Avaliação do estresse oxidativo, dano genotóxico e apoptose em células mononucleares de pacientes portadores de malária causada pelo Plasmodium vivax

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Pepato, Marco Andrey
Data de Publicação: 2012
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFMT
Texto Completo: http://ri.ufmt.br/handle/1/1575
Resumo: Malaria is one of the major infectious disesses that plague mankind and is considered one of the most important public health problems in the world. Malaria vivax is an endemic disease in Amazon region, corresponding to more than 80% of registered cases. The infection increases the production of reactive oxygen species (ROS), a harmful agent to macromolecules such as DNA, which may lead cells to apoptosis induction. The aim of this study was to evaluate the basal level of DNA damage, as well as apoptosis frequency, antioxidant enzymes activity and the presence of an oxidative stress marker in samples of periphery blood of patients infected with Plasmodium vivax and healthy controls. Samples of 80 patients and 76 controls were submitted to the comet assay to evaluate genotoxicity, having tail moment as a parameter. Apoptosis (measured by caspase 3 activity) and the activity of glutathione peroxidase (GPx) and superoxide dismutase (SOD) enzymes were performed using commercial kits. Malondialdheide (MDA) was detected by tiobarbituric acid reaction (TBA). The results showed that mononuclear cells of malaria patients presented higher levels of basal DNA damage (TM=26,71) when compared to controls (TM=10,05) (p=<0,0001). The frequency of apoptotic cells also was significantly increased (p=<0,0001) in patients (39,3 %) in comparison to controls (21,6%), as well as of MDA levels (2,48 µM e 1,93 µM, respectively). There was no difference between both groups in relationship to SOD activity; however, GPx activity was significantly higher (p= 0,0005) in patients (7666,9 U/L) when compared to controls (6386,6 U/L). There was no significant correlation between DNA damage and SOD, GPx and MDA; however, there was a significant negative correlation between DNA damage and apoptosis (r= -0,30, p=0,006) and between MDA and apoptosis (r= -0,34, p=0,001). The results demonstrate that malaria vivax infection increases the oxidative stress, which has significative genotoxic and citotoxic effects on mononuclear cells of malaria patients.
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Samples of 80 patients and 76 controls were submitted to the comet assay to evaluate genotoxicity, having tail moment as a parameter. Apoptosis (measured by caspase 3 activity) and the activity of glutathione peroxidase (GPx) and superoxide dismutase (SOD) enzymes were performed using commercial kits. Malondialdheide (MDA) was detected by tiobarbituric acid reaction (TBA). The results showed that mononuclear cells of malaria patients presented higher levels of basal DNA damage (TM=26,71) when compared to controls (TM=10,05) (p=<0,0001). The frequency of apoptotic cells also was significantly increased (p=<0,0001) in patients (39,3 %) in comparison to controls (21,6%), as well as of MDA levels (2,48 µM e 1,93 µM, respectively). There was no difference between both groups in relationship to SOD activity; however, GPx activity was significantly higher (p= 0,0005) in patients (7666,9 U/L) when compared to controls (6386,6 U/L). There was no significant correlation between DNA damage and SOD, GPx and MDA; however, there was a significant negative correlation between DNA damage and apoptosis (r= -0,30, p=0,006) and between MDA and apoptosis (r= -0,34, p=0,001). The results demonstrate that malaria vivax infection increases the oxidative stress, which has significative genotoxic and citotoxic effects on mononuclear cells of malaria patients.A malária é uma das principais doenças infecciosas que afligem a humanidade e é considerada um dos mais importantes problemas de saúde pública do mundo. A malária causada pelo Plasmodium vivax é uma doença endêmica na Região Amazônica e é responsável por mais de 80% dos casos aí registrados. A infecção pelo Plasmodium é acompanhada por grande aumento do estresse oxidativo, resultado da produção das espécies reativa do oxigênio (ROS, reactive oxygen species). As ROS são agentes causadoras de dano em macromoléculas, como o DNA, o que pode ter como consequência a indução de apoptose. O presente estudo teve como objetivo avaliar o nível de dano no DNA, bem como a freqüência de apoptose, atividade de enzimas antioxidantes e marcador de estresse oxidativo em amostras de sangue periférico de indivíduos infectados por Plasmodium vivax e controles normais. Amostras de 80 pacientes e 76 controles foram coletadas e submetidas ao ensaio cometa para avaliar danos no DNA, tendo como parâmetro o “tail moment” (TM). A detecção de apoptose (atividade da caspase 3) e a atividade das enzimas glutationa peroxidase (GPx) e superóxido dismutase (SOD) foram realizadas utilizando-se kits comerciais. O marcador de estresse oxidativo (Malondialdeído – MDA) foi detectado pela reação com o ácido tiobarbitúrico (TBA). Os resultados obtidos demonstram que células mononucleares dos pacientes apresentaram maior nível de danos no DNA (TM= 26,71) em comparação com os controles (TM=10,05) (p=<0,0001). A frequência de células apoptóticas nos pacientes (39,3 %) também foi significativamente maior (p=<0,0001) do que a observada nos controles (21,6%), bem como a concentração do MDA (2,48 µM/L e 1,93 µM/L, respectivamente). Embora não tenha havido diferenças com relação à SOD, a atividade enzimática da GPx nos pacientes (média= 7666,9 U/L) foi significativamente maior (p= 0,0005) em comparação aos controles (média= 6386,6 U/L).). Não houve correlação significativa entre dano no DNA e SOD, GPx e MDA. Porém, houve correlação negativa (r= -0,30, p=0,006) entre o dano no DNA e a apoptose e entre o MDA e a apoptose (r= -0,34, p=0,001). Os resultados demonstram que o estresse oxidativo aumenta durante a infecção e que este pode ter efeitos genotóxicos e citotóxicos significativos sobre as células mononucleares dos pacientesUniversidade Federal de Mato GrossoBrasilFaculdade de Medicina (FM)UFMT CUC - CuiabáPrograma de Pós-Graduação em Ciências da SaúdeBranco, Carmen Lúcia Bassihttp://lattes.cnpq.br/0202623098081674Branco, Carmen Lúcia Bassi602.609.809-78http://lattes.cnpq.br/0202623098081674Santos, Fabrício Rios891.650.555-00http://lattes.cnpq.br/6822470099378179602.609.809-78Bahia, Marcelo de Oliveira296.261.102-87http://lattes.cnpq.br/3219037174956649Pepato, Marco Andrey2019-11-08T13:47:59Z2012-07-022019-11-08T13:47:59Z2012-06-22info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisPEPATO, Marco Andrey. Avaliação do estresse oxidativo, dano genotóxico e apoptose em células mononucleares de pacientes portadores de malária causada pelo Plasmodium vivax. 2012. 119 f. Dissertação (Mestrado em Ciências da Saúde) - Universidade Federal de Mato Grosso, Faculdade de Medicina, Cuiabá, 2012.http://ri.ufmt.br/handle/1/1575porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFMTinstname:Universidade Federal de Mato Grosso (UFMT)instacron:UFMT2019-11-09T06:02:46Zoai:localhost:1/1575Repositório InstitucionalPUBhttp://ri.ufmt.br/oai/requestjordanbiblio@gmail.comopendoar:2019-11-09T06:02:46Repositório Institucional da UFMT - Universidade Federal de Mato Grosso (UFMT)false
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