Efeito da administração crônica de metionina e/ou metionina sulfóxido sobre o status redox, sistema purinérgico e fenótipo de macrófagos peritoneais de camundongos
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Data de Publicação: | 2019 |
Tipo de documento: | Dissertação |
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Resumo: | A hipermetioninemia é uma doença caracterizada pela deficiência ou ausência da enzima metionina adenosiltransferase (MAT). Essa condição resulta em elevados níveis sanguíneos de metionina (Met), assim como de seus metabólitos, dentre eles a metionina sulfóxido (MetO). Os pacientes afetados podem apresentar distúrbios neurológicos e hepáticos envolvendo inflamação e estresse oxidativo, porém a fisiopatologia dessas alterações ainda permanece pouco elucidada. Dessa forma, o objetivo do presente trabalho foi investigar o efeito da administração crônica de Met e/ou MetO sobre o fenótipo expresso por macrófagos peritoneais de camundongos jovens, avaliando parâmetros inflamatórios, de estresse oxidativo e do sistema purinérgico. Os animais foram divididos em quatro grupos: I (controle); II (Met); III (MetO) e IV (Met + MetO). Nesse protocolo, os animais receberam uma injeção subcutânea de Met (0,35 - 1,2 g/kg) e/ou MetO (0,09-0,3 g/kg) do 10ο ao 38ο dia de vida, duas vezes ao dia, com intervalo de 8 horas entre as aplicações. Os resultados demonstraram que a Met e/ou MetO induziram um fenótipo de ativação M1/clássico em macrófagos peritoneais, observado através do aumento dos níveis de fator de necrose tumoral α (TNF-α) e de nitrito, bem como redução da atividade da arginase. Além disso, Met e/ou MetO também alteraram a atividade das enzimas antioxidantes superóxido dismutase, catalase e glutationa peroxidase, os níveis de tiois totais e as espécies reativas de oxigênio nos macrófagos peritoneais. Por fim, a administração crônica de Met e/ou MetO promoveu alteração na hidrólise dos nucleotídeos de adenina ATP e ADP, observado através do aumento na atividade das ectonucleotidases. Esses resultados demonstraram uma polarização clássica M1/pró-inflamatória dos macrófagos, alterações no status redox e no sistema purinérgico pela exposição crônica aos aminoácidos Met/MetO. Em conjunto, nossos achados podem contribuir para o entendimento das alterações presentes nos pacientes hipermetioninêmicos, e assim auxiliar na busca por novos alvos terapêuticos. |
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2023-12-08T17:08:01Z2023-12-08T17:08:01Z2019-07-19FRANCESCHI, Thaís Scolari. Efeito da administração crônica de metionina e/ou metionina sulfóxido sobre o status redox, sistema purinérgico e fenótipo de macrófagos peritoneais de camundongos. 2019. 77 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica e Bioprospecção) - Centro de Ciências Químicas, Farmacêuticas e de Alimentos, Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, 2019.http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/handle/prefix/10902A hipermetioninemia é uma doença caracterizada pela deficiência ou ausência da enzima metionina adenosiltransferase (MAT). Essa condição resulta em elevados níveis sanguíneos de metionina (Met), assim como de seus metabólitos, dentre eles a metionina sulfóxido (MetO). Os pacientes afetados podem apresentar distúrbios neurológicos e hepáticos envolvendo inflamação e estresse oxidativo, porém a fisiopatologia dessas alterações ainda permanece pouco elucidada. Dessa forma, o objetivo do presente trabalho foi investigar o efeito da administração crônica de Met e/ou MetO sobre o fenótipo expresso por macrófagos peritoneais de camundongos jovens, avaliando parâmetros inflamatórios, de estresse oxidativo e do sistema purinérgico. Os animais foram divididos em quatro grupos: I (controle); II (Met); III (MetO) e IV (Met + MetO). Nesse protocolo, os animais receberam uma injeção subcutânea de Met (0,35 - 1,2 g/kg) e/ou MetO (0,09-0,3 g/kg) do 10ο ao 38ο dia de vida, duas vezes ao dia, com intervalo de 8 horas entre as aplicações. Os resultados demonstraram que a Met e/ou MetO induziram um fenótipo de