Desenvolvimento e validação de metodologias analíticas para a avaliação da qualidade de matérias-primas e microemulsões com atividade leishmanicida
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Data de Publicação: | 2014 |
Tipo de documento: | Tese |
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Título da fonte: | Repositório Institucional da UFPE |
Texto Completo: | https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/14234 |
Resumo: | A leishmaniose é uma das doenças tropicais mais negligenciadas em termos de desenvolvimentos e descoberta de novos medicamentos. Neste sentido, a busca por novas moléculas, incorporação de fármacos em sistemas de liberação, o uso da terapia combinada e de tratamentos alternativos leishmanicidas é imprescindível. Esta pesquisa teve como objetivo desenvolver metodologias analíticas para a avaliação de qualidade de matérias-primas e formulações com atividade leishmanicida. Uma nova molécula de derivado naftoquinônico, análogo da beta-lapachona (HBL), com potente atividade antileishmania, foi caracterizada por termogravimetria (TG), calorimetria exploratória diferencial (DSC), dissolução intrínseca e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Óleos essenciais obtidos a partir das espécies Cymbopogon citratus e Cymbopogon nardus foram caracterizados e identificados utilizando a cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa (CG-EM). Microemulsões foram preparadas contendo os óleos essenciais de C. citratus (ME-citratus) e C. nardus (ME-nardus). Métodos analíticos de quantificação dos óleos essenciais e microemulsões, com base no teor dos marcadores citral e citronelal, foram desenvolvidos e validados utilizando a cromatografia gasosa com detector de chama (CG-DIC). Os óleos essenciais e as microemulsões obtidas foram avaliados quanto à atividade leishmanicida frente às formas promastigotas de Leishmania chagasi. O ensaio de citotoxicidade dos óleos livres e incorporados nas microemulsões foi realizado frente às células 3T3 (fibroblastos de murinos Swiss albinos). Os sistemas microemulsionados foram caracterizadas através da determinação do pH, tamanho de partícula, índice de polidispersão (IDP), potencial zeta, condutividade, doseamento e cinética de liberação. Na caracterização das moléculas sintéticas HBL, os dados TG e DSC mostraram diferenças de comportamento térmico entre as amostras, permitindo classificar lotes de HBL em três grupos com estabilidade física e térmica diferentes. Os dados cromatográficos e de dissolução intrínseca evidenciaram características distintas de pureza e solubilidade entre os lotes de HBL. A identificação e padronização dos óleos por CG-EM revelou como constituintes majoritários o citral (66,22%) para o C. citratus e o citronelal (37,98%) para o C. nardus. Os métodos analíticos desenvolvidos apresentaram linearidade na faixa de concentração 89,30 a 714,40 μg/mL para o citral e 85,50 a 342,00 μg/mL para o citronelal. As metodologias apresentaram precisão, exatidão, selerividade e robustez. As microemulsões (ME) apresentaram pH compatíveis com a administração tópica, tamanho de partícula em escala nanométrica, índice de polidispersão IDP < 0,3, potencial zeta negativo, condutividade condizente com sistemas O/A e cinética de liberação, utilizando as células de Franz, de ordem zero. Os dados DSC cooling caracterizaram as ME como O/A. O doseamento dos óleos essenciais nas ME foi de 29,58 mg/mL de citral para ME-citratus e de 19,73 mg/mL do citronelal para MEnardus. Os óleos C. citratus e C. nardus apresentaram importante atividade leishmanicida para a L. chagasi com CE50 de 26,12 μg/mL para o C. citratus e 16,92 μg/mL para o C. nardus. Sendo esta atividade potencializada para a ME-citratus e MEnardus. Os óleos e ME não apresentaram citotoxicidade para as células 3T3. O estudo da molécula HBL permitiu observar a dificuldade na síntese de uma molécula promissora tendo em vista ao desenvolvimento tecnológico da matéria-prima. As técnicas analíticas evidenciaram as ME-citratus e ME-nardus como sistemas de liberação promissores para o tratamento tópico da leishmaniose. |
