Produção de hidrogel contendo óleo essencial de coriandrum sativum L. (coentro) com efeito sobre candida albicans envolvida com infecções da cavidade bucal

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Barbosa, David Henrique Xavier
Data de Publicação: 2023
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPB
Texto Completo: https://repositorio.ufpb.br/jspui/handle/123456789/27022
Resumo: Objetivo: Produzir um hidrogel contendo óleo essencial (OE) de C. sativum L. e avaliar o efeito antifúngico sobre Candida spp. envolvidas com infecções da cavidade bucal, bem como, verificar o perfil toxicológico deste produto. Métodos: A composição química do OE de C. sativum L. foi identificada por Cromatografia Gasosa Acoplada ao Espectrômetro de Massas, além disso, verificou-se a incorporação do OE ao hidrogel por Espectroscopia no Infravermelho por transformada de Fourier. Já no tocante aos ensaios in vitro, avaliou-se a atividade antifúngica do hidrogel contendo OE por meio do teste de susceptibilidade fúngica, bem como verificou-se a capacidade do OE em reduzir a atividade metabólica de biofilme multiespécie bucal. Também avaliou-se a interferência do óleo essencial de C. sativum L. sobre a micromorfologia fúngica. Em relação ao perfil toxicológico do OE, realizou-se o teste de citotoxicidade em eritrocitos humanos provenientes de sangue periférico humano e citotoxicidade em queratinócitos da linhagem HaCaT pelo método MTT. No que concerne aos ensaios in vivo, realizou-se a avaliação de genotoxicidade em teste de eritrocitos micronucleados de sangue periférico de camundongos e avaliação da toxicidade em mucosa oral ceratinizada de ratos. Resultados: Os componentes majoritários característicos deste OE foram descritos, tais como: 2-decen-1-ol (22.42%), dec-(2E)- enal (19.31%) e 1,6-octadien-3-ol (13.41%). Além disso, notou-se a incorporação sugerida por perpetuação de bandas do OE e interação do OE com moléculas do hidrogel com mudança de intensidade de bandas. No que se refere aos ensaios in vitro, o hidrogel em concentração de 20 mg/mL foi capaz de formar halo de inibição acima de 28mm. Este OE na concentração de 1600 μg/mL também apresentou capacidade de reduzir a atividade metabólica de biofilme multiespécie bucal em 37% (p<0.0001). Outrossim, o OE em concentrações referentes à Concentração Inibitória Mínima (CIM) (62.5 μg/mL) e CIMx2 (125 μg/mL) foi capaz de reduzir a frequência de pseudo-hifas e modificar a estrutura de blastoconidios. Acerca da toxicidade relativa à atividade hemolítica do OE apontou-se uma CH50 superior a CIMx4 (250 μg/mL). Ademais, o OE em concentrações de 150 e 300 μg/mL causa inibição da viabilidade celular de queratinócitos e sua ICso foi de 60.13 ± 2.02 μg/mL. No que toca à genotoxicidade, o tratamento em dose única de 20 mg/mL (5 mg/kg) de OE de C. sativum L. não estimulou o aumento do número de micronúcleos (16.40 ± 1.1). Por fim, a formulação se mostrou segura para uso em mucosa ceratinizada de ratos em concentração de 20 mg/mL. Conclusões: O OE de C. sativum L. apresentou constituintes químicos característicos e foi incorporado ao hidrogel com sucesso, apresentou atividade antifúngica vista em halo de inibição e alterações morfológicas em Candida albicans, além de reduzir a atividade metabólica de biofilme multiespécie bucal. Ademais, se demonstrou citotóxico para eritrocitos humanos, contudo foi tolerável para células de queratinócitos HaCaT e não foi genotóxico em teste com camundongos, bem como, é seguro para uso em mucosa oral ceratinizada de ratos. Esses resultados viabilizarão a realização de um ensaio clínico de fase I e II com o propósito de disponibilizar essa opção terapêutica no tratamento de infecções fúngicas.