ativação M1/clássico em macrófagos peritoneais, observado através do aumento dos níveis de fator de necrose tumoral α (TNF-α) e de nitrito, bem como redução da atividade da arginase. Além disso, Met e/ou MetO também alteraram a atividade das enzimas antioxidantes superóxido dismutase, catalase e glutationa peroxidase, os níveis de tiois totais e as espécies reativas de oxigênio nos macrófagos peritoneais. Por fim, a administração crônica de Met e/ou MetO promoveu alteração na hidrólise dos nucleotídeos de adenina ATP e ADP, observado através do aumento na atividade das ectonucleotidases. Esses resultados demonstraram uma polarização clássica M1/pró-inflamatória dos macrófagos, alterações no status redox e no sistema purinérgico pela exposição crônica aos aminoácidos Met/MetO. Em conjunto, nossos achados podem contribuir para o entendimento das alterações presentes nos pacientes hipermetioninêmicos, e assim auxiliar na busca por novos alvos terapêuticos.Hypermetioninemia is a disease characterized by the deficiency or absence of the enzyme methionine adenosyltransferase (MAT), this condition results in high blood levels of methionine (Met) and its metabolites, such as methionine sulfoxide (MetO). Hypermethioninemic patients may present with neurological and hepatic disorders involving inflammation and oxidative stress, but the pathophysiology of these events remains unclear. Thus, the objective of the present study was to investigate the effect of chronic administration of Met and/or MetO on the phenotype expressed by peritoneal macrophages of young mice, evaluating inflammatory, oxidative stress and purinergic parameters. The animals were divided into four groups: I (control); II (Met); III (MetO) and IV (Met + MetO). In this protocol, the animals received a subcutaneous injection of Met (0.35 - 1.2 g/kg) and/or MetO (0.09-0.3 g/kg) from 10 to 38 days of life, twice daily, with an 8-hour interval between applications. The results demonstrated that Met and/or MetO induced a M1/classical activation phenotype in peritoneal macrophages, observed through increased levels of tumor necrosis factor α (TNF-α) and nitrite, and reduction of arginase activity. In addition, Met and/or MetO also altered the activity of antioxidant enzymes superoxide dismutase, catalase and glutathione peroxidase, as well as total thiol content and levels of reactive oxygen species in the peritoneal macrophages. Finally, chronic administration of Met and/or MetO promoted alteration in the hydrolysis of adenine nucleotides ATP and ADP, observed through the increase in ectonucleotidase activity. These findings demonstrated a M1/classical macrophage polarization, alterations in the redox status and purinergic system, which may contribute to the understanding of alterations present in hypermethioninemic patients, in order to aid in the search for new therapeutic targets.Sem bolsaporUniversidade Federal de PelotasPrograma de Pós-Graduação em Bioquímica e BioprospecçãoUFPelBrasilCC BY-NC-SAinfo:eu-repo/semantics/openAccessCIENCIAS BIOLOGICASBIOQUIMICABioquímicaMetioninaEfeito da administração crônica de metionina e/ou metionina sulfóxido sobre o status redox, sistema purinérgico e fenótipo de macrófagos peritoneais de camundongosEffect of chronic administration of methionine and/or methionine sulfoxide on redox status, purinergic system and peritoneal macrophages phenotype from miceinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesishttp://lattes.cnpq.br/7214267661054265https://orcid.org/0000-0001-5945-3723http://lattes.cnpq.br/8828875564145245Stefanello, Francieli MoroFranceschi, Thaís Scolarireponame:Repositório Institucional da UFPel - Guaiacainstname:Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)instacron:UFPELORIGINALdissertacao_thais_franceschi.pdfdissertacao_thais_franceschi.pdfapplication/pdf901765http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/10902/1/dissertacao_thais_franceschi.pdf3ce1dc329bf08f33606d03e93713788dMD51open accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; 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