Desenvolvimento de nanodispositivo imunossensor óptico e elétrico para detecção de biomarcadores da dengue
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Data de Publicação: | 2023 |
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Resumo: | A dengue (DENV) é atualmente o arbovírus mais prevalente no mundo, causando preocupações devido à recorrência da doença, ao aumento das taxas de mortalidade e à gravidade dos sintomas. Os imunossensores eletroquímicos oferecem uma abordagem inovadora para identificar analitos clinicamente relevantes e associar componentes específicos de bioreconhecimento a nanopartículas para aumentar a sensibilidade do sistema. Neste estudo, foi desenvolvido e caracterizado um imunossensor óptico e elétrico para a detecção de antígenos do Dengue, empregando pontos quânticos de telureto de cádmio (CdTe). O imunossensor foi construído em uma superfície de eletrodo de ouro depositando uma monocamada de cisteína, seguida da adsorção física de pontos quânticos de CdTe funcionalizados com radicais carboxílicos e subsequente imobilização de um anticorpo específico do DENV. O imunossensor desenvolvido foi caracterizado usando várias técnicas, incluindo Voltametria Cíclica (CV), Espectroscopia de Impedância Eletroquímica (EIS), Ressonância Plasmônica de Superfície (SPR), Microscopia de Força Atômica (AFM) e Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR). Diferentes concentrações de antígenos do DENV-1 e DENV-2 (1:50, 1:40, 1:30, 1:20 e 1:10) foram detectadas usando CV e EIS, resultando em valores de ∆I% de 72% para o DENV-1 e 24% para o DENV-2. Ambas as estratégias mostraram uma resposta linear em proporção ao aumento na concentração do biomarcador. Excelentes correlações lineares foram obtidas em uma ampla faixa de concentração. O grau de revestimento da superfície apresentou uma correlação mais forte com o DENV-1 (90%). A caracterização por AFM revelou alturas de pico mais elevadas quando a plataforma foi testada com amostras de DENV-1 (131 nm), confirmando a formação do complexo antígeno-anticorpo. Além disso, o SPR exibiu deslocamentos angulares correspondentes para cada componente, confirmando a funcionalização bem- sucedida da camada de detecção e alinhando-se com os resultados eletroquímicos. A plataforma do sensor Cys-CdTe-IgGDENV mostrou uma melhor resposta ao DENV- 1, obtendo um baixo limite de detecção (6.73 UFP/mL) destacando sua eficácia na pesquisa do analito-alvo e emergindo como uma alternativa promissora para a identificação de biomarcadores da dengue. |
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Neste estudo, foi desenvolvido e caracterizado um imunossensor óptico e elétrico para a detecção de antígenos do Dengue, empregando pontos quânticos de telureto de cádmio (CdTe). O imunossensor foi construído em uma superfície de eletrodo de ouro depositando uma monocamada de cisteína, seguida da adsorção física de pontos quânticos de CdTe funcionalizados com radicais carboxílicos e subsequente imobilização de um anticorpo específico do DENV. O imunossensor desenvolvido foi caracterizado usando várias técnicas, incluindo Voltametria Cíclica (CV), Espectroscopia de Impedância Eletroquímica (EIS), Ressonância Plasmônica de Superfície (SPR), Microscopia de Força Atômica (AFM) e Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR). Diferentes concentrações de antígenos do DENV-1 e DENV-2 (1:50, 1:40, 1:30, 1:20 e 1:10) foram detectadas usando CV e EIS, resultando em valores de ∆I% de 72% para o DENV-1 e 24% para o DENV-2. Ambas as estratégias mostraram uma resposta linear em proporção ao aumento na concentração do biomarcador. Excelentes correlações lineares foram obtidas em uma ampla faixa de concentração. O grau de revestimento da superfície apresentou uma correlação mais forte com o DENV-1 (90%). A caracterização por AFM revelou alturas de pico mais elevadas quando a plataforma foi testada com amostras de DENV-1 (131 nm), confirmando a formação do complexo antígeno-anticorpo. Além disso, o SPR exibiu deslocamentos angulares correspondentes para cada componente, confirmando a funcionalização bem- sucedida da camada de detecção e alinhando-se com os resultados eletroquímicos. A plataforma do sensor Cys-CdTe-IgGDENV mostrou uma melhor resposta ao DENV- 1, obtendo um baixo limite de detecção (6.73 UFP/mL) destacando sua eficácia na pesquisa do analito-alvo e emergindo como uma alternativa promissora para a identificação de biomarcadores da dengue.Dengue (DENV) is currently the most prevalent arbovirus globally, posing concerns due to disease recurrence, increased mortality rates, and symptom severity. Electrochemical immunosensors offer an innovative approach to identifying clinically relevant analytes and associate specific biorecognition components with nanoparticles to boost system sensitivity. In this study, an optical and electrical immunosensor for Dengue antigen detection employing Cadmium Telluride quantum dots (CdTe) was developed and characterized. The biosensor was constructed on a gold electrode surface by depositing a cysteine monolayer, followed by the physical adsorption of CdTe quantum dots functionalized with carboxylic radicals and subsequent immobilization of a specific DENV antibody. The developed immunosensor was characterized using various techniques, including Cyclic Voltammetry (CV), Electrochemical Impedance Spectroscopy (EIS), Surface Plasmon Resonance (SPR), Atomic Force Microscopy (AFM), and Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR). Different concentrations of DENV-1 and DENV-2 antigens (1:50, 1:40, 1:30, 1:20, and 1:10) were detected using CV and EIS, resulting in ∆I% values of 72% for DENV-1 and 24% for DENV-2, both strategies exhibited a linear response in proportion to the increase in biomarker concentration. Excellent linear correlations were obtained across a broad concentration range. The degree of surface coating exhibited a stronger correlation with DENV-1 (90%). AFM characterization revealed higher peak heights when the platform was tested with DENV-1 samples (131 nm), confirming the formation of the antigen-antibody complex. Additionally, SPR displayed corresponding angular shifts for each component, confirming the successful functionalization of the detection layer and aligning with the electrochemical findings. The Cys-CdTe-IgGDENV sensor platform showed a better response to DENV-1, as a low limit of detection was achieved (6.73 UFP/mL) underscoring its effectiveness in detecting the target analyte and emerging as a promising alternative for Dengue biomarker identification.porUniversidade Federal de PernambucoPrograma de Pos Graduacao em Inovacao TerapeuticaUFPEBrasilAttribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazilhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/info:eu-repo/semantics/embargoedAccessBiosenssorDengueEletroquímicaPontos quânticosRessonância plasmônica de superfícieDesenvolvimento de nanodispositivo imunossensor óptico e elétrico para detecção de biomarcadores da dengueinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesismestradoreponame:Repositório Institucional da UFPEinstname:Universidade Federal de Pernambuco (UFPE)instacron:UFPEORIGINALDISSERTAÇÃO Milena Tereza Torres do Couto.pdfDISSERTAÇÃO Milena Tereza Torres do Couto.pdfapplication/pdf1639417https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/55173/1/DISSERTA%c3%87%c3%83O%20%20Milena%20Tereza%20Torres%20do%20Couto.pdfd93e2392df605ac667a382e2e52db010MD51CC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; 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