Suplementação com soro sanguíneo de vacas leiteiras em diferentes períodos de lactação na produção in vitro de embriões bovinos
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Data de Publicação: | 2017 |
Tipo de documento: | Dissertação |
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Título da fonte: | Repositório Institucional da UFPel - Guaiaca |
Texto Completo: | http://guaiaca.ufpel.edu.br/handle/prefix/4637 |
Resumo: | O período de transição de vacas leiteiras caracteriza-se por várias alterações metabólicas, devido ao balanço energético negativo (BEN). Este BEN afeta de forma negativa a fertilidade. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da suplementação com soro sanguíneo de vacas leiteiras em diferentes períodos de lactação no meio de maturação sobre as taxas de maturação nuclear, clivagem e desenvolvimento embrionário inicial em bovinos. Em 13 repetições, 1634 complexos cumulos oócitos (CCOs) foram coletados e aspirados de ovários de fêmeas bovinas provenientes de abatedouros locais. Os CCOs foram divididos aleatoriamente em três tratamentos contendo 50 CCOs cada: SO: soro ovino usado como controle; FL: soro de quatro vacas com 354 ± 3,8 dias pós-parto (pp) e PP: soro de quatro vacas com 10,8 ± 4,8 dias pp. Posteriormente, os CCOs foram incubados em estufa a 39 °C com 5% de CO2 durante 24h no meio de maturação conforme os tratamentos. A inseminação foi procedida com uma concentração de 1x106 espermatozoides/mL utilizando gradiente mini-Percoll® para seleção espermática. Após a inseminação, os CCOs foram incubados por 18h. Os zigotos permaneceram no meio de cultivo SOFaa nas mesmas condições da MIV durante 7 dias. Para análises da maturação nuclear utilizaram-se quatro rotinas com um total de 320 oócitos os quais foram coletados após a MIV, desnudados e corados com Hoechst®. O momento da inseminação foi considerado como dia 0, a taxa de clivagem foi avaliada no dia 3 e a taxa de desenvolvimento embrionário global no dia 7. Segundo os resultados, não foi observada diferença no número de oócitos que atingiram o estágio de metáfase II entre os tratamentos. A taxa de clivagem foi melhor no SO: 66,9% (368/577) do que no PP: 47% (243/517) (P<0,05). O desenvolvimento embrionário foi melhor no SO: 22,7% (131/577) quando comparados aos tratamentos FL: 15% (81/540) e PP: 16,6% (80/517) (P<0,05). Concluiu-se que a suplementação com soro sanguíneo de vacas em diferentes períodos da lactação no meio de MIV de oócitos bovinos não interferiu na taxa de maturação nuclear, clivagem e no desenvolvimento embrionário inicial entre os tratamentos FL e PP. |
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O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da suplementação com soro sanguíneo de vacas leiteiras em diferentes períodos de lactação no meio de maturação sobre as taxas de maturação nuclear, clivagem e desenvolvimento embrionário inicial em bovinos. Em 13 repetições, 1634 complexos cumulos oócitos (CCOs) foram coletados e aspirados de ovários de fêmeas bovinas provenientes de abatedouros locais. Os CCOs foram divididos aleatoriamente em três tratamentos contendo 50 CCOs cada: SO: soro ovino usado como controle; FL: soro de quatro vacas com 354 ± 3,8 dias pós-parto (pp) e PP: soro de quatro vacas com 10,8 ± 4,8 dias pp. Posteriormente, os CCOs foram incubados em estufa a 39 °C com 5% de CO2 durante 24h no meio de maturação conforme os tratamentos. A inseminação foi procedida com uma concentração de 1x106 espermatozoides/mL utilizando gradiente mini-Percoll® para seleção espermática. Após a inseminação, os CCOs foram incubados por 18h. Os zigotos permaneceram no meio de cultivo SOFaa nas mesmas condições da MIV durante 7 dias. Para análises da maturação nuclear utilizaram-se quatro rotinas com um total de 320 oócitos os quais foram coletados após a MIV, desnudados e corados com Hoechst®. O momento da inseminação foi considerado como dia 0, a taxa de clivagem foi avaliada no dia 3 e a taxa de desenvolvimento embrionário global no dia 7. Segundo os resultados, não foi observada diferença no número de oócitos que atingiram o estágio de metáfase II entre