNcSRS2 como ferramenta altamente específica e sensível para diagnóstico sorológico é também reforçado pela alta concordância dos valores obtidos com IFAT e com ELISA indireto. Esses resultados respaldam o uso potencial da proteína rNcSRS2 como antígeno em ELISA indireto em ovinos.
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A sensibilidade e especificidade de ELISA indireto foram 98,6 e 98,3%, respectivamente. O índice kappa mostrou uma concordância entre os dois testes com valor de 0,98, que é considerado excelente. Prevalências de 30,8 e 32,0% detectadas por IFAT e ELISA indireto, respectivamente, mostraram que os testes não diferiram significativamente nesse aspecto (P > 0.05). A análise sorológica revelou que os anticorpos específicos da cauda de histidina reconheceu por Western Blotting a proteína recombinante NcSRS2. O valor potencial do ELISA indireto baseado no antígeno rNcSRS2 como ferramenta altamente específica e sensível para diagnóstico sorológico é também reforçado pela alta concordância dos valores obtidos com IFAT e com ELISA indireto. Esses resultados respaldam o uso potencial da proteína rNcSRS2 como antígeno em ELISA indireto em ovinos.ABSTRACT - Neospora caninum, an Apicomplexan parasite that can causes abortion, is responsible for considerable economic and reproductive losses in livestock. The purpose of the present study was to determine whether recombinant NcSRS2 is a suitable indirect ELISA antigen for determining specific immune response to N. caninum in sheep. A total of 441 serum samples were subjected to IFAT and rNcSRS2 based-ELISA, with both tests performing similarly. The sensitivity and specificity of indirect ELISA were 98.6 and 98.3%, respectively. The kappa index shows 0.98 concordance between the two tests, which is considered excellent. Seroprevalences of 30.8 and 32.0% were detected by IFAT and indirect ELISA, respectively, showing these tests did not differ significantly on this measure (p > 0.05). Serological analysis showed that HisG tag was detected by Western Blotting recognizing rNcSRS2 protein. The potential value of rNcSRS2-based ELISA as a highly specific and sensitive tool for serological diagnosis is also supported by the strong agreement found between IFAT and ELISA. The results support the potential use of recombinant protein NcSRS2 as an antigen in indirect ELISA in sheep.engRevista Brasileira de Parasitologia VeterináriaAntígenosOvinos - parasitologiaEnsaio de Imunoadsorção EnzimáticaDiagnósticoAntigensSheep - parasitologyEnzyme-Linked Immunosorbent AssayDiagnósticoComparison of indirect ELISA based on recombinant protein NcSRS2 and IFAT for detection of Neospora caninum antibodies in sheepComparação entre ELISA baseado no antígeno recombinante NcSRS2 e RIFI para detecção de anticorpos de Neospora caninum em ovinosinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/articleAndreotti, RenatoMatos, Maria de Fátima CepaGonçalves, Kelly NodaOshiro, Leandra MarlaLima Junior, Manoel Sebastião da CostaPaiva, FernandoLeite, Fábio Leivasinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFMSinstname:Universidade Federal de Mato Grosso do Sul (UFMS)instacron:UFMSTHUMBNAILComparison of indirect ELISA.pdf.jpgComparison of indirect ELISA.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1634https://repositorio.ufms.br/bitstream/123456789/1249/4/Comparison%20of%20indirect%20ELISA.pdf.jpg42eedfdaf03182d0a87a00397882c1bfMD54ORIGINALComparison of indirect ELISA.pdfComparison of indirect ELISA.pdfapplication/pdf641567https://repositorio.ufms.br/bitstream/123456789/1249/1/Comparison%20of%20indirect%20ELISA.pdffd77a007a4d8d2991aba968a7837a1a3MD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81748https://repositorio.ufms.br/bitstream/123456789/1249/2/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD52TEXTComparison of indirect ELISA.pdf.txtComparison of indirect ELISA.pdf.txtExtracted texttext/plain22409https://repositorio.ufms.br/bitstream/123456789/1249/3/Comparison%20of%20indirect%20ELISA.pdf.txt9b3eb0e247c942ecff7888ba5801b836MD53123456789/12492021-09-30 15:56:14.561oai:repositorio.ufms.br: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Repositório InstitucionalPUBhttps://repositorio.ufms.br/oai/requestri.prograd@ufms.bropendoar:21242021-09-30T19:56:14Repositório Institucional da UFMS - Universidade Federal de Mato Grosso do Sul (UFMS)false
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