Correlação entre capacidade ectonucleotidásica de isolados de Lactobacillus e a produção de citocinas por células dendríticas.

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Pereira, Hellem Crhistina Damazo
Data de Publicação: 2014
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFOP
Texto Completo: http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/6350
Resumo: Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa de Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.
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spelling Correlação entre capacidade ectonucleotidásica de isolados de Lactobacillus e a produção de citocinas por células dendríticas.LactobaciloCélulasCitocinasProteínas de cassetes de Ligação de ATPPrograma de Pós-Graduação em Biotecnologia. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa de Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.Probióticos são microrganismos vivos que, quando administrados de forma adequada, agregam benefícios à saúde do hospedeiro. Várias espécies do gênero Lactobacillus apresentam efeito probiótico comprovado e são importantes moduladoras do sistema imune intestinal. Os probióticos estimulam as células dendríticas (DCs) a produzirem citocinas que diferenciam as células T em Th1, Th2, Th17 ou Treg. As ectonucleotidases são enzimas capazes de hidrolisar nucleotídeos di e trifosfatados. Essas ectoenzimas são importantes para a modulação da resposta imune intestinal devido à hidrólise de ATP, que quando aumentada no meio extracelular é considerada uma molécula inflamatória. Por outro lado o acúmulo de adenosina, através da hidrólise de ATP em AMP, pela 5’-nucleotidase, estimula a resposta anti-inflamatória. O objetivo do trabalho foi relacionar a atividade ectonucleotidásica de diferentes linhagens de Lactobacillus com a capacidade de ativação de DCs e a produção de citocinas. Os Lactobacillus foram incubados com ATP, ADP ou AMP e os níveis de hidrólise foram avaliados através da liberação de fosfato inorgânico (Pi). Demonstrouse que os lactobacilos hidrolisam ATP diferentemente, dependendo da linhagem, sendo que Lactobacillus mali L.11 e Lactobacillus acidophilus L.36 apresentaram maior capacidade de hidrólise de ATP. Não foi observado hidrólise significativa de ADP e AMP. Ao agruparmos as linhagens com e sem atividade, foi possível verificar o aumento significativo da atividade de L. mali L.11 e L. acidophilus L.36 quando comparado às linhagens que apresentaram pouca atividade ectonucleotidasica. Além disso, as DCs foram estimuladas com os lactobacilos, por 20 horas e os resultados dessa estimulação demonstrou que as linhagens não alteraram. Além disso, as DCs foram estimuladas com Lactobacillus, por 20 horas e não demonstrou alteraração na expressão de CD40, CD86 e MHCII. Por fim observou-se a produção de citocinas após a estimulação por 20 horas. Houve um aumento de IL-6, TNF- α e IL-10 em relação às DCs não estimuladas. De maneira interessante, IL-12 teve a produção aumentada quando da estimulação de DC com L. mali L.10, que também mostrou baixa capacidade de hidrolisar ATP. Curiosamente, L. mali L.11 e L. acidophilus L.36 mostraram uma diminuição significativa da produção de IL-12, o que pode está relacionado com a alta capacidade de hidrólise dessas cepas. Conclui-se então que Lactobacillus possuem capacidade ectonucleotidásica diferenciada e que a hidrólise de ATP pode ser relacionada com a produção de citocinas por DCs e, consequentemente, com a diferenciação de linfócitos T durante a resposta imune intestinal.Probiotics are live microorganisms which, when administered properly, add health benefits to the host. Several species of the genus Lactobacillus have proven probiotic effect and are important modulators of the intestinal immune system. Probiotics stimulate dendritic cells (DCs) to produce cytokines that T cells differentiate into Th1, Th2, Treg and Th17. The ectonucleotidases are enzymes that hydrolyze nucleotide diand triphosphates. These ectoenzymes are important for the modulation of intestinal immune response due to ATP hydrolysis, which when raised in the extracellular medium is considered an inflammatory molecule. On the other hand, the accumulation of adenosine by hydrolysis of ATP to AMP by 5'-nucleotidase, stimulates antiinflammatory response. The objective was to relate the ectonucleotidásica activity of different strains of Lactobacillus with the ability of DCs activation and cytokine production. Lactobacilli were incubated with ATP, ADP or AMP and hydrolysis levels were assessed by the release of inorganic phosphate (Pi). It has been shown that lactobacilli hydrolyze ATP differently, depending on the strain, and Lactobacillus acidophilus and Lactobacillus mali L.11 L.36 showed greater capacity for ATP hydrolysis. No significant hydrolysis of ADP and AMP was observed. When we group the strains with and without activity, we observed a significant increase in activity of L. acidophilus and L. mali L.11 L.36 compared to strains that showed little ectonucleotidasica activity. Furthermore, DCs were stimulated with lactobacilli for 20 hours and the results of stimulation showed that the strains do not change. Furthermore, DCs were stimulated with Lactobacillus for 20 hours and showed no alteraração expression of CD40, CD86 and MHCII. Finally the observed production of cytokines after stimulation for 20 hours. There was an increase in IL-6, TNF-α and IL- 10 compared to non-stimulated DCs. Interestingly, IL-12 production was increased when the stimulation of DC with L. mali l.10, which showed poor ability to hydrolyze ATP. Interestingly, L. acidophilus and L. mali L.11 L.36 showed a significant decrease of IL-12, which can associated with high hydrolysis capability of these strains. It is concluded that Lactobacillus ectonucleotidásica have different capabilities and the hydrolysis of ATP may be related cytokine production by DCs and therefore with the differentiation of T lymphocytes in the intestinal immune response.Afonso, Luís Carlos CroccoNeumann, ElisabethPereira, Hellem Crhistina Damazo2016-04-05T14:05:46Z2016-04-05T14:05:46Z2014info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfPEREIRA, Hellem Crhistina Damazo. Correlação entre capacidade ectonucleotidásica de isolados de Lactobacillus e a produção de citocinas por células dendríticas. 2014. 62 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) – Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2014.http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/6350Autorização concedida ao Repositório Institucional da UFOP pelo(a) autor(a) em 29/02/2016 com as seguintes condições: disponível sob Licença Creative Commons 4.0 que permite copiar, distribuir e transmitir o trabalho desde que sejam citados o autor e o licenciante. Não permite o uso para fins comerciais nem a adaptação.info:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da UFOPinstname:Universidade Federal de Ouro Preto (UFOP)instacron:UFOP2019-08-29T17:38:36Zoai:repositorio.ufop.br:123456789/6350Repositório InstitucionalPUBhttp://www.repositorio.ufop.br/oai/requestrepositorio@ufop.edu.bropendoar:32332019-08-29T17:38:36Repositório Institucional da UFOP - Universidade Federal de Ouro Preto (UFOP)false
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