Criopreservação do sêmen de Jundiá Amazônico (Leiarius marmoratus) e refrigeração de sêmen equino
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Data de Publicação: | 2019 |
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Título da fonte: | Repositório Institucional da UFPel - Guaiaca |
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Resumo: | Este estudo avaliou os efeitos da adição de goma xantana no diluente de resfriamento de sêmen equino e de dois protocolos distintos de criopreservação de sêmen de peixes Leiarius marmoratus, sobre parâmetros de qualidade espermática analisados in vitro. No experimento realizado nas amostras de sêmen da espécie equina, (n=20) armazenadas sob refrigeração (5°C) os grupos experimentais foram: controle (Kenney) e controle adicionado de goma xantana (0,01%, 0,12% e 0,25%). Parâmetros espermáticos, como motilidade, funcionalidade mitocondrial e integridade da membrana, acrossoma e DNA foram avaliados após 0h, 24h, 48h e 72h de armazenamento. Nos experimentos realizados nas amostras de sêmen dos peixes da espécie L. marmoratus (n=8) foram utilizados dimetilsulfóxido (DMSO): 5, 10, 15 e 20% e trealose: 50, 100, 150, 200mM. As amostras foram diluídas (1:9 v/v), congeladas em recipiente de vapor de nitrogênio (dryshipper), e armazenadas em nitrogênio líquido a -196°C. Após o descongelamento foram analisados parâmetros de motilidade espermática (CASA), tempo de motilidade, integridade de membrana, DNA e funcionalidade mitocôndria. No experimento realizado nas amostras de sêmen da espécie equina a motilidade espermática diminuiu ao longo do período de resfriamento no grupo que recebeu 0,25% de goma xantana em comparação com o grupo controle (60.5 e 44.73% respectivamente). Nos experimentos realizados nas amostras de sêmen dos peixes da espécie L. marmoratus, com o uso de protocolo de criopreservação baseado na utilização de diferentes concentrações de DMSO, quanto as motilidades totais e progressivas, linha curva de velocidade (VCL), linha reta de velocidade (VSL) e linearidade, o tratamento contendo 5% de DMSO apresentou resultados inferiores aos tratamentos contendo 15 e 20% de DMSO (P<0,05). O tratamento contendo 10% de DMSO não diferiu dos demais tratamentos (P>0,05). Já no protocolo baseado no uso da trealose, motilidades totais e progressivas superiores foram observadas nos grupos que receberam as maiores concentrações 150mM (22,9 e 17,7%, respectivamente) e 200mM (31,4 e 26,3%, respectivamente) (P <0,05) quando comparadas aos demais grupos, no entanto, não diferindo do tratamento com trealose 100mM (18,6 e 15,3%, respectivamente). Assim, nas condições testadas nesse estudo a adição de goma xantana não é prejudicial à estrutura espermática equina, apesar de reduzir a motilidade total das células. O DMSO não foi eficiente para preservar a qualidade seminal do sêmen dos peixes da espécie L. marmoratus. Além disso o tratamento com trealose em altas concentrações demonstraram resultados superiores quando comparados a outros tratamentos em parâmetros de motilidade in vitro para L. marmoratus. |
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2021-10-19T00:46:59Z2021-10-182021-10-19T00:46:59Z2019-02-18GHELLER, Stela Mari Meneghello. Criopreservação do sêmen de Jundiá Amazônico (Leiarius marmoratus) e refrigeração de sêmen equino. 2019. 84f. Tese (Doutorado em Veterinária) - Faculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, 2019.http://guaiaca.ufpel.edu.br/handle/prefix/8028Este estudo avaliou os efeitos da adição de goma xantana no diluente de resfriamento de sêmen equino e de dois protocolos distintos de criopreservação de sêmen de peixes Leiarius marmoratus, sobre parâmetros de qualidade espermática analisados in vitro. No experimento realizado nas amostras de sêmen da espécie equina, (n=20) armazenadas sob refrigeração (5°C) os grupos experimentais foram: controle (Kenney) e controle adicionado de goma xantana (0,01%, 0,12% e 0,25%). Parâmetros espermáticos, como motilidade, funcionalidade mitocondrial e integridade da membrana, acrossoma e DNA foram avaliados após 0h, 24h, 48h e 72h de armazenamento. Nos experimentos realizados nas amostras de sêmen dos peixes da espécie L. marmoratus (n=8) foram utilizados dimetilsulfóxido (DMSO): 5, 10, 15 e 20% e trealose: 50, 100, 150, 200mM. As amostras foram diluídas (1:9 v/v), congeladas em recipiente de vapor de nitrogênio (dryshipper), e armazenadas em nitrogênio líquido a -196°C. Após o descongelamento foram analisados parâmetros de motilidade espermática (CASA), tempo de motilidade, integridade de membrana, DNA e funcionalidade mitocôndria. No experimento realizado nas amostras de sêmen da espécie equina a motilidade espermática diminuiu ao longo do período de resfriamento no grupo que recebeu 0,25% de goma xantana em comparação com o grupo controle (60.5 e 44.73% respectivamente). Nos experimentos realizados nas amostras de sêmen dos peixes da espécie L. marmoratus, com o uso de protocolo de criopreservação baseado na utilização de diferentes concentrações de DMSO, quanto as motilidades totais e progressivas, linha curva de velocidade (VCL), linha reta de velocidade (VSL) e linearidade, o tratamento contendo 5% de DMSO apresentou resultados inferiores aos tratamentos contendo 15 e 20% de DMSO (P<0,05). O tratamento contendo 10% de DMSO não diferiu dos demais tratamentos (P>0,05). Já no protocolo baseado no uso da trealose, motilidades totais e progressivas superiores foram observadas nos grupos que receberam as maiores concentrações 150mM (22,9 e 17,7%, respectivamente) e 200mM (31,4 e 26,3%, respectivamente) (P <0,05) quando comparadas aos demais grupos, no entanto, não diferindo do tratamento com trealose 100mM (18,6 e 15,3%, respectivamente). Assim, nas condições testadas nesse estudo a adição de goma xantana não é prejudicial à estrutura espermática equina, apesar de reduzir a motilidade total das células. O DMSO não foi eficiente para preservar a qualidade seminal do sêmen dos peixes da espécie L. marmoratus. Além disso o tratamento com trealose em altas concentrações demonstraram resultados superiores quando comparados a outros tratamentos em parâmetros de motilidade in vitro para L. marmoratus.This study assessed the effects on sperm quality when Xanthan gum was added to stallion sperm in a cooling protocol and two cryoprotectants added to fish semen (Leiarius marmoratus) in two freezing protocols. The stallion semen (n=20) samples were stored cooled (5°C) using different concentrations of xanthan gum added to the standard extender (Kenney): control (no xanthan added), 0.01%, 0.12%, and 0.25%). Sperm parameters, such as motility, mitochondrial function, membrane integrity, acrosome integrity, and DNA integrity, were analyzed after 0, 24, 48, and 72 hours of storage. In the fish species L. marmoratus (n=8), semen samples were diluted in dimethyl sulfoxide (DMSO) at 5, 10, 15, and 20% concentrations and in trehalose at 50, 100, 150, and 200 mM concentrations. Samples were diluted (1:9, v/v), frozen in nitrogen vapor vessel (dry shipper), and stored in liquid nitrogen vessel at -196°C. The semen parameters sperm motility (CASA), motility duration, membrane integrity, DNA, and mitochondrial function were assessed post-thawing. Regarding the cooling protocol, the sperm motility was decreased during cooling process in the group 0.25% xanthan gum when compared to the control group (60.5% and 44.73%, respectively). The cryopreservation protocol using trehalose at 50 mM obtained 15.6 and 9.5 % of total and progressive motilities, respectively, being these results inferior to the treatments containing trehalose at 150 mM (22.9 and 17.7%, respectively) and 200 mM (31.4 and 26.3%, respectively) (P<0.05). However, it did not differ from treatment with trehalose at 100 mM (18.6 and 15.3 of total and progressive motilities respectively). In