Avaliação da participação de receptores do tipo toll na indução de resposta imune por Lactobacillus delbrueckii UFV H2b20 .
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Data de Publicação: | 2007 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UFOP |
Texto Completo: | http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/3069 |
Resumo: | O uso de bactérias probióticas como adjuvantes de vacinas tem sido considerado uma importante estratégia para o aumento de eficácia desta ferramenta de combate às mais diversas patologias. Trabalhos recentes realizados com o candidato a adjuvante, Lactobacillus delbrueckii UFV H2b20, demonstraram sua capacidade de induzir, in vitro, a produção das citocinas pró-inflamatórias IFN-γ, TNF-α e IL-12 por esplenócitos de camundongos BALB/c e células mononucleares do sangue periférico humano. Apesar da indução destas citocinas características de uma resposta imune TH1, esta estirpe bacteriana foi incapaz de proteger camundongos BALB/c da infecção por L. braziliensis, sugerindo uma possível regulação do processo inflamatório. A partir destes dados, decidiu-se caracterizar o perfil de resposta induzido por L. delbrueckii em esplenócitos de diferentes linhagens de camundongos, no intuito de compreender os mecanismos envolvidos no controle da resposta. Neste sentido, verificamos que o estímulo L. delbrueckii morto pelo calor determinou a produção de citocinas pró e antiinflamatórias, e também das quimiocinas CCL2 e CXCL10, sugerindo que esta preparação é capaz de induzir o recrutamento de macrófagos e células NK. Avaliou-se também a participação dos receptores do tipo Toll, mais precisamente TLR-2 e TLR-4, no reconhecimento do lactobacilo, e a importância deste processo na indução da resposta imune subseqüente. Os resultados obtidos nos experimentos com linhagens deficientes para estes receptores demonstraram a participação efetiva apenas do receptor TLR-2. Este dado foi comprovado pelos experimentos realizados com o extrato de parede do probiótico, em que a ausência do receptor levou à diminuição da indução de IFN-γ. A caracterização molecular desta fração da bactéria, por sua vez, demonstrou que esta possui naturezas glicídicas e lipídicas. Em síntese, nossos dados demonstraram que o lactobacilo estudado é capaz de induzir diferentes perfis de resposta imunológica e que esta capacidade é determinada de forma importante pela ativação de TLR-2. |
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Freitas, Leonardo Santos deAfonso, Luís Carlos Crocco2013-07-17T18:03:12Z2013-07-17T18:03:12Z2007FREITAS, L. S. de. Avaliação da participação de receptores do tipo toll na indução de resposta imune por Lactobacillus delbrueckii UFV H2b20 . 2007. 91 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2007.http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/3069O uso de bactérias probióticas como adjuvantes de vacinas tem sido considerado uma importante estratégia para o aumento de eficácia desta ferramenta de combate às mais diversas patologias. Trabalhos recentes realizados com o candidato a adjuvante, Lactobacillus delbrueckii UFV H2b20, demonstraram sua capacidade de induzir, in vitro, a produção das citocinas pró-inflamatórias IFN-γ, TNF-α e IL-12 por esplenócitos de camundongos BALB/c e células mononucleares do sangue periférico humano. Apesar da indução destas citocinas características de uma resposta imune TH1, esta estirpe bacteriana foi incapaz de proteger camundongos BALB/c da infecção por L. braziliensis, sugerindo uma possível regulação do processo inflamatório. A partir destes dados, decidiu-se caracterizar o perfil de resposta induzido por L. delbrueckii em esplenócitos de diferentes linhagens de camundongos, no intuito de compreender os mecanismos envolvidos no controle da resposta. Neste sentido, verificamos que o estímulo L. delbrueckii morto pelo calor determinou a produção de citocinas pró e antiinflamatórias, e também das quimiocinas CCL2 e CXCL10, sugerindo que esta preparação é capaz de induzir o recrutamento de macrófagos e células NK. Avaliou-se também a participação dos receptores do tipo Toll, mais precisamente TLR-2 e TLR-4, no reconhecimento do lactobacilo, e a importância deste processo na indução da resposta imune subseqüente. Os resultados obtidos nos experimentos com linhagens deficientes para estes receptores demonstraram a participação efetiva apenas do receptor TLR-2. Este dado foi comprovado pelos experimentos realizados com o extrato de parede do probiótico, em que a ausência do receptor levou à diminuição da indução de IFN-γ. A caracterização molecular desta fração da bactéria, por sua vez, demonstrou que esta possui naturezas glicídicas e lipídicas. Em síntese, nossos dados demonstraram que o lactobacilo estudado é capaz de induzir diferentes perfis de resposta imunológica e que esta capacidade é determinada de forma importante pela ativação de TLR-2.The use of probiotic bacteria as an adjuvant has been considered an important strategy to increase the effectiveness of vaccines against several pathogens. Recent work with the adjuvant candidate, Lactobacillus delbrueckii UFV H2b20, described its capacity to induce, in vitro, pro-inflammatory cytokines such as IFN-γ, TNF-α and IL-12 by mouse splenocites and mononuclear peripheral human blood cells. The production of cytokines characteristic of a TH1 immune response was, however, unable to protect BALB/c mice against a Leishmania braziliensis infection, suggesting a possible regulation of the inflammatory process. Based on these observations, we decided to characterize the L. delbrueckii induced response profile, aiming to understand the mechanism involved in the response control. To this aim, we have verified the dead L. delbrueckii stimulation induced pro and anti-inflammatory cytokines production and also CCL2 and CXCL10 chemokines, suggesting that this preparation is probably able to recruit macrophages and NK cells. Toll-like receptors, specifically TLR-2 and TLR-4, were also evaluated as participants in actobacilli recognition and involvement in the subsequent immune response induction. The results of experiments with mouse lineages deficient for these receptors showed an effective participation of TLR-2 receptor only. These results were confirmed by experiments performed with the probiotic wall extract, which the absence of this receptor leaded to a decrease IFN-γ induction. The molecular characterization of this bacterial fraction demonstrated the presence of sugar and lipids in its composition. In summary, our data showed that the studied lactobacilli is able to induce different immunological responses depending on the dose used and that ability is mediated by TLR-2 activation.Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.LeishmaniaLactobaciloCitocinasQuimiocinasAvaliação da participação de receptores do tipo toll na indução de resposta imune por Lactobacillus delbrueckii UFV H2b20 .info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFOPinstname:Universidade Federal de Ouro Preto (UFOP)instacron:UFOPinfo:eu-repo/semantics/openAccessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82636http://www.repositorio.ufop.br/bitstream/123456789/3069/2/license.txtc2ffdd99e58acf69202dff00d361f23aMD52ORIGINALDISSERTAÇÃO_AvaliaçãoParticipaçãoReceptores.PDFDISSERTAÇÃO_AvaliaçãoParticipaçãoReceptores.PDFapplication/pdf3932932http://www.repositorio.ufop.br/bitstream/123456789/3069/1/DISSERTA%c3%87%c3%83O_Avalia%c3%a7%c3%a3oParticipa%c3%a7%c3%a3oReceptores.PDF84d0767a99073e40454d3b0d15ad49b6MD51123456789/30692019-04-23 10:57:48.581oai:localhost: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Repositório InstitucionalPUBhttp://www.repositorio.ufop.br/oai/requestrepositorio@ufop.edu.bropendoar:32332019-04-23T14:57:48Repositório Institucional da UFOP - Universidade Federal de Ouro Preto (UFOP)false |
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