Determinação da atividade citotóxica in vitro de compostos fitoquímicos e associações em células MDBK e de melanoma (B16F10)

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Gonçalves, Helena Piúma
Data de Publicação: 2019
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPel - Guaiaca
Texto Completo: http://guaiaca.ufpel.edu.br/handle/prefix/7938
Resumo: Os produtos naturais são considerados promissores agentes para prevenção e tratamento do câncer. O melanoma evidencia-se pela alta malignidade e potencial metastático, sendo a quimioterapia a principal modalidade de tratamento, porém, ocasiona citotoxicidade e efeitos deletérios ao organismo. Estas adversidades impulsionam a pesquisa por tratamentos alternativos para o melanoma, com eficácia e segurança. Neste âmbito, o objetivo do estudo foi avaliar a atividade citotóxica in vitro dos compostos fenólicos (ácido cafeico e ácido p-cumárico), terpênicos (eucaliptol e gama terpineno) e flavonoide (quercetina), em células neoplásicas de melanoma murino (B16F10) e células de linhagem de rim bovino (MDBK), além de avaliar as associações entres estes e a carboplatina. Os compostos fitoquímicos foram obtidos comercialmente (Sigma-Aldrich ®), sendo testados nas concentrações de 3 a 0,02 mg.mL-1. Após diluição em meio de cultivo celular e DMSO 0,5%, os compostos e carboplatina foram distribuídos em placas de 96 poços, sobre as células B16F10 e MDBK, que foram incubadas por 24 horas, a 37°C com atmosfera úmida e 5% de CO2. A viabilidade celular foi avaliada pelo ensaio MTT e a leitura por espectrofotômetro (540nm). Todos os compostos apresentaram efeito citotóxico para as células de melanoma, variando entre alta e moderada citotoxicidade. Em relação às células MDBK, os compostos apresentaram toxicidade baixa a moderada. A toxicidade dos compostos para as células B16F10 foi maior do que para as células MDBK. Considerando as médias de todas as concentrações testadas, a quercetina apresentou alta toxicidade para B16F10, e baixa toxicidade para as células MDBK. Os compostos ácico cafeico, ácido p-cumárico, eucaliptol e gama terpineno apresentaram baixa toxicidade para MDBK e moderada toxicidade para B16F10. Quanto às associações entre os compostos e carboplatina, os níveis de toxicidade variaram em função das concentrações testadas. Carboplatina (1 mg.mL-1) apresentou baixa toxicidade para as células de melanoma, enquanto que as associações de carboplatina com ácido cafeico, ácido p-cumárico, eucaliptol, gama terpineno e quercetina (1 mg.mL-1) promoveram aumento na toxicidade para B16F10. Conclui-se que os compostos ácido cafeico, ácido p-cumárico, eucaliptol, gama terpineno e quercetina apresentam atividade citotóxica em B16F10, e as associações dos compostos com carboplatina incrementaram a atividade deste quimioterápico. Portanto, estes compostos são promissores para a sequência de pesquisas.
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spelling 2021-08-13T20:29:50Z2021-08-112021-08-13T20:29:50Z2019-02-28GONÇALVES, Helena Piúma. Determinação da atividade citotóxica in vitro de compostos fitoquímicos e associações em células MDBK e de melanoma (B16F10). 2019. 71 f. Dissertação (Mestrado em Veterinária) - Faculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, 2019.http://guaiaca.ufpel.edu.br/handle/prefix/7938Os produtos naturais são considerados promissores agentes para prevenção e tratamento do câncer. O melanoma evidencia-se pela alta malignidade e potencial metastático, sendo a quimioterapia a principal modalidade de tratamento, porém, ocasiona citotoxicidade e efeitos deletérios ao organismo. Estas adversidades impulsionam a pesquisa por tratamentos alternativos para o melanoma, com eficácia e segurança. Neste âmbito, o objetivo do estudo foi avaliar a atividade citotóxica in vitro dos compostos fenólicos (ácido cafeico e ácido p-cumárico), terpênicos (eucaliptol e gama terpineno) e flavonoide (quercetina), em células neoplásicas de melanoma murino (B16F10) e células de linhagem de rim bovino (MDBK), além de avaliar as associações entres estes e a carboplatina. Os compostos fitoquímicos foram obtidos comercialmente (Sigma-Aldrich ®), sendo testados nas concentrações de 3 a 0,02 mg.mL-1. Após diluição em meio de cultivo celular e DMSO 0,5%, os compostos e carboplatina foram distribuídos em placas de 96 poços, sobre as células B16F10 e MDBK, que foram incubadas por 24 horas, a 37°C com atmosfera úmida e 5% de CO2. A viabilidade celular foi avaliada pelo ensaio MTT e a leitura por espectrofotômetro (540nm). Todos os compostos apresentaram efeito citotóxico para as células de melanoma, variando entre alta e moderada citotoxicidade. Em relação às células MDBK, os compostos apresentaram toxicidade baixa a moderada. A toxicidade dos compostos para as células B16F10 foi maior do que para as células MDBK. Considerando as médias de todas as concentrações testadas, a quercetina apresentou alta toxicidade para B16F10, e baixa toxicidade para as células MDBK. Os compostos ácico cafeico, ácido p-cumárico, eucaliptol e gama terpineno apresentaram baixa toxicidade para MDBK e moderada toxicidade para B16F10. Quanto às associações entre os compostos e carboplatina, os níveis de toxicidade variaram em função das concentrações testadas. Carboplatina (1 mg.mL-1) apresentou baixa toxicidade para as células de melanoma, enquanto que as associações de carboplatina com ácido cafeico, ácido p-cumárico, eucaliptol, gama terpineno e quercetina (1 mg.mL-1) promoveram aumento na toxicidade para B16F10. Conclui-se que os compostos ácido cafeico, ácido p-cumárico, eucaliptol, gama terpineno e quercetina apresentam atividade citotóxica em B16F10, e as associações dos compostos com carboplatina incrementaram a atividade deste quimioterápico. Portanto, estes compostos são promissores para a sequência de pesquisas.Natural