the cryopreservation protocol using DMSO, the parameters total and progressive motilities, velocity curved line (VCL), velocity straight line (VSL) and linearity (LIN) were inferior in the treatment at 5% DMSO concentration when compared to treatments containing DMSO at 15 and 20% concentrations (P<0.05). Treatment containing DMSO at 10% did not differ from other treatments (P>0.05). Therefore, in these experimental conditions the addition of xanthan gum to stallion sperm is not harmful to the sperm cell structure, despite of reducing total motility. DMSO was not efficient to preserve semen quality and the addition of trehalose at high concentrations exhibited superior results when compared to other treatments in in vitro motility parameters in L. marmoratus.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESporUniversidade Federal de PelotasPrograma de Pós-Graduação em VeterináriaUFPelBrasilFaculdade de VeterináriaCNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA::REPRODUCAO ANIMALCélula espermáticaEquinosSiluriformesCrioprotetoresRefrigeraçãoCoolingCryoprotectansSiluriformesSperm cellsStallionCriopreservação do sêmen de Jundiá Amazônico (Leiarius marmoratus) e refrigeração de sêmen equinoSemen cryopreservation of Amazonian catfish (Leiarius marmoratus) and stallion semen coolinginfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesishttp://lattes.cnpq.br/9350820418226626http://lattes.cnpq.br/8041711996066835Corcini, Carine Dahlhttp://lattes.cnpq.br/7340307576119827Varela Junior, Antonio SergioGheller, Stela Mari MeneghelloGHELLER, Stela Mari Meneghello. Criopreservação do sêmen de Jundiá Amazônico (Leiarius marmoratus) e refrigeração de sêmen equino. 2019. 84f. Tese (Doutorado em Veterinária) - Faculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, 2019.info:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFPel - Guaiacainstname:Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)instacron:UFPELTEXTtese_stela_mari_meneghello_gheller.pdf.txttese_stela_mari_meneghello_gheller.pdf.txtExtracted texttext/plain150082http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8028/6/tese_stela_mari_meneghello_gheller.pdf.txtecdf5a2dc9833b05cdccaeaeaf8d96ebMD56open accessTHUMBNAILtese_stela_mari_meneghello_gheller.pdf.jpgtese_stela_mari_meneghello_gheller.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1235http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8028/7/tese_stela_mari_meneghello_gheller.pdf.jpg3bf80deed403f6bd8e84276082e849c8MD57open accessORIGINALtese_stela_mari_meneghello_gheller.pdftese_stela_mari_meneghello_gheller.pdfapplication/pdf1347993http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8028/1/tese_stela_mari_meneghello_gheller.pdfc7d1966659ba3ff9b90380b7443b87c7MD51open accessCC-LICENSElicense_urllicense_urltext/plain; charset=utf-849http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8028/2/license_url4afdbb8c545fd630ea7db775da747b2fMD52open accesslicense_textlicense_texttext/html; charset=utf-80http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8028/3/license_textd41d8cd98f00b204e9800998ecf8427eMD53open accesslicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-80http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8028/4/license_rdfd41d8cd98f00b204e9800998ecf8427eMD54open accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81866http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8028/5/license.txt43cd690d6a359e86c1fe3d5b7cba0c9bMD55open accessprefix/80282023-07-13 05:34:38.109open accessoai:guaiaca.ufpel.edu.br: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ório InstitucionalPUBhttp://repositorio.ufpel.edu.br/oai/requestrippel@ufpel.edu.br || repositorio@ufpel.edu.br || aline.batista@ufpel.edu.bropendoar:2023-07-13T08:34:38Repositório Institucional da UFPel - Guaiaca - Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)false |
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