Caracterização de polimorfismos na região do promotor do gene da paraoxonase 1 (PON1) e seu efeito sobre a atividade enzimática em vacas leiteiras
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Data de Publicação: | 2014 |
Tipo de documento: | Dissertação |
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Título da fonte: | Repositório Institucional da UFPel - Guaiaca |
Texto Completo: | http://repositorio.ufpel.edu.br/handle/prefix/3060 |
Resumo: | Marcadores moleculares, cada vez mais, vem sendo utilizados em programas de melhoramento genético de bovinos leiteiros, incluindo várias características produtivas e sanitárias. Por outro lado, a reduzida atividade da paraoxonase (PON1) na circulação dos animais está associada com maior ocorrência de doenças nestes indivíduos, sendo que há pouca informação quanto a influência do gene da PON1 neste processo. O objetivo deste estudo foi caracterizar a ocorrência de polimorfismos na região promotora do gene da PON1, bem como avaliar a sua relação com a atividade sérica desta proteína no periparto de vacas leiteiras da raça Holandês. Foram utilizadas 28 vacas da raça Holandês, das quais coletou-se sangue para análise da atividade sérica da PON1. Estas avaliações foram feitas nos dias -21, -7, 0, 3, 6, 9, e 23 (dia 0 = dia do parto). Foi realizada a extração de DNA dos leucócitos circulantes e a partir daí foi feito o PCR dessas amostras, visando a amplificação de um fragmento de DNA contendo 828 pb no promotor da PON1. Após a eletroforese em gel de agarose, as amostras foram purificadas e sequenciadas para identificação dos polimorfismos. Foram encontrados seis SNPs no promotor do gene da PON1, localizados nas posições -22, -105, -221, -392, -611 e -676. Destes, os SNPs -105, -221 e -611 foram correlacionados com a atividade sérica da PON1 no período avaliado (p<0,05), sendo que os genótipos PON1-105(AA), PON1-221(AA) e PON1-611(CC) apresentaram os maiores níveis de PON1 (p<0,05). Além disto, os SNPs -105 e -221 apresentaram diferenças nos níveis de PON1 durante o pré-parto(p<0,05). Em conclusão, foram identificados 6 SNPs na região do promotor do gene da PON1, dos quais três estão associados com a atividade da enzima. |
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O objetivo deste estudo foi caracterizar a ocorrência de polimorfismos na região promotora do gene da PON1, bem como avaliar a sua relação com a atividade sérica desta proteína no periparto de vacas leiteiras da raça Holandês. Foram utilizadas 28 vacas da raça Holandês, das quais coletou-se sangue para análise da atividade sérica da PON1. Estas avaliações foram feitas nos dias -21, -7, 0, 3, 6, 9, e 23 (dia 0 = dia do parto). Foi realizada a extração de DNA dos leucócitos circulantes e a partir daí foi feito o PCR dessas amostras, visando a amplificação de um fragmento de DNA contendo 828 pb no promotor da PON1. Após a eletroforese em gel de agarose, as amostras foram purificadas e sequenciadas para identificação dos polimorfismos. Foram encontrados seis SNPs no promotor do gene da PON1, localizados nas posições -22, -105, -221, -392, -611 e -676. Destes, os SNPs -105, -221 e -611 foram correlacionados com a atividade sérica da PON1 no período avaliado (p<0,05), sendo que os genótipos PON1-105(AA), PON1-221(AA) e PON1-611(CC) apresentaram os maiores níveis de PON1 (p<0,05). Além disto, os SNPs -105 e -221 apresentaram diferenças nos níveis de PON1 durante o pré-parto(p<0,05). Em conclusão, foram identificados 6 SNPs na região do promotor do gene da PON1, dos quais três estão associados com a atividade da enzima.Molecular markers, increasingly are being used in breeding programs of dairy cattle, including several production and health characteristics. On the other hand, the reduced activity of paraoxonase (PON1) in the circulation of animals is associated with increased occurrence of diseases in these individuals, there is little information regarding the influence of the PON1 gene in this process. The aim of this study was to characterize the occurrence of polymorphisms in the promoter region of the PON1 gene and to evaluate its relationship with serum PON1 activity in peripartum dairy Holstein cows. For that blood was collected from 28 Holstein cows for analysis of serum activity of paraoxonase (PON1). The sampling was performed on days -21, -7, 0, 3, 6, 9 and 23 (day 0 = day of calving). DNA extraction was performed in circulating leukocytes and PCR of these samples was performed, targeting the amplification of a DNA fragment containing 828 bp in the PON1 promoter. After agarose gel electrophoresis, the samples were purified and sequenced to identify the polymorphisms. Six SNPs were found in the promoter of the PON1 gene, located at positions -22, -105, -221, -392, -611 and -676. From these, SNPs -105, -221 and -611 were associated with serum PON1 activity during the study period (p < 0.05), whereas the PON1-105(AA), PON1-221(AA) and PON1 -611(CC) genotypes had higher levels of PON1 (p < 0.05). Moreover, SNPs -105 and -221 had differences in the levels of PON1 already during the prepartum period (p < 0.05). In conclusion, 6 SNPs were identified in the promoter of the PON1 gene, three of which are associated with the activity of the enzyme.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESporUniversidade Federal de PelotasPrograma de Pós-Graduação em VeterináriaUFPelBrasilFaculdade de VeterináriaCNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA::MEDICINA VETERINARIA PREVENTIVA::SAUDE ANIMAL (PROGRAMAS SANITARIOS)VeterináriaDNAFatores de transcriçãoEnzimasSNPTranscription factorsEnzymeCaracterização de polimorfismos na região do promotor do gene da paraoxonase 1 (PON1) e seu efeito sobre a atividade enzimática em vacas leiteirasCharacterization of polymorphisms in the promoter region of the paraoxonase 1 (PON1) gene and its effect on enzyme activity in dairy cowsinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFPel - Guaiacainstname:Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)instacron:UFPELTEXTdissertacao_pedro_silveira.pdf.txtdissertacao_pedro_silveira.pdf.txtExtracted texttext/plain53431http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/3060/6/dissertacao_pedro_silveira.pdf.txt9f28adc39cabe495d26d8fa3c058de12MD56open accessTHUMBNAILdissertacao_pedro_silveira.pdf.jpgdissertacao_pedro_silveira.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1447http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/3060/7/dissertacao_pedro_silveira.pdf.jpg9c36ff04937ad2c35dc1203309fec484MD57open accessORIGINALdissertacao_pedro_silveira.pdfdissertacao_pedro_silveira.pdfapplication/pdf618469http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/3060/1/dissertacao_pedro_silveira.pdf2d5be3b5e8360e244f71d3c147be68afMD51open accessCC-LICENSElicense_urllicense_urltext/plain; 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