Purificação e caracterização de lectinas e inibidor de tripsina presentes em tecidos de Myracrodruon urundeuva e Schinus terebinthifolius: ação antimicrobiana de preparações

• Autor(a) principal: Gomes, Francis Soares
• Data de Publicação: 2013
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFPE
• dARK ID: ark:/64986/00130000030br
• Texto Completo: https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/13263
• topic: Aderência; Atividade antimicrobiana; Capacidade invasiva; Inibidor de tripsina; Lectina; Myracrodruon urundeuva; Schinus terebinthifolius

Schinus terebinthifolius (aroeira-da-praia) e Myracrodruon urundeuva (aroeira-dosertão) são plantas utilizadas na medicina popular para tratamento de doenças humanas causadas por microorganismos. Este trabalho relata 1) o isolamento e caracterização estrutural das lectinas isoladas de folha (SteLL) e entrecasca (SteBL) de S. terebinthifolius e do inibidor de tripsina isolado de entrecasca de S. terebinthifolius (SteBI) e 2) a investigação da atividade antimicrobiana de infusão e extrato metanólico de entrecasca de S. terebinthifolius, de SteLL, SteBL, SteBI e de lectinas de entrecasca (MuBL), folha (MuLL) e cerne (MuHL) de M. urundeuva isoladas de acordo com procedimentos previamente estabelecidos. Bactérias e fungo que causam doenças em humanos e em peixes foram utilizados nos ensaios e os valores de concentrações mínima inibitória (CMI), bactericida (CMB) e fungicida (CMF) foram determinados. Adicionalmente foi avaliado o efeito das lectinas de M. urundeuva na aderência e capacidade invasiva de bactérias em células de peixe (SAF-1) e humanas (HeLa) bem como na produção de produtos extracelulares por bactérias. SteLL, isolada após eluição da coluna de quitina com ácido acético 1 M, é um glicopeptídeo de 14 kDa com atividade hemaglutinante (AH) inibida por N-acetilglicosamina, não afetada por Ca2+ e Mg2+, estável entre 30 e 100 °C e pH 5,0-8,0. SteBL, isolada após eluição da coluna de quitina com ácido acético 1 M, é um peptídeo não-glicosilado de 20 kDa, com maior AH em pH 7,5 e inibida por N-acetilglicosamina e fetuína. SteBI, isolado durante o mesmo procedimento cromatográfico que isolou SteBL, representando a fração protéica ao suporte cromatográfico, é um peptídeo de 16 kDa que inibiu em 89,5% a atividade de tripsina bovina. SteLL apresentou atividade antibacteriana contra Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enteritidis e Staphylococcus aureus. Maiores efeitos bacteriostáticos e bactericidas foram detectadas para S. enteritidis (CMI: 0,45 μg/ml) e S. aureus (CMB: 7,18 μg/ml), respectivamente. SteLL inibiu o crescimento (CMI: 6,5 μg/ml) e matou (CMF: 26 μg/ml) Candida albicans. SteBL mostrou atividade bacteriostática contra E. coli, S. aureus, Enterococcus faecalis (CMI: 200 μg/ml), atividade bactericida contra S. aureus (CMB: 400 μg/ml) e não apresentou atividade antifúngica contra C. albicans. SteBI não apresentou atividade antibacteriana e foi fungicida (CMF: 7,5 μg/ml) contra C. albicans. MuBL, MuHL e MuLL apresentaram atividade bacteriostática e bactericida contra S. aureus, E. coli e Photobacterium damselae subsp. piscicida (CMI e CMB de 1 a 122 e 2 a 225 μg/ml, respectivamente) e bacteriostática contra linhagens de Yersinia ruckeri (CMI entre 34 a 489,8 μg/ml). A infusão da entrecasca de S. terebinthifolius foi bactericida contra S. aureus, E. faecalis e E. coli (CMB de 14,85 a 29,7 mg/mL de proteínas e 0,026 a 0,052 mg/mL de fenóis) e fungicida contra C. albicans (CMF de 3,71 mg/mL de proteínas e 0,007 mg/mL de fenóis). Extrato metanólico mostrou atividade bactericida contra S. aureus e E. faecalis, com CMB de 13,19 e 3,29 mg/mL de proteínas e 4,1 e 1,02 mg/mL de fenóis, respectivamente e não contem atividade antifúngica. As lectinas de M. urundeuva promoveram redução na adesão e capacidade invasiva de S. aureus, E. coli, Y. ruckeri e P. damselae subsp. piscicida em SAF-1 e HeLa e alteração no padrão de produtos extracelulares liberados por S. aureus, E. coli, Y. ruckeri e P. damselae subsp. piscicida. O estudo demonstrou a purificação, caracterização e propriedades biológicas de lectinas ligadoras de quitina e inibidor de tripsina presentes em tecidos de S. terebinthifolius e M. urundeuva. Adicionalmente o estudo confirmou a ação antimicrobiana da infusão da entrecasca de S. terebinthifolius usada pela população para tratar infecções.