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PIRES, Elisana Afonso de MouraMACEDO, Rui Oliveira2015-10-21T18:50:07Z2015-10-21T18:50:07Z2014-03-19https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/14234A leishmaniose é uma das doenças tropicais mais negligenciadas em termos de desenvolvimentos e descoberta de novos medicamentos. Neste sentido, a busca por novas moléculas, incorporação de fármacos em sistemas de liberação, o uso da terapia combinada e de tratamentos alternativos leishmanicidas é imprescindível. Esta pesquisa teve como objetivo desenvolver metodologias analíticas para a avaliação de qualidade de matérias-primas e formulações com atividade leishmanicida. Uma nova molécula de derivado naftoquinônico, análogo da beta-lapachona (HBL), com potente atividade antileishmania, foi caracterizada por termogravimetria (TG), calorimetria exploratória diferencial (DSC), dissolução intrínseca e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Óleos essenciais obtidos a partir das espécies Cymbopogon citratus e Cymbopogon nardus foram caracterizados e identificados utilizando a cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa (CG-EM). Microemulsões foram preparadas contendo os óleos essenciais de C. citratus (ME-citratus) e C. nardus (ME-nardus). Métodos analíticos de quantificação dos óleos essenciais e microemulsões, com base no teor dos marcadores citral e citronelal, foram desenvolvidos e validados utilizando a cromatografia gasosa com detector de chama (CG-DIC). Os óleos essenciais e as microemulsões obtidas foram avaliados quanto à atividade leishmanicida frente às formas promastigotas de Leishmania chagasi. O ensaio de citotoxicidade dos óleos livres e incorporados nas microemulsões foi realizado frente às células 3T3 (fibroblastos de murinos Swiss albinos). Os sistemas microemulsionados foram caracterizadas através da determinação do pH, tamanho de partícula, índice de polidispersão (IDP), potencial zeta, condutividade, doseamento e cinética de liberação. Na caracterização das moléculas sintéticas HBL, os dados TG e DSC mostraram diferenças de comportamento térmico entre as amostras, permitindo classificar lotes de HBL em três grupos com estabilidade física e térmica diferentes. Os dados cromatográficos e de dissolução intrínseca evidenciaram características distintas de pureza e solubilidade entre os lotes de HBL. A identificação e padronização dos óleos por CG-EM revelou como constituintes majoritários o citral (66,22%) para o C. citratus e o citronelal (37,98%) para o C. nardus. Os métodos analíticos desenvolvidos apresentaram linearidade na faixa de concentração 89,30 a 714,40 μg/mL para o citral e 85,50 a 342,00 μg/mL para o citronelal. As metodologias apresentaram precisão, exatidão, selerividade e robustez. As microemulsões (ME) apresentaram pH compatíveis com a administração tópica, tamanho de partícula em escala nanométrica, índice de polidispersão IDP < 0,3, potencial zeta negativo, condutividade condizente com sistemas O/A e cinética de liberação, utilizando as células de Franz, de ordem zero. Os dados DSC cooling caracterizaram as ME como O/A. O doseamento dos óleos essenciais nas ME foi de 29,58 mg/mL de citral para ME-citratus e de 19,73 mg/mL do citronelal para MEnardus. Os óleos C. citratus e C. nardus apresentaram importante atividade leishmanicida para a L. chagasi com CE50 de 26,12 μg/mL para o C. citratus e 16,92 μg/mL para o C. nardus. Sendo esta atividade potencializada para a ME-citratus e MEnardus. Os óleos e ME não apresentaram citotoxicidade para as células 3T3. O estudo da molécula HBL permitiu observar a dificuldade na síntese de uma molécula promissora tendo em vista ao desenvolvimento tecnológico da matéria-prima. As técnicas analíticas evidenciaram as ME-citratus e ME-nardus como sistemas de liberação promissores para o tratamento tópico da leishmaniose.CNPqporAttribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazilhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/info:eu-repo/semantics/openAccessControle de qualidadeFormulação farmacêuticaMicroemulsãoLeishmanioseDesenvolvimento e validação de metodologias analíticas para a avaliação da qualidade de matérias-primas e microemulsões com atividade leishmanicidainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisreponame:Repositório Institucional da UFPEinstname:Universidade Federal de Pernambuco (UFPE)instacron:UFPETHUMBNAILTese Versu00E3o Biblioteca -CD.pdf.jpgTese Versu00E3o Biblioteca -CD.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1281https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/14234/5/Tese%20Versu00E3o%20Biblioteca%20-CD.pdf.jpg0a00bcf60fab1c180d4a2d4cb0a1f2bcMD55ORIGINALTese Versu00E3o Biblioteca -CD.pdfTese Versu00E3o Biblioteca -CD.pdfapplication/pdf1766620https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/14234/1/Tese%20Versu00E3o%20Biblioteca%20-CD.pdf7e106e8cf3f587ef9230a50116a2b07fMD51CC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; 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