Investigação Fitoquímica de extrato bruto e frações das folhas de Eugenia uniflora L. (Pitangueira)

• Autor(a) principal: BEZERRA, Isabelle Cristinne Ferraz
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFPE
• Texto Completo: https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/26912
• topic: Plantas medicinais; Pitangueira; Espectrofotometria

Eugenia uniflora L. (Myrtaceae), conhecida como pitangueira, é uma espécie nativa do Brasil, de importância econômica e terapêutica devido ao seu emprego como alimento e na medicina popular. Considerando as propriedades biológicas, diversas atividades são relatadas para E. uniflora entre as quais: antibacteriana, antifúngica, antidiarreica, hipoglicêmicas e antitumorais. A partir de 2009, a espécie foi inclusa na Relação Nacional de Plantas Medicinais de Interesse para o SUS (RENISUS), visando incentivar estudos relativos ao desenvolvimento biológico, analítico e tecnológico da espécie. Neste contexto, relatos acerca de investigações analíticas e tecnológicas para farmacógenos de E. uniflora são escassos. Portanto, o propósito deste trabalho foi o desenvolvimento e avaliação de ferramentas analíticas para a caracterização química de extratos e frações de E. uniflora. Assim, o monitoramento dos metabólitos da espécie foi empregado para o estabelecimento de especificações de qualidade para droga vegetal e avaliação de operações de transformação. As folhas secas e trituradas de pitangueira foram empregadas como material vegetal e caracterizadas de acordo com os Métodos Gerais em Farmacognosia da Farmacopeia Brasileira 5 ed. (2010). Para análise quantitativa de flavonoides e taninos na droga vegetal e extrato bruto foram avaliadas metodologias espectrofotométricas (UV/Vis) usando os reagentes AlCl₃ e Folin Ciocalteau para aumento de seletividade. A cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) acoplada a detector de arranjo de fotodo diodos também foi utilizada para análises quantitativas; as análises qualitativas foram conduzidas por CCD/CCDAE e CLAE. Além disso, um fracionamento preliminar das substâncias presentes nas folhas de pitanga foi executado através de sucessivas cromatografias de coluna aberta, utilizando gel de sílica como fase estacionária e posteriormente CCD preparativa para a obtenção das substâncias desejadas. Os procedimentos espectrofotométricos avaliados atendem as exigências preconizadas pela RE 899/2003, apresentando especificidade/seletividade para os marcadores eleitos, comportamento linear (R2 > 0,99); nos ensaios de repetitividade e precisão dentro dos limites determinados pela legislação (< 5%) onde foram encontrados teores médios de flavonoides de 1,82% (matéria prima – MP) e 4,90% (Extrato bruto – EB) na metodologia por doseamento direto, e 1,72% (MP) e 3,90 (EB) na metodologia após hidrólise ácida; no caso de taninos totais os teores médios encontrados foram de 10,12% (MP) e 21,11 (EB). No parâmetro exatidão, os resultados obtidos encontram-se de acordo com o preconizado pela RE899 (80-120%) para as três metodologias (faixa de recuperação de 92 a 107%); além de estabilidade às variações intencionais avaliadas na robustez (tempo de reação, reagentes e solventes). A metodologia por CLAE para a quantificação ácido gálico e ácido elágico e dos flavonoides presentes na matriz, também atendeu aos requisitos preconizados pela legislação, oferecendo dados quantitativos mais específicos relativos às substâncias presentes nas amostras. O fracionamento permitiu a obtenção de frações contendo os compostos de interesse, e através da CCD preparativa foi possível obter uma fração semi-purificada contendo duas substâncias flavonoídicas potenciais marcadoras da espécie. Adicionalmente, os perfis químicos (fingerprints) por CCD e CLAE permitiram identificar nas matrizes (droga, extratos e frações), bandas/picos relacionados a grupos de metabólitos promissores para apoiar a padronização química de produtos derivados das folhas de Eugenia uniflora.