os tratamentos. A taxa de clivagem foi melhor no SO: 66,9% (368/577) do que no PP: 47% (243/517) (P<0,05). O desenvolvimento embrionário foi melhor no SO: 22,7% (131/577) quando comparados aos tratamentos FL: 15% (81/540) e PP: 16,6% (80/517) (P<0,05). Concluiu-se que a suplementação com soro sanguíneo de vacas em diferentes períodos da lactação no meio de MIV de oócitos bovinos não interferiu na taxa de maturação nuclear, clivagem e no desenvolvimento embrionário inicial entre os tratamentos FL e PP.The transition period of dairy cows is characterized by several metabolic changes, leading to negative energy balance (NEB). NEB affects fertility in a negative way. The purpose of this work was to evaluate the effect of blood serum supplementation of dairy cows at different lactation periods in the maturation medium on the rates of nuclear maturation, cleavage and initial embryonic development. In 13 replicates, 1634 cumulus oocyte complexes (COCs) were collected and aspirated from ovaries of bovine females from local slaughterhouses. The COCs were randomly divided into three treatments containing 50 COCs each: SO: sheep serum used as control; FL: cow serum with 354 ± 3.8 days postpartum (pp) and PP: cow serum with 10.8 ± 4.8 days pp. Subsequently, the COCs were incubated at 39 ° C with 5% CO2 for 24 hours in the maturation medium according to the treatments. The insemination was carried out with a concentration of 1x106 spermatozoa / mL using mini-Percoll® gradient for spermatic selection. After insemination, the COCs were incubated for 18 hours. The zygotes remained in SOFaa culture medium under the same IMV conditions for 7 days. For analysis of nuclear maturation, four routines were used with a total of 320 oocytes which were collected after IMV, stripped and stained with Hoechst®. The time of insemination was considered as day 0, the cleavage was evaluated at day 3 and the overall embryonic development rate at day 7. According to the results no difference was observed in the number of oocytes that reached the stage of metaphase II between treatments. The cleavage rate was better in SO: 66.9% (368/577) than in PP: 47% (243/517) (P <0.05). Embryonic development was better at SO: 22.7% (131/577) when compared to FL treatments: 15% (81/540) and PP: 16.6% (80/517) (P <0.05). It was concluded that blood serum supplementation of cows at different lactation periods in the bovine oocyte IVM medium did not interfere with the rate of nuclear maturation, cleavage and early embryonic development with treatments FL and PP.Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPqporUniversidade Federal de PelotasPrograma de Pós-Graduação em VeterináriaUFPelBrasilFaculdade de VeterináriaCNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIAVeterináriaVacas leiteirasLactaçãoOócitosBovinosSuplementação com soro sanguíneo de vacas leiteiras em diferentes períodos de lactação na produção in vitro de embriões bovinosSupplementation with blood serum of dairy cows at different lactation periods in the in vitro production of bovine embryosinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFPel - Guaiacainstname:Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)instacron:UFPELTEXTdissertacao_leticia_franco_collares.pdf.txtdissertacao_leticia_franco_collares.pdf.txtExtracted texttext/plain72187http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/4637/6/dissertacao_leticia_franco_collares.pdf.txt7ec686c2108e3e2f5fc1a59ca6b4bd8bMD56open accessTHUMBNAILdissertacao_leticia_franco_collares.pdf.jpgdissertacao_leticia_franco_collares.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1231http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/4637/7/dissertacao_leticia_franco_collares.pdf.jpgcd7d4b700cc66aa571800e471cf281b2MD57open accessORIGINALdissertacao_leticia_franco_collares.pdfdissertacao_leticia_franco_collares.pdfapplication/pdf597678http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/4637/1/dissertacao_leticia_franco_collares.pdf638af7511ad8ccb97596c6dfbcce8ecfMD51open accessCC-LICENSElicense_urllicense_urltext/plain; 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