products are considered promising agents for cancer prevention and treatment. Melanoma is evidenced by the high malignancy and metastatic potential, being that chemotherapy is the main treatment modality, however, its promotes cytotoxicity and deleterious effects to the organism. These adversities drive research into alternative treatments for treatment of melanoma, effectively and safely. In this context, the objective of this study was to evaluate the in vitro cytotoxic activity of phenolic compounds (caffeic acid and p-coumaric acid), terpenes (eucalyptol and gamma terpinene) and flavonoid (quercetin) in murine melanoma (B16F10) and bovine kidney cells (MDBK), in addition to evaluating the associations between these and carboplatin. Phytochemicals were obtained commercially (Sigma-Aldrich ®) and were tested at concentrations of 3 to 0.02 mg.mL-1. After dilution in cell culture medium and 0.5% DMSO, the compounds and carboplatin were distributed in 96-well plates on the B16F10 and MDBK cells, which were incubated for 24 hours at 37ºC with humid atmosphere and 5% of CO2. Cell viability was assessed by MTT assay and spectrophotometer reading (540nm). All compounds showed a cytotoxic effect on melanoma cells, ranging from high to moderate cytotoxicity. Regarding cytotoxicity in MDBK, the compounds showed low to moderate levels of toxicity. The toxicity of the compounds to B16F10 cells was greater than for MDBK cells. Considering the averages of all concentrations tested, the quercetin compound showed high toxicity to B16F10 cells, and low to MDBK cells. The compounds caffeic acid, p-coumaric acid, eucalyptol and gamma terpinene showed low toxicity to MDBK and moderate toxicity to B16F10 cells. Regarding the associations between the compounds and carboplatin, the levels of toxicity varied according to the concentrations tested, and their activities were dose-dependent. Carboplatin (1 mg.mL-1) had low toxicity to melanoma cells, whereas carboplatin (1 mg.mL-1) was associated with caffeic acid, p-coumaric acid, eucalyptol, gamma terpinene and quercetin in 1 mg. mL-1, all promoted increased cellular toxicity to B16F10. Thus, it is concluded that the compounds caffeic acid, pcoumaric acid, eucalyptol, gamma terpinene and quercetin have antiproliferative activity in B16F10, and the associations of the compounds with carboplatin increased the antiproliferative activity of this chemotherapeutic in neoplastic cells. Therefore, these compounds are promising for the sequence of researches with interest in molecules with antineoplastic activity.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESporUniversidade Federal de PelotasPrograma de Pós-Graduação em VeterináriaUFPelBrasilFaculdade de VeterináriaCNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA::MEDICINA VETERINARIA PREVENTIVAÁcido cafeicoÁcido p-cumáricoEucaliptolGama terpinenoQuercetinaCaffeic acidEucalyptolGamma terpineneP-coumaric acidQuercetinDeterminação da atividade citotóxica in vitro de compostos fitoquímicos e associações em células MDBK e de melanoma (B16F10)Determination of the in vitro cytotoxic activity of phytochemical compounds and associations in MDBK and melanoma cells (B16F10)info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesishttp://lattes.cnpq.br/1719704359536835http://lattes.cnpq.br/9916986411712495Hübner, Silvia de Oliveira http://lattes.cnpq.br/8105578106258354Cleff, Marlete BrumGonçalves, Helena PiúmaGONÇALVES, Helena Piúma. Determinação da atividade citotóxica in vitro de compostos fitoquímicos e associações em células MDBK e de melanoma (B16F10). 2019. 71 f. Dissertação (Mestrado em Veterinária) - Faculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, 2019.info:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFPel - Guaiacainstname:Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)instacron:UFPELTEXTdissertacao_helena_piuma_goncalves.pdf.txtdissertacao_helena_piuma_goncalves.pdf.txtExtracted texttext/plain144078http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/7938/6/dissertacao_helena_piuma_goncalves.pdf.txt8d8cd1b6ae63ea3b389ba04eea13a286MD56open accessTHUMBNAILdissertacao_helena_piuma_goncalves.pdf.jpgdissertacao_helena_piuma_goncalves.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1252http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/7938/7/dissertacao_helena_piuma_goncalves.pdf.jpg82ab958520780e3b6cfe9dbeefa4dee1MD57open accessORIGINALdissertacao_helena_piuma_goncalves.pdfdissertacao_helena_piuma_goncalves.pdfapplication/pdf2887165http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/7938/1/dissertacao_helena_piuma_goncalves.pdfff8bd8eb9cc62d573c2813ac360e5754MD51open accessCC-LICENSElicense_urllicense_urltext/plain; charset=utf-849http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/7938/2/license_url4afdbb8c545fd630ea7db775da747b2fMD52open accesslicense_textlicense_texttext/html; charset=utf-80http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/7938/3/license_textd41d8cd98f00b204e9800998ecf8427eMD53open accesslicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-80http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/7938/4/license_rdfd41d8cd98f00b204e9800998ecf8427eMD54open accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81866http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/7938/5/license.txt43cd690d6a359e86c1fe3d5b7cba0c9bMD55open accessprefix/79382024-02-01 19:14:57.191open accessoai:guaiaca.ufpel.edu.br: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ório InstitucionalPUBhttp://repositorio.ufpel.edu.br/oai/requestrippel@ufpel.edu.br || repositorio@ufpel.edu.br || aline.batista@ufpel.edu.bropendoar:2024-02-01T22:14:57Repositório Institucional da UFPel - Guaiaca - Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)false
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