Isolamento e caracterização de Bacillus e Lysinibacillus com potencial para controle de pragas agrícolas e insetos vetores

• Autor(a) principal: Ferreira, Antonia Débora Camila de Lima
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFPB
• Texto Completo: https://repositorio.ufpb.br/jspui/handle/123456789/29621
• topic: CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS; Bactérias entomopatogênicas; Controle biológico; Lepidoptera; Coleoptera; Diptera

Os insetos-praga são responsáveis por causarem sérios prejuízos econômicos e sociais a população, seja por danos à produção agrícola ou pela transmissão de doenças a pessoas e animais. As bactérias Bacillus thuringiensis (Bt) e Lisynibacillus sphaericus (Ls) são amplamente estudadas devido o potencial inseticida que apresenta a diferentes ordens. O objetivo desta pesquisa foi realizar a prospecção de novas cepas de B. thuringiensis e L. sphaericus com ação inseticida a pragas de importância agrícola e a vetores de doenças. 159 amostras de solo foram processadas e originaram 125 isolados que foram armazenados no Coleção de Bactérias de Invertebrados da Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. Estes isolados foram avaliados quanto a sua toxicidade a insetos da ordem Lepidoptera (Spodoptera frugiperda, Helicoverpa armigera e Anticarsia gemmatalis), Coleoptera (Anthonomus grandis) e Diptera (Aedes aegypti e Culex quinquefasciastus). As estirpes mais patogênicas foram selecionadas e caracterizadas morfologicamente por microscopia eletrônica de varredura (MEV) e pelo perfil proteico e molecular. Após realização dos bioensaios, foi possível selecionar pelos menos uma estirpe com alta atividade inseticida para cada uma das seis espécies de insetos testados. Entre as estirpes selecionadas, estão S2728 e S2744 que apresentaram atividade inseticida para Spodoptera frugiperda e Anthonomus grandis e inclusões cristalinas evidenciadas por MEV. A análise de genes clássicos para Bt, via reação em cadeia da polimerase (PCR), não apresentou nenhuma amplificação, sugerindo que outros fatores poderiam estar associados a toxicidade dessas estirpes. Com o sequênciamento do genoma dessas bactérias verificou-se que as mesmas pertencem ao complexo do grupo B. cereus lato sensu, sem revelar com exatidão as suas espécies. A análise das sequências por BLASTn dos ORFs mostrou a presença de um gene responsável por codificar uma proteína do grupo de Proteínas Indutoras de Necrose e etileno (NEP Like Proteins - NLP). Este estudo também contribiu para o enriquecimento da Coleção de Batérias de Invertebrados, incluindo em seu acervo dois importantes recursos genéticos que poderão ter suas outras características exploradas além de seus potenciais inseticidas.