Expressão da quimera constituída pela ROP2 de Neospora caninum e a OprI de Pseudomonas aeruginosa para utilização como insumo imunobiológico no controle da neosporose

• Autor(a) principal: Rosa, Matheus Costa da
• Data de Publicação: 2015
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFPel - Guaiaca
• Texto Completo: http://repositorio.ufpel.edu.br/handle/prefix/3422
• topic: CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA::PATOLOGIA ANIMAL; Veterinária; Neosporose; Vacina; OprI; ROP2; Neosporosis; Vaccine

Neospora caninum, agente etiológico da neosporose, é um dos principais responsáveis por abortos em rebanhos bovinos, causando prejuízos econômicos para a agropecuária. Sendo assim, métodos de controle e diagnóstico devem ser aplicados para reduzir a disseminação do patógeno em propriedades rurais. A vacinação dos rebanhos seria uma alternativa importante, no entanto a falta de vacinas eficazes impede a aplicação deste método de controle. Diversos estudos vêm sendo realizados com o intuito de se obter vacinas mais eficazes. Vacinas recombinantes utilizando proteínas heterólogas são as mais estudas. As proteínas presentes nas roptrias (ROPs), devido a sua importância na infecção celular, formação do vacúolo parasitófago e suas características antigênicas e imunogênicas, são excelentes candidatas a antígeno vacinal. A utilização de lipoproteínas bacterianas tem recebido uma atenção especial como molécula adjuvante carreadora devido às suas propriedades imunomoduladoras. A lipoproteína Oprl de Pseudomonas aeruginosa possui a capacidade de modular a resposta imune para uma via Th1. Esta capacidade imunomoduladora quando associada a diferentes antígenos pode modular a resposta mista entre as vias Th1 e Th2. O presente estudo teve como objetivo clonar e expressar a região da NcROP2, descrita entre os aminoácidos 191 e 359, fusionada a OprI, resultando na quimera rROP2/OprI em Escherichia coli e caracterizá-la quanto a sua antigenicidade através da técnica de Western blot. A proteína recombinante produzida em Escherichia coli Rosetta (DE3) PlysS, apresentou um tamanho esperado de 50kDa. Sendo purificada e caracterizada por anticorpos monoclonais anti-histidina e sua antigenicidade reconhecida por soro de animais naturalmente infectados por N. caninum. O reconhecimento da quimera rROP2/OprI por anticorpos anti-N. caninum, revela a existência de determinantes antigênicos comuns entre a proteína recombinante e a forma nativa, sugerindo o seu uso para o desenvolvimento de uma vacina recombinante.