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Em relação ao perfil toxicológico do OE, realizou-se o teste de citotoxicidade em eritrocitos humanos provenientes de sangue periférico humano e citotoxicidade em queratinócitos da linhagem HaCaT pelo método MTT. No que concerne aos ensaios in vivo, realizou-se a avaliação de genotoxicidade em teste de eritrocitos micronucleados de sangue periférico de camundongos e avaliação da toxicidade em mucosa oral ceratinizada de ratos. Resultados: Os componentes majoritários característicos deste OE foram descritos, tais como: 2-decen-1-ol (22.42%), dec-(2E)- enal (19.31%) e 1,6-octadien-3-ol (13.41%). Além disso, notou-se a incorporação sugerida por perpetuação de bandas do OE e interação do OE com moléculas do hidrogel com mudança de intensidade de bandas. No que se refere aos ensaios in vitro, o hidrogel em concentração de 20 mg/mL foi capaz de formar halo de inibição acima de 28mm. Este OE na concentração de 1600 μg/mL também apresentou capacidade de reduzir a atividade metabólica de biofilme multiespécie bucal em 37% (p<0.0001). Outrossim, o OE em concentrações referentes à Concentração Inibitória Mínima (CIM) (62.5 μg/mL) e CIMx2 (125 μg/mL) foi capaz de reduzir a frequência de pseudo-hifas e modificar a estrutura de blastoconidios. Acerca da toxicidade relativa à atividade hemolítica do OE apontou-se uma CH50 superior a CIMx4 (250 μg/mL). Ademais, o OE em concentrações de 150 e 300 μg/mL causa inibição da viabilidade celular de queratinócitos e sua ICso foi de 60.13 ± 2.02 μg/mL. No que toca à genotoxicidade, o tratamento em dose única de 20 mg/mL (5 mg/kg) de OE de C. sativum L. não estimulou o aumento do número de micronúcleos (16.40 ± 1.1). Por fim, a formulação se mostrou segura para uso em mucosa ceratinizada de ratos em concentração de 20 mg/mL. Conclusões: O OE de C. sativum L. apresentou constituintes químicos característicos e foi incorporado ao hidrogel com sucesso, apresentou atividade antifúngica vista em halo de inibição e alterações morfológicas em Candida albicans, além de reduzir a atividade metabólica de biofilme multiespécie bucal. Ademais, se demonstrou citotóxico para eritrocitos humanos, contudo foi tolerável para células de queratinócitos HaCaT e não foi genotóxico em teste com camundongos, bem como, é seguro para uso em mucosa oral ceratinizada de ratos. Esses resultados viabilizarão a realização de um ensaio clínico de fase I e II com o propósito de disponibilizar essa opção terapêutica no tratamento de infecções fúngicas.Objective: To produce a hydrogel containing essential oil (EO) from C. sativum L. and to evaluate the antifungal effect on Candida spp. involved with oral cavity infections, as well as verify the toxicological profile of this product. Methods: The chemical composition of the EO of C. sativum L. was identified by Gas Chromatography Coupled to the Mass Spectrometer, in addition, the incorporation of the EO to the hydrogel was verified by Infrared Spectroscopy by Fourier transform. Regarding the in vitro assays, the antifungal activity of the hydrogel containing EO was evaluated through the fungal susceptibility test, as well as the ability of the EO to reduce the metabolic activity of the buccal multispecies biofilm. The interference of the essential oil of C. sativum L. on the fungal micromorphology was also evaluated. Regarding the toxicological profile of the EO, the cytotoxicity test was carried out in human erythrocytes from human peripheral blood and cytotoxicity in keratinocytes of the HaCaT lineage by the MTT method. With regard to in vivo assays, an evaluation of genotoxicity was carried out in a test of micronucleated erythrocytes from peripheral blood of mice and an evaluation of toxicity in keratinized oral mucosa of rats. Results: The major components characteristic of this EO were described, such as: 2-decen-1-ol (22.42%), dec-(2E)-enal (19.31%) and 1,6-octadien-3-ol (13.41% ). In addition, the incorporation suggested by perpetuation of EO bands and interaction of EO with hydrogel molecules with change in band intensity was noted. With regard to in vitro assays, the hydrogel at a concentration of 20 mg/mL was able to form an inhibition halo above 28 mm. This EO at a concentration of 1600 μg/mL also showed the ability to reduce the metabolic activity of oral multispecies biofilm by 37% (p<0.0001). Furthermore, EO at concentrations related to Minimum Inhibitory Concentration (MIC) (62.5 μg/mL) and MICx2 (125 μg/mL) was able to reduce the frequency of pseudohyphae and modify the structure of blastoconidia. Regarding the toxicity related to the hemolytic activity of the EO, a CH50 higher than MICx4 (250 μg/mL) was pointed out. Furthermore, EO at concentrations of 150 and 300 μg/mL causes inhibition of keratinocyte cell viability and its IC50 was 60.13 ± 2.02 μg/mL. With regard to genotoxicity, treatment with a single dose of 20 mg/mL (5 mg/kg) of EO of C. sativum L. did not stimulate an increase in the number of micronuclei (16.40 ± 1.1). Finally, the formulation proved to be safe for use in keratinized mucosa of rats at a concentration of 20 mg/mL. Conclusions: The EO from C. sativum L. showed characteristic chemical constituents and was successfully incorporated into the hydrogel, showed antifungal activity seen in an inhibition halo and morphological changes in Candida albicans, in addition to reducing the metabolic activity of an oral multispecies biofilm. Furthermore, it was shown to be cytotoxic for human erythrocytes, however it was tolerable for HaCaT keratinocyte cells and was not genotoxic in a test with mice, as well as it is safe for use in keratinized oral mucosa of rats. These results will make it possible to carry out a phase I and II clinical trial with the purpose of making this therapeutic option available in the treatment of fungal infections.Submitted by Fernando Augusto Alves Vieira (fernandovieira@biblioteca.ufpb.br) on 2023-05-24T10:44:07Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 805 bytes, checksum: c4c98de35c20c53220c07884f4def27c (MD5) DavidHenriqueXavierBarbosa_Dissert.pdf: 61929162 bytes, checksum: b10d65e280f5e6276c0d55f278cb59e8 (MD5)Made available in DSpace on 2023-05-24T10:44:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 805 bytes, checksum: c4c98de35c20c53220c07884f4def27c (MD5) DavidHenriqueXavierBarbosa_Dissert.pdf: 61929162 bytes, checksum: b10d65e280f5e6276c0d55f278cb59e8 (MD5) Previous issue date: 2023-02-23Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESFundação de Apoio à Pesquisa do Estado da Paraíba - FAPESQporUniversidade Federal da ParaíbaPrograma de Pós-Graduação em Produtos Naturais e Sintéticos BioativosUFPBBrasilFarmacologiaAttribution-NoDerivs 3.0 Brazilhttp://creativecommons.org/licenses/by-nd/3.0/br/info:eu-repo/semantics/embargoedAccessCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::FARMACOLOGIACandidíase bucalAntifúngicos - OralFarmacologiaToxicologiaCoriandrumOral candidiasisAntifungals - OralPharmacologyToxicologyProdução de hidrogel contendo óleo essencial de coriandrum sativum L. (coentro) com efeito sobre candida albicans envolvida com infecções da cavidade bucalinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisCastro, Ricardo Dias dehttp://lattes.cnpq.br/003152946904600310662851447http://lattes.cnpq.br/6885052391741777Barbosa, David Henrique Xavierreponame:Repositório Institucional da UFPBinstname:Universidade Federal da Paraíba (UFPB)instacron:UFPBTEXTDavidHenriqueXavierBarbosa_Dissert.pdf.txtDavidHenriqueXavierBarbosa_Dissert.pdf.txtExtracted texttext/plain95https://repositorio.ufpb.br/jspui/bitstream/123456789/27022/4/DavidHenriqueXavierBarbosa_Dissert.pdf.txt43a462bb883b95b3dc69083893c1def1MD54LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82390https://repositorio.ufpb.br/jspui/bitstream/123456789/27022/3/license.txte20ac18e101915e6935b82a641b985c0MD53CC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-8805https://repositorio.ufpb.br/jspui/bitstream/123456789/27022/2/license_rdfc4c98de35c20c53220c07884f4def27cMD52ORIGINALDavidHenriqueXavierBarbosa_Dissert.pdfDavidHenriqueXavierBarbosa_Dissert.pdfapplication/pdf61929162https://repositorio.ufpb.br/jspui/bitstream/123456789/27022/1/DavidHenriqueXavierBarbosa_Dissert.pdfb10d65e280f5e6276c0d55f278cb59e8MD51123456789/270222023-05-25 03:08:06.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Repositório InstitucionalPUB
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Barbosa, David Henrique Xavier
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