Bioprospecção de fungos endofíticos associados às folhas da axonopus leptostachyus (Poaceae)

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Nunes, Emanuel Victor dos Santos
Data de Publicação: 2020
Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Monografias da UFMT
Texto Completo: http://bdm.ufmt.br/handle/1/1772
Resumo: Endophytic fungi colonize healthy plant organs, and are acknowledged as new sources of natural products. Its special metabolites have potential use in the farming, food and drug industries, with biological activities, such as antimicrobial, cytotoxic, among others. In this work, were selected for the chemical investigation and evaluation of potential bioactivity of its metabolites, the endophytic fungus P90 Magnaporthales sp., isolated from the leaves of the Pantanal grass Axonopus leptostachyus. The endophyte was cultivated in 50 petri dishes with PDA and incubated for 15 days at room temperature. The culture medium and mycelium were randomly cut, transferred to an erlenlenmeyer flask and extracted with EtOAc in shaking incubator for 24h. The material was filtered in low pressure and dried, resulting in a crude extract. The extract was fractionated in preparative scale by adsorption chromatography in normal phase (silica gel) with mobile phase methanol:chloroform:hexane (1:4:5). The resulting fractions were evaluated for detection of antibacterial activity with Minimal Inhibitory Concentration, Minimal Bactericidal Concentration, and biofilm reduction assays, and cytotoxic activity facing human carcinoma strains. The HPLC fractionation resulted in the isolation of 4 substances with superior purity grade, two of them demonstrating activity facing human colorectal cancer strain, one of which also showed antibacterial activity against the bacterial strain Enterococcus faecium. The substances were subsequently submitted to Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy analysis for structural elucidation.
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The material was filtered in low pressure and dried, resulting in a crude extract. The extract was fractionated in preparative scale by adsorption chromatography in normal phase (silica gel) with mobile phase methanol:chloroform:hexane (1:4:5). The resulting fractions were evaluated for detection of antibacterial activity with Minimal Inhibitory Concentration, Minimal Bactericidal Concentration, and biofilm reduction assays, and cytotoxic activity facing human carcinoma strains. The HPLC fractionation resulted in the isolation of 4 substances with superior purity grade, two of them demonstrating activity facing human colorectal cancer strain, one of which also showed antibacterial activity against the bacterial strain Enterococcus faecium. The substances were subsequently submitted to Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy analysis for structural elucidation.Fungos endofíticos colonizam tecidos de órgãos de plantas saudáveis, e são reconhecidos como novas fontes de produtos naturais. Seus metabólitos especiais possuem potencial uso no setor do agronegócio, indústria alimentícia e farmacêutica, com diversas atividades biológicas, como antimicrobiana, citotóxica, entre outras. Neste trabalho, foi selecionado para a investigação química e avaliação do potencial bioativo de seus metabólitos, o fungo endofítico P90 Magnaporthales sp., isolado de folhas da gramínea pantaneira Axonopus leptostachyus. O endófito foi cultivado em 50 placas de petri com BDA e incubado por 15 dias em temperatura ambiente. O meio de cultura e micélio foram cortados aleatoriamente, transferidos para um frasco erlenmeyer e extraídos com AcOEt em mesa giratória orbital por 24h. O material foi filtrado em pressão reduzida e seco, obtendo o extrato bruto. O extrato foi fracionado em escala preparativa por cromatografia de adsorção em fase normal (sílica gel), com fase móvel metanol:clorofórmio:hexano (1:4:5). As frações resultantes foram avaliadas para a detecção de atividade antibacteriana em ensaios de Concentração Inibitória Mínima, Concentração Bactericida Mínima e redução de biofilme, e atividade citotóxica frente a linhagens de carcinomas humanos. O fracionamento em Cromatografia Líquida de Alta Eficiência resultou no isolamento de 4 substâncias com melhor grau de pureza, onde duas demonstraram citotoxicidade frente à linhagem de carcinoma colorretal humano, uma das quais também apresentou atividade antibacteriana frente a linhagem de Enterococcus faecium. As substâncias foram posteriormente submetidas às análises espectroscópicas de Ressonância Magnética Nuclear para a elucidação estrutural.Universidade Federal de Mato GrossoBrasilInstituto de Ciências Exatas e Naturais (ICEN) – RondonópolisUFMT CUR - RondonopólisCiências Biológicas - CURTeles, Helder Lopeshttp://lattes.cnpq.br/5902911518497333Teles, Helder Lopeshttp://lattes.cnpq.br/5902911518497333Lisboa, Helen Cristina Faverohttp://lattes.cnpq.br/5820048364853772Lacerda, Cristina Alveshttp://lattes.cnpq.br/3477647984540055Nunes, Emanuel Victor dos Santos2020-10-27T18:47:21Z2020-02-272020-10-27T18:47:21Z2020-02-27info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisinfo:eu-repo/semantics/datasetNUNES, Emanuel Victor dos Santos. Bioprospecção de fungos endofíticos associados às folhas da axonopus leptostachyus (Poaceae). 2019. 58